张荔[1]2006年在《拟VD大鼠学习记忆与NMDA、AMPA受体亚单位、离子通道关系探讨及人参皂苷Rg_2的干预》文中研究表明目的在慢性脑低灌注拟血管性痴呆(VD)大鼠模型上，探讨相关兴奋性氨基酸受体-谷氨酸受体的离子型受体NMDA受体亚型NR1、NR2A、NR2B和AMPA受体亚型GluR2的基因表达和对学习记忆影响关系的可能机制和人参皂苷Rg_2干预作用以及人参皂苷Rg_2对脑神经元电压门控K~+、Na~+、Ca~(2+)离子通道的影响。兴奋性氨基酸(EAA)在血管性痴呆(Vascular dementia，VD)的发病机制中起着一定的作用，其中谷氨酸可能起着更重要的作用。由于谷氨酸(Glu)及其受体(GluR)参与了突触的发生、延伸及以突触可塑性为生理基础的学习、记忆等过程的诸多机制，而且Glu的神经毒性通过它的受体发挥作用，所以探讨GluR的异常与痴呆的发病关系具有十分重要的意义。VD为一临床常见慢性进行性疾病，主要与缺血性脑病有关。脑缺血后钠、钾和钙离子通道的通透性异常和神经细胞内外离子平衡的紊乱是缺血性脑损伤的重要机制之一，离子稳态的失衡发生在缺血的早期阶段，引发了随后的一系列级联反应，最终导致VD患者出现智力和行为的异常。该病的发生机制复杂，目前尚未完全阐明，迄今为止尚无理想的治疗VD的有效药物，因此我们探讨上述机制的同时，还观察了人参皂苷Rg_2的干预作用，分析其神经保护作用的可能途径。方法(1)2-VO法(双侧颈总动脉永久性结扎)造成慢性脑低灌注前脑缺血，制成拟血管性痴呆大鼠模型。(2)动物模型评价标准及检测方法：手术后1d，分别对术后大鼠进行卒中指数、神经病学症状评定。(3)开场行为(Open filed)法：分别给予不同剂量的人参皂苷治疗，并与钙拮抗剂尼莫地平进行对照。术后5d，检测模型大鼠的探究反应和自发活动。用以检测其行为变化及为下一步水迷宫作准备。(4)水迷宫(Water maze)行为学检测：Open filed之后，然后分别于术前、术后6、7d采用水迷宫法检测各组大鼠行为变化。(5)RT-PCR方法，以β-actin为内参，检测NMDAR1、NR2A、NR2B、GluR2的mRNA水平表达的变化。(6)在以上研究的基础上，用膜片钳技术进一步观察人参皂苷Rg_2对脑神经元电压门控K~+、Na~+、Ca~(2+)离子通道的影响。结果(1)通过对动物模型卒中指数和神经病学症状观察，证明带有血管性痴呆行为特征的动物模型成功。(2)Open field试验显示：模型鼠垂直运动和水平运动均减少，与假手术鼠相比有显着性差异(P＜0.01)。(3)Water maze检测：学习和记忆能力明显降低，表现为：模型组信息游泳时间延长，选择游泳时间延长，正确率降低，与正常组及假手术组比较有显着性差异(P＜0.01)。(4)人参皂苷Rg_a 2.5，5，10mg／kg可以剂量依赖性缩短大鼠的信息游泳和选择游泳时间，和模型组相比有显着性差异，尼莫地平未见明显缩短大鼠的信息游泳和选择游泳时间。(5)采用RT-PCR方法，以β-actin为内参，模型组与正常组相比，NMDAR1表达增强(P＜0.05)，而NR2A、NR2B、GluR2的表达减弱(P＜0.01)；与模型组相比，人参皂苷Rg_2组NMDAR1基因表达减弱(P＜0.01)，而NR2A、NR2B、GluR2表达增强(P＜0.05，0.01)；尼莫地平组未见明显改变。(6)在非缺氧条件下，膜片钳显示人参皂苷Rg_2对正常海马神经元细胞K~+、Na~+、Ca~(2+)离子通道无明显影响。结论(1)本研究证实了慢性脑低灌注拟血管性痴呆大鼠的探究能力和自发活动显着降低、学习记忆能力下降，脑组织NMDAR1的基因表达增强、而NR2A、NR2B、GluR2降低。(2)人参皂苷Rg_2通过调控NR1，NR2A，NR2B，GluR2相关基因的表达，减轻兴奋性氨基酸的毒性，对拟血管性痴呆大鼠学习记忆能力及行为学障碍有显着的改善作用。(3)人参皂苷Rg_2对正常脑神经元电压门控K~+、Na~+、Ca~(2+)离子通道无明显影响。非缺氧状态下，其作用不是通过影响离子通道而产生神经保护作用的。
唐劼[2]2003年在《局灶性脑缺血和人参皂苷Rg_2的干预作用》文中提出目的 观察脑缺血期间脑血流量(CBF)、生化代谢的变化与缺血脑组织损伤程度的关系，来研究脑缺血损伤机制及人参皂苷Rg_2的作用。方法 采用显微外科技术，电凝闭经眶暴露的猫左侧MCA起始部，建立局灶性脑缺血模型。在缺血前及缺血期间用MFV-1200型电磁流量计测量CBF，MPA2000多道生物信号采样分析系统监控心电、平均动脉压(MABP)。6小时后取左侧半脑的新鲜脑片行TTC染色估测梗死面积。生化方法用来测定颞顶皮层组织匀浆中的SOD活度、和MDA、LA含量。结果 MCAO造成脑组织大面积梗死(68.4±1.60％)，缺血前分别给予人参皂苷Rg_3(1，2，4mg/kg)和Nimodipine(2ug/kg)可使梗死面积分别减少15±2％，27±5％，38±3％，30±3％(P＜0.01)，但在各组间CBF和其他生理指标无差异。与假手术组比较，模型组SOD活力明显降低，MDA含量升高(P＜0.01)。人参皂苷Rg_2可抑制SOD活力的下降和MDA升高，并呈剂量依赖性。Nimodipine也显示了同样的作用。在MCA供血区，乳酸酸中毒可被人参皂苷Rg_2以剂量依赖方式缓解，而Nimodipine未予缓解。结论 我们认为猫持续性MCAO缺血6小时造成脑组织不可逆性损伤可部分归因于脂质过氧化和代谢性酸中毒。人参皂苷Rg_2可通过增强缺血脑组织抗氧化能力和抑制酸中毒来减小脑梗死面积。
顾玉宝, 刘敬霞, 王枫, 刘抒雯, 刘超[3]2017年在《人参皂苷治疗缺血性脑卒中研究进展》文中研究表明缺血性脑血管病是指脑部血液供血不足引起的脑组织缺血性损害,使局部血液循环所提供的氧和其它营养物质与神经元代谢需求之间骤然供应与需求不平衡,最终导致缺血中央区的神经元坏死的一类疾病,其临床表现为肢体无力、偏瘫、感觉障碍、语言障碍、视觉障碍、共济失调等~([1])。脑血管疾病是造成人类死亡的叁大疾病之一,具有高发病率、高病死率、高致残率的特点,严重危害人类健康并降低患者的生存质量。缺血性脑卒中是由于大脑主要动脉的血流短暂或持久阻断所引起,
刘晓丹[4]2012年在《黄芪总苷有效成分和叁七总皂苷有效成分配伍抗PC12细胞氧化损伤作用的研究》文中指出目的：研究黄芪总苷的主要有效成分黄芪甲苷和叁七总皂苷的主要有效成分人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1和叁七皂苷R1及其配伍抗CoCl2诱导的PC12细胞氧化损伤的有效配伍剂量,并主要从氧化应激和细胞凋亡的线粒体途径初步研究其机制。方法：1：采用经神经生长因子(NGF)转分化的PC12细胞作为神经细胞,以氯化钴诱导PC12细胞建立氧化损伤模型,以细胞乳酸脱氢酶(LDH)漏出率为指标,研究4种有效成分对PC12细胞氧化损伤的有效抑制浓度。在此基础上按U8*(85)均匀设计实验,确定4种有效成分的有效配伍剂量。2：实验细胞分为空白组(只加无血清培养基600μ1),乙醇-PBS组(加入50%的乙醇-PBS60μL+无血清培养基540μL),COCl2损伤组(加入终浓度为600μmol/L的CoCl260μL+无血清培养基540μL),乙醇-PBS-CoCl2组(加入50%的乙醇-PBS60μL+无血清培养基480μL3h后+终浓度为600μmol/L的CoC1260μL),人参皂苷Rg1组(加入无血清培养基480μL+人参皂苷Rg160μL作用3h,再加入终浓度为600μmol/L的CoCl260μL),人参皂苷Rb1组(加入无血清培养基480μL+人参皂苷Rb160μL作用3h,再加入终浓度为600μmol/LCoCl260μL),叁七皂苷R1组(加入无血清培养基480μL+叁七皂苷R160μL作用3h,再加入终浓度为600μmol/L的CoCl260μL),黄芪甲苷组(加入无血清培养基480μL+黄芪甲苷60μL作用3h,再加入终浓度为600μmol/L的CoCl260μL),阳性对照药依达拉奉组(加入无血清培养基480μL+终浓度为20μmoL/L依达拉奉60μL作用3h,再加入终浓度为600μmol/L的CoCl260μL),有效成分配伍方组(加入无血清培养基480μL+有效成分配伍方60gL,再加入终浓度为600μmol/L的CoCl260μL),以终浓度为5μg/mLHoechst33258试剂进行荧光染色,在荧光显微镜下摄取5个不重复视野,计算5个视野的凋亡细胞数和总细胞数,计算凋亡率。3：细胞同2进行分组处理后,加入终浓度为10μmol/1DCFH-DA染液进行荧光染色,在荧光显微镜下随机选取5个不重复视野摄片,测定其绿色荧光强度,以平均荧光强度定量细胞内活性氧(ROS)。4：细胞同上进行分组处理后,以100μg/LRh123进行荧光染色,在荧光显微镜下随机选取5个不重复视野摄片,测定其绿色荧光强度,以平均荧光强度定量线粒体膜电位(MMP)。结果：1.4种有效成分都能抑制(?)CoCl2诱导的PC12细胞LDH的漏出(P<0.05)。且随着药物浓度的增加,对LDH漏出率的抑制作用增强。黄芪甲苷和人参皂苷Rb1在50μmol/L,人参皂苷Rg1和叁七皂苷R1在100μmol/L浓度时LDH漏出抑制率约为80%。U8*(85)均匀设计实验多元逐步回归分析得：4种有效成分的8个不同浓度配伍都能抑制CoC12诱导的PC12细胞LDH的释放(P<0.05)。人参皂苷Rgl50μmol/L、黄芪甲苷0.78125μmol/L、人参皂苷Rb1和叁七皂苷R1各1.5625μmol/L配伍时抗PC12细胞氧化损伤的效应最强。2：与空白组比较,CoCl2和CoCl2-乙醇刺激组凋亡率明显上升(P<0.01)。应用4种有效成分及其配伍均能降低细胞凋亡率(P<0.01)与黄芪甲苷、人参皂苷Rb1和叁七皂苷R1组比较,有效成分配伍组抗细胞凋亡的作用增强(P<0.01),与人参皂苷Rg1组比较,显着性不明显(P>0.05)3：与空白组比较,CoCl2和CoCl2-乙醇刺激组DCF平均荧光强度明显增强(P<0.01),有效成分配伍组和各成分组和阳性药物依达拉奉均能不同程度的降低经CoCl2和CoCl2-乙醇刺激后细胞内DCF的荧光强度(P<0.01),与四种有效成分组比,有效成分配伍组不具显着性。4：与空白组比较,CoCl2组和CoCl2-乙醇刺激组平均荧光强度明显下降(P<0.01),4种有效成分单独使用可使平均荧光强度稍微上升,不具显着性(P>0.05),有效成分组平均荧光强度显着升高(P<0.01)。结论：人参皂苷Rgl50μmol/L、黄芪甲苷0.78125μmol/L、人参皂苷Rb1和叁七皂苷R1各1.5625μmol/L配伍组方具有抗PC12细胞氧化损伤的效应,其机制与抗细胞凋亡,升高线粒体膜电位和抑制细胞活性氧的释放有关。
初晓艺[5]2004年在《拟缺血损伤对PC12细胞的影响及人参皂苷Rg_2的干预》文中进行了进一步梳理目的 采用细胞培养加入连二亚硫酸钠的方法模拟缺血性损伤，研究PC12细胞拟缺血损伤后MTT代谢率、自由基生成、膜流动性、谷氨酸释放的改变及钙蛋白酶和凋亡相关蛋白BCL-2、BAX、caspase-3的表达的变化，并探讨人参皂苷Rg_2对PC12细胞拟缺血损伤的干预作用。 方法 利用PC12细胞株，采用细胞培养的方法，加入连二亚硫酸钠及无糖Earle's液培养12h后改为无血清的DMEM高糖培养基，继续培养24h，即造成拟缺血损伤，给药组在损伤同时加入不同浓度的人参皂苷Rg_2，并与药物尼莫地平(钙拮抗剂)及溶媒组进行对照。用生化方法测定MTT代谢率，上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活力，NO、MDA含量和膜流动性；用琼脂糖凝胶电泳检测DNA片段，免疫细胞化学方法检测PC12细胞中谷氨酸、钙蛋白酶及凋亡相关蛋白BCL-2、BAX、caspase-3的表达。 结果 模型组PC12细胞MTT代酣率降低，NO产生增多，上清液中LDH、MDA含量增高，膜流动性减低，谷氨酸释放增多，钙蛋白酶表达增多，caspase-3、BAX表达增多，BCL-2表达减少，与正常组比较差异有统计学意义(P＜0.05)。人参皂苷Rg_2可使PC12细胞MTT代谢率增高，NO产生减少，上青液中LDH、MDA含量减低，膜流动性改善，谷氨酸释放减少，钙蛋白酶表达减低，caspase-3、BAX表达减少，BCL-2表达量升高，与模型组比较差别有统计学意义(P＜0.05)，并且高剂量(0.4mmol／L)的人参皂苷Rg_2保护作用明显优于低(0.1mmol／L)、中剂量(0.2mmol／L)组，作用呈现剂量依赖性。 结论 拟缺血损伤后，PC12细胞MTT代谢率降低，膜流动性减低，谷氨酸释放增多，引起钙内流增多，而导致细胞内钙超载，激活钙蛋白酶增多，同量NO等自由基产生增多，BCL-2／BAX比例减低，激活caspase-3，促进细胞凋亡。人参皂中文摘要普Rg:能改善拟缺血损伤后PC12细胞的代谢能力和膜流动性，通过减少谷氨酸释放，减轻钙超载，减少自由基及NO的产厂1几及毒性作用，调控相关基因的表达，减轻缺血性损伤。
于洋, 刘学政, 包翠芬, 李晓明, 刘霞[6]2015年在《人参皂苷Rg1对局灶性脑缺血大鼠PARP-1和TNFR1表达的影响》文中研究指明目的探讨人参皂苷Rg1对局灶性脑缺血大脑皮质多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶(PARP)-1和肿瘤坏死因子受体(TNFR)1表达的影响。方法 90只健康SD大鼠随机均分为假手术组,单纯缺血组,人参皂苷Rg1低、中、高组,阳性对照组。于术前5 d至取材当日,假手术组与单纯缺血组分别腹腔注射生理盐水45 mg/kg,人参皂苷Rg1分别给10、20、40 mg/kg,阳性对照组尼莫地平1 mg/kg。采用大脑中动脉栓塞法制备局灶性脑缺血模型,神经功能缺损评分和TTC染色验证模型是否成功;采用免疫组织化学法和蛋白免疫印迹法检测大脑皮质缺血后PARP-1、TNFR1的表达。结果单纯缺血组较假手术组可见明显神经功能缺陷症状及大面积苍白色梗死区域;人参皂苷Rg1各组和阳性对照组神经功能评分和脑梗死体积百分比高于假手术组,低于单纯缺血组(P<0.05);人参皂苷Rg1各组与阳性对照组差异无统计学意义。人参皂苷Rg1低组每高倍视野PARP-1、TNFR1阳性细胞数高于假手术组和阳性对照组;中、高组高于假手术组,低于单纯缺血组(P<0.05)。单纯缺血组皮质PARP-1、TNFR1较假手术组阳性表达条带显着增强;人参皂苷Rg1低组PARP-1、TNFR1阳性表达高于假手术组;中组高于假手术组,低于单纯缺血组;高组低于单纯缺血组(P<0.05)。结论人参皂苷Rg1对大鼠局灶性脑缺血具有保护作用,其机制可能与下调大脑组织PARP-1、TNFR1的表达,对抗脑细胞坏死有关。
李渊渊[7]2018年在《人参皂苷对氧糖剥夺再灌注（OGD/R）神经干细胞增殖及分化的作用》文中研究说明目的人参皂苷(ginsengsaponin,GS)是中药人参干燥根的主要有效成分,现代中药药理学实验及临床运用等研究证明,人参皂苷对神经组织的生长和神经网络的建立具有促进作用。人参皂苷可上调缺血再灌注后脑组织的HIF-1 α蛋白和VEGF蛋白含量,通过旁分泌和自分泌的形式诱导神经干细胞的增殖与分化,从而促进脑损伤结构和功能的修复。本研究在课题组前期工作的基础上,探讨人参皂苷对氧糖剥夺再灌注(OGD/R)胎鼠海马神经干细胞(NSCs)增殖及分化的作用。方法1胎鼠海马神经干细胞的分离培养及鉴定采用孕15-17d的SD大鼠,清洁级,体外分离培养胎鼠海马神经干细胞,并传代培养,通过免疫荧光染色法分别以Nestin、BrdU对神经干细胞及神经干细胞的增殖进行鉴定,以Tuj-1、Vimentin分别对神经元和星形胶质细胞祖细胞进行神经干细胞的分化鉴定。2建立胎鼠海马神经干细胞氧糖剥夺再灌注(OGD/R)模型将经过免疫荧光鉴定纯度为95%的胎鼠海马P2神经干细胞制备成单细胞悬液,显微镜下计数,调整细胞密度为1×105个/mL,均匀接种。设置正常组、模型组,正常组采用神经干细胞完全培养液、正常细胞培养箱(37℃、5%CO2)进行培养;模型组采用无葡萄糖的Earle氏液培养。在启动OGD前,预先用N2循环流通叁气培养箱,以除去残留的O2,待箱内O2约为16%时,放入已接种神经干细胞,继续置换培养液中的02,待箱内环境(37℃、1%02、5%C02、94%N2)持续30min后,计时培养4h;取出细胞,用神经干细胞完全培养液代替原培养液,继续放置37 ℃5%CO2培养箱中复氧培养4h以产生再灌注损伤。3 MTS法检测人参皂苷对氧糖剥夺再灌注(OGD/R)神经干细胞增殖的最佳作用浓度及最佳作用时间收集并制备P2神经干细胞单细胞悬液,将人参皂苷设置10个浓度梯度(200、100、50、25、12.5、5、2.5、1、0.5、0μg/mL),分别加入细胞培养液中对细胞进行培养,设置空白对照组,运用MTS法检测其在490nm波长处的OD值,计算以上不同浓度对神经干细胞增殖的影响,进而筛选出人参皂苷促进神经干细胞增殖的最佳作用浓度。同理,将人参皂苷以最佳作用浓度对神经干细胞单细胞悬液进行培养,并设置10个不同时间点(0、1、3、6、12、24、48、72、96、120h)及空白对照组,同样运用MTS法筛选出人参皂苷促进神经干细胞增殖的最佳作用时间点。4免疫荧光细胞染色法检测人参皂苷对氧糖剥夺再灌注(OGD/R)神经干细胞增殖及分化的作用收集并制备P2神经干细胞单细胞悬液,设置正常组、模型组及人参皂苷组;其中正常组进行常规细胞培养;模型组和人参皂苷组于叁气培养箱中缺氧培养4h,再灌注4h;取出细胞,将人参皂苷以最佳作用浓度分别加入以上叁组继续以最佳作用时间点予以培养,运用免疫荧光细胞染色法检测各组神经干细胞增殖及分化相关的特异性标志物Nestin、BrdU、Tuj-1 以及 Vimentin 的表达情况。结果1胎鼠海马神经干细胞的分离培养和鉴定体外成功分离培养胎鼠海马神经干细胞,经鉴定其纯度达95%以上。2人参皂苷促进氧糖剥夺再灌注(OGD/R)神经干细胞增殖的最佳作用浓度及最佳作用时间点①人参皂苷促进氧糖剥夺再灌注(OGD/R)神经干细胞增殖的最佳作用浓度为1μg/mL。②人参皂苷促进氧糖剥夺再灌注(OGD/R)神经干细胞增殖的最佳作用时间为点48h。3免疫荧光细胞染色法检测人参皂苷对氧糖剥夺再灌注(OGD/R)神经干细胞增殖及分化的影响与正常组比较,模型组Nestin分别与BrdU、Tuj-1、Vimentin标记的阳性细胞个数减少、和(或)突起数目减少,细胞体积减小;与模型组比较,人参皂苷组阳性细胞个数和(或)突起数目及体积明显增多,但少于正常组。人参皂苷具有促进氧糖剥夺再灌注(OGD/R)神经干细胞的增生及分化作用。结论11μg/mL和48h是人参皂苷促进氧糖剥夺再灌注(OGD/R)胎鼠海马神经干细胞增殖的最佳作用浓度及最佳作用时间点。人参皂苷能够促进氧糖剥夺再灌注(OGD/R)胎鼠海马神经干细胞阳性细胞和突起数目明显增多,并分化为神经元、星形胶质细胞的祖细胞,从而提示人参皂苷具有促进脑缺血后神经干细胞增殖和分化的作用,修复脑组织损伤。
沈爱男[8]2016年在《参麦注射液的化学成分对心脑缺血再灌注损伤的药理研究进展》文中研究说明参麦注射液是由红参与麦冬二味中药组成的制剂,用于治疗冠心病、心绞痛、脑梗死等心脑血管疾病,许多单体成分组成了其药效的物质基础。人体组织在缺血基础上恢复血流灌注后,给组织带来新的损伤,甚至发生不可逆性损伤,此现象称为缺血再灌注(ischemia reperfusion,IR)损伤。IR损伤发生的机制包括活性氧(ROS)大爆发、NO代谢障碍、炎性反应、氧化应激、细胞内Ca~(2+)超载、兴奋性氨基酸释放增加、内皮功能障碍、线粒体电位崩解通透性转换空(MPTP)开放、细胞凋亡等。心脑IR损伤易发生冠心病、心绞痛、脑梗死等心脑血管疾病,通过动物实验模型证实参麦注射液所含的单体成分能用于减轻IR损伤。综述参麦注射液对心脑IR损伤的药理研究文献,并对其研究进展及相关机理作了分析。
李亮, 邓文祥, 何军锋, 曾光, 刘旺华[9]2016年在《人参皂苷Rg1对局灶性脑缺血再灌注大鼠的神经保护作用》文中研究说明目的:探讨人参皂甙Rg1对局灶性脑缺血再灌注(FCIR)大鼠的神经保护作用。方法:72只大鼠随机分成假手术组、对照组、尼莫地平组(10.8 mg/kg)、人参皂苷Rg1低剂量组(10 mg/kg)、人参皂苷Rg1中剂量组(20 mg/kg)和人参皂苷Rg1高剂量组(40 mg/kg),每组12只。采用大脑中动脉栓塞法制备大鼠FCIR模型。假手术组和对照组给予生理盐水,其它各组则用相应药物连续灌胃14 d。治疗结束后,评定大鼠神经功能,检测顶颞叶皮质金属蛋白酶抑制因子(TIMP1)阳性细胞数及神经细胞凋亡。结果:人参皂苷Rg1各剂量组及尼莫地平组大鼠的神经功能评分明显低于对照组(P<0.05);对照组顶颞叶皮质TIMP1阳性细胞数明显高于假手术组(P<0.01),人参皂苷Rg1各组和尼莫地平组TIMP1阳性细胞数明显高于对照组(P<0.05或<0.01);对照组顶颞叶皮质细胞凋亡率高于假手术组(P<0.01),人参皂苷Rg1各组和尼莫地平组细胞凋亡率明显低于对照组(P<0.05或<0.01)。结论:人参皂苷Rg1可能通过促进TIMP1表达,降低神经细胞凋亡率,进而对FCIR大鼠起到神经保护作用。
李丹丹[10]2018年在《人参皂苷Rg1对局灶性脑缺血再灌注自噬及其相关基因Beclin-1、LC3、mTOR表达的影响》文中进行了进一步梳理目的探讨在大鼠局灶性脑缺血再灌注(cerebral ischemia reperfusion,CIR)后,人参皂苷Rg1对哺乳动物雷帕霉素(mammalian rapamycin,m TOR)、微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)、bcl-2同源结构域蛋白(bcl-2 homeodomain protein,Beclin-1)在各组别脑组织顶叶中的表达规律,在此基础上探讨人参皂苷Rg1对局灶性脑缺血再灌注自噬损伤的调控。方法将健康的雄性大鼠随机分为四组,分别为假手术组(sham组)、模型组(IR组)、人参皂苷Rg1给药组(Rg1组)和人参皂苷Rg1加自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)给药组(Rg1+3-MA组)。大鼠大脑局灶性缺血再灌注模型采用大脑中动脉栓塞(Middle cerebral artery occlusion,MCAO)2h再灌注24h的方法制备。通过观察各组间的神经功能缺损评分、脑组织含水量测定和2,3,5-叁苯基氯化四氮唑(2,3,5-triphenyltetrazolium chloride,TTC)染色结果鉴定模型是否成功。运用透射电镜观察各组别间大鼠脑组织神经元中的自噬情况;采用免疫荧光和免疫印迹定性定量检测各组间大鼠大脑顶叶m TOR、LC3、Beclin-1的表达。结果神经功能缺损评分结果示,sham组未见神经功能缺损症状;其余各组可见明显的神经功能缺损症状。脑组织含水量测定结果示,与sham组相比,其余各组的脑组织含水量明显增加。TTC染色结果示,sham组无梗死,其余各组可见明显苍白色梗死灶。与Rg1组相比,IR组和Rg1+3-MA组苍白色梗死灶体积明显增大。透射电镜结果示,sham组未见损伤的神经元形态;其余各组可见明显的神经元自噬。免疫荧光和免疫印迹结果示,IR组与Rg1+3-MA组无明显的差异。与sham组相比,其余各组间Beclin-1、LC3表达增加,m TOR表达降低,且在Rg1组中Beclin-1、LC3表达最高,m TOR表达最低。结论人参皂苷Rg1可能通过调节大脑顶叶Beclin-1、LC3和m TOR的表达水平,使脑组织细胞自噬水平上调,进而对大鼠局灶性脑缺血再灌注神经元起到保护作用。
参考文献：
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[8]. 参麦注射液的化学成分对心脑缺血再灌注损伤的药理研究进展[J]. 沈爱男. 抗感染药学. 2016
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[10]. 人参皂苷Rg1对局灶性脑缺血再灌注自噬及其相关基因Beclin-1、LC3、mTOR表达的影响[D]. 李丹丹. 锦州医科大学. 2018
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