深圳市人民医院产科 518000
【摘 要】目的 研究胎盘组织中PPARγ的表达情况与IUGR相关性。方法 荧光定量PCR（SYBR Green法）检测PPARγ-mRNA。结果 PPARγ在AGA（正常孕龄儿体重）组和LGA（大于孕龄儿体重）组胎盘组织中的表达量明显高于SGA（小于孕龄儿体重）组约2倍左右。PPARγ的表达与胎儿出生体重和胎盘重量正相关。结论 PPARγ在小于孕龄儿体重组胎盘组织中表达下调直接关系着胎儿及胎盘组织的重量，它与IUGR存在相关性。
【关键词】IUGR；过氧化物酶体增殖物激活受体-γ；胎盘；胎儿
过氧化物酶体增殖物激活受体_γ（PPARγ）是属于一类超家族配体激活的核激素受体，调节新陈代谢，抗炎和发育过程[1]。具体地说，PPARγ从脂肪细胞分化的开始，到之后分化成白色和棕色脂肪的的过程中是必不可少的[2]。PPARγ也在人类胎盘组织中有表达，特别是在滋养细胞层，它是胎盘形成和发育过程中的关键。
胎儿生长受限（IUGR，intrauterine growth restriction）在第八版妇产科学中定义为无法达到其应有生长潜力的低出生体重的小于孕龄儿（SGA，small-for-gestational age）即出生体重低于其平均体重2个标准差的新生儿。目前对于PPARγ mRNA在IUGR时的胎盘组织中的表达情况尚无定论。本研究中则着重研究PPARγ在单胎分娩的IUGR病例的胎盘组织中表达情况。
1.资料与方法：
1.1临床资料收集和分组 研究选择2011年1月-2013年9月在深圳市人民医院建册并规范产检的单胎妊娠孕妇共116人，孕周在妊娠37-42周之间终止妊娠。排除孕期高血压、糖尿病、酗酒，吸烟及服用药物等，排除先天性基因或染色体异常、宫内感染及有害的环境因素等。将出生体重在2.9-3.7kg（正常范围平均值±1.1）分为正常符合孕龄儿体重组（AGA组），出生体重在1.9-2.5kg为小于孕龄儿出生体重组（SGA组）（小于正常范围平均值的±2个标准差），出生体重在4.0-4.9kg为大于孕龄儿出生体重组（LAG组）（大于正常范围平均值的±2个标准差）。记录孕妇年龄、体重、孕期增重、血压、吸烟与否，以及胎盘重量、新生儿体重和身长。
1.2标本收集 每个样本均在生理盐水钟反复冲洗3次后，放置-80℃冰箱保存至抽提RNA。
1.3胎盘组织中总RNA提取和荧光定量PCR（SYBR Green法）检测：（1）总RNA提取：参照RNA提取试剂盒方法步骤进行。（2）逆转录；（3）引物设计合成：GenBank上查找目的基因mRNA序列，在CDS区设计特异性引物。（4）标准曲线建立。（5）结果计算：荧光定量仪ABI 7500全自动荧光定量PCR仪（美国ABI公司），由电脑自动绘出标准曲线，分析并计算待测样本中目的基因的准确含量。
1.4统计学处理：采用SPSS 16.0版本统计软件，进行统计学处理。采用One-way ANOVA分析、单因素两两比较检验及多元回归相关性分析。以P<0.05或<0.01为差异具有统计学意义。
2、结果
2．1 116例中剖宫产有31例（约占27%），AGA组55例，SGA组32例，LGA组29例。PPARγ在AGA 组和LGA组胎盘组织中的表达量明显高于SGA组约2倍左右，而在AGA 组和LGA组胎盘组织中的表达则没有明显差别。
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2．2 将母体体重指数、孕龄、新生儿身长、新生儿出生体重及胎盘重量做为自变量，PPARγ为因变量，进行多元线性回归相关分析发现PPARγ的表达与胎儿出生体重和胎盘重量正相关（r2=0.201，r2=0.144）。
3、讨论
PPARγ在调节胎盘滋养层脂肪蓄积，及脂肪酸从胎盘向胎儿转运过程也均起到了至关重要的作用。人类胎盘组织中的PPAR-γ主要在滋养细胞中表达，滋养层细胞中PPAR-γ激活后可刺激绒毛细胞滋养层细胞的分化和增强内分泌功能，进而调节细胞滋养层分化及侵入等过程，利于胎盘形成和发育。PPAR-γ缺失时表现出胎盘发育和滋养层分化及侵入功能失调，胎盘功能障碍最终造成IUG等病理妊娠。本研究发现SGA组胎盘组织中PPARγ的表达低于AGA组及LGA组，只有SGA组胎盘中组织PPARγ表达与胎盘重量和胎儿出生时体重正相关。可见，PPARγ在胎盘发育及滋养层分化过程中起到关键性作用。
PPARγ同时在胎盘脂肪酸代谢中也起到关键性作用。在多个种族间已报道有关PPARα和PPARγ与肥胖的关联[3]。研究发现PPARγ缺乏的胎盘组织中，脂质含量下降[2]。总之，PPARγ在胎盘脂肪酸转运吸收及积聚过程中是必需的，特别是活化的PPARγ。研究认为胎盘组织中基因甲基化增加不利于宫内环境改善。这可能是由于PPARγ通过组蛋白修饰，能够启动DNA甲基化引起染色质产生变化，PPARγ表达下调，最终发生表观遗传的改变[5]。SGA组胎盘组织中的PPARγ表达较其它组相比是表达下调，而AGA组和LAG组PPARγ表达无明显统计学差异。由此可见，SGA组胎盘组织中PPARγ表达较其他组表达下调有可能是胎盘某些基因组甲基化增加所致，而在AGA组及LGA组则是相反的。本研究首次对大样本的足月单胎并且无合并症的胎盘组织中PPARγ表达进行了研究。但是未对PPAR其它亚型及其蛋白表达定量进行研究，因此未能进一步从蛋白水平上对其造成IUGR提供实验基础研究依据。但可以肯定的是胎盘组织中PPARγ某些特定基因功能区域的甲基化模式，它对胎儿发育及远期新城代谢存在一定影响。
总之，PPARγ在SGA组胎盘组织中表达下调直接关系着胎儿及胎盘组织的重量。
参考文献：
[1].Desvergne B，Michalik L，Wahli W.Be fit or be sick：peroxisome proliferator-activated receptors are down the road.Mol Endocrinol 2004，18：1321–1332.
[2]Barak Y，Nelson MC，Ong ES，et al.PPAR_ is required for placental，cardiac，and adipose tissue development.Mol Cell 1999，4：585–595
[3]J Cecil JE，Watt P，Palmer CN，et a1．Energy balance and food intake：the role of PPARy gene polymorphisms．Physiol Behav，2006，88：227—233．
[4].Bildirici I，Roh CR，Schaiff WT，et a1． The lipid droplet-associated protein adipophilin is expressed in human trophoblasts and is regulated by peroxisomal proliferator-activated receptor-_/retinoid X receptor.J Clin Endocrinol Metab 2003，88：6056–6062
[5].Gheorghe CP，Goyal R，Mittal A，Longo LD.Gene expression in the placenta：maternal stress and epigenetic responses.Int J Dev Biol 2010，54：507–523
注基金项目：广东省医学科研基金项目，编号A2014635
论文作者:周俊,郭晓辉
论文发表刊物:《航空军医》2016年第16期
论文发表时间:2016/9/8
标签：胎盘论文; 组织论文; 体重论文; 胎儿论文; 细胞论文; 重量论文; 相关性论文; 《航空军医》2016年第16期论文;