江永县疾病预防控制中心 湖南永州 425400
摘要:目的:对120起微生物性食物中毒检测对策的分析。方法:资料选择2009年1月~2014年6月的120起微生物性食物中毒样本,作为研究对象,先进行增菌,然后做涂片处理,最后染色并镜检,于显微镜下寻找出优势菌群,接种于选择性培养基中进行培养和分析。结果:在120起微生物性食物中毒样本中,共检出病原菌109起(90.83%),其有102起优势菌群被选出进行选择性培养,102起均有检出物,检出率高达100.00%。结论:利用直接涂片法检测微生物性食物中毒的检出率高、且检测方法简单,值得推广应用。
关键词:微生物;食物中毒;检测对策
食物中毒主要是指摄入了含有化学性、生物性有毒有害物质的食品,或是将有毒有害物质误当作食品摄入,由此导致的非传染性急性、亚急性疾病。在各种引起食物中毒的案例中,由微生物引起的食物中毒最为常见,尤其是在人们食用含有大量微生物或微生物毒素的食物后,很容易发生中毒现象。本文就对120起微生物性食物中毒的检测对策展开分析,以期能为卫生检验人员迅速、准确做出病原学检查提供帮助,现详细作如下报道。
1.资料与方法
1.1一般资料
资料选择2009年1月~2014年6月的120起微生物性食物中毒样本,样本主要从食物中毒患者的急性期呕吐物、血清、急性期粪便以及一些残余食物、用具中采集,采集前采集容器均进行灭菌处理,采集方法严格根据食物中毒的样本采集要求进行,均为现场取样。
1.2方法
1.2.1检测前准备
120起生物性食物中毒样本均采生化培养箱(生产企业:杭州汇尔仪器有限公司;型号:SPX-0328)进行培养,并应用恒温箱进行恒温处理。微生物试剂大部分由国内试剂厂直接提供,部分试剂由本检测中心自行配制。实验动物为:小白鼠重量20~25g;家兔重量1.8~2.6kg;幼猫重量250~300g。
1.2.2检测方法
首先,将采集到的120起微生物性食物中毒样本接种到肉汤培养基中,于37℃下增菌培养6~8h,然后进行涂片处理观察活力,并进行染色,在显微镜下观察病原菌形态,在视野范围内寻找出优势菌群(以最可能的“致病菌”为原则选择优势菌群)。其次,将筛选出的优势菌群样本均进行接种操作,将其接种于选择性培养基中,在36~37℃的恒温箱中培养18h后,进行纯化培养,并进行结果记录。同时需注意,对非优势菌群进行选择性增多培养。再次,对于小白鼠行腹腔注射,对于病原菌致感染的家兔行回肠段结扎,对于幼猫行呕吐毒物实验。
1.3统计学处理
通过SPSS19.0统计学软件分析以及处理本组研究数据,以率表示计数数据。
2.结果
通过检测结果分析可见,本次研究的120起微生物性食物中毒样本中,共检出有病原菌的样本有109起,检出率为90.83%;所检出的病原菌种类包括沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、副溶血性弧菌、变形杆菌、肠出血性大肠杆菌0157:H7、致病大肠埃希氏菌等7种病原菌。从109起微生物食物中毒样本中又筛选出有优势菌群的样本102起,对此102起样本进行选择性培养,结果显示102起样本均有检出致病微生物,检出率高达100.00%,如表1所示。
3.讨论
微生物性食物中毒属于食物食物中毒中较为常见的中毒类型,由于微生物性食物中毒会给人类带来严重的危害,其也是食品卫生检测的重要内容之一。由微生物引起的食物中毒主要为细菌性食物中毒与真菌性食物中毒两种。⑴细菌性食物中毒。细菌性食物中毒可根据中毒的机理(或途径)分为毒素性与感染性两类,毒素性主要是指可在食物中或在人的肠道中产生毒素的微生物,包括金黄色葡萄球菌、志贺氏菌A群Ⅰ型及部分Ⅱ型、肉毒梭菌等;感染性主要是指可在人的肠道中增生的微生物,例如志贺氏菌、沙门氏菌、病原性大肠肝菌、变形杆菌等,均属于感染性微生物的。⑵真菌性食物中毒。真菌性食物中毒中所指的真菌,属于微生物中的高级生物,其包括有性繁殖器官(有性孢子)与无性繁殖器官两种,在自然界中广泛存在。真菌又有单细胞和多细胞之分,酵母菌与部分霉菌,属于单细胞真菌;食用菌及大多数霉菌,是属于多细胞真菌内的。在微生物性食物中毒中,由真菌引起的食物中毒主要为霉菌毒素[1]。
微生物性食物中毒中,常规检测技术主要如下几类:其一,细菌总数检验法。对食品等样本进行相应的处理,在一定条件下进行培养,所得1ml(g)样品中所含菌落总数。细菌总数检测法主要用来判断食品被污染的程度,以分别患者是否因这些食物而导致中毒。二,大肠菌群检验法。大肠菌群多是指具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌,根据细菌定义的不同,检测方法也会有所不同。三,致病菌检验法。由于致病菌种类很多,所采用的检测方法也各有不同,但一般都要经过前增菌和增菌—分离—生化试验—血清学分型鉴定等几类步骤。在微生物性食物中毒检测工作中,对常规检测技术的应用比较广泛,但从目前食物中毒的情况来看,其已由过去单一的菌种转为多菌种,由于多菌种交叉污染,所引起的症状也会混淆是非,因此,在食物中毒检测工作中,采用常规检测法时会选择多种检测项目,因此也增加了检测工作强度[2-3]。
基于上述因素考虑,本检测中心采用直接涂片—优势菌群选择—纯化培养检测对策行微生物性食物中毒检测,该检测方法的适用度高,操作简单,在多种病原菌检测中均可以使用,不必再根据菌种的不同选择不同的检测方法。应用于微生物性食物中毒中时,检出率高达100.00%,由此也提示此种检测方法的可行性与有效性。但通过本次研究也认为,为提高检测结果的准确性,一定要保证所采集样本的质量,防止在采集检测过程中样本被污染。
综上所述,按照GB/T4789-2003中规定的标准方法进行微生物性食品中毒检测,需要时间长、工作量繁重,且容易因条件不足、经验不足等因素无法作出正确、客观的判断。而应用直接涂片法检测微生物性食物中毒,检测效果理想,操作方法简单,不失为较佳的选择。
参考文献:
[1]曹兆进,沈艳云.副溶血性弧菌所致一起食物中毒事件的报告[J].中国保健营养,2014,19(7):80-81.
[2]郭丹桂,许少洪.实时荧光定量PCR技术在疫情和食物中毒检测中的应用[J].职业与健康,2013,10(21):116-117.
[3]薛成玉,等.食品中沙门氏菌污染状况分析及VITEK微生物鉴定系统的应用[J].中国初级卫生保健,2011,6(16):1024-1025.
论文作者:毛转辉
论文发表刊物:《健康世界》2015年1期
论文发表时间:2015/9/18
标签:食物中毒论文; 微生物论文; 样本论文; 检出论文; 病原菌论文; 真菌论文; 涂片论文; 《健康世界》2015年1期论文;