（2广州市增城区人民医内三科 广东广州 511300）
【摘要】目的：探讨细胞块在胸腔积液细胞学疑难病例病理鉴别诊断中的临床应用价值。方法：对临床送检的40例疑难胸腔积液细胞学剩余标本制备石蜡细胞块，根据需要行免疫细胞化学染色，观察其对细胞病理诊断的辅助价值。结果：在40例胸腔积液细胞学疑难病例鉴别中，经过细胞块和（或）免疫细胞化学染色辅助诊断，11例诊断为转移性肺腺癌细胞，11例为癌细胞但来源未确定，6例诊断为反应性增生的间皮细胞，5例诊断为可疑癌细胞，4例诊断为各类炎性细胞，1例为转移性甲状腺乳头状癌细胞，1例为转移性肺鳞癌细胞，1例为可疑淋巴瘤细胞。结论：对细胞涂片诊断有疑难的胸腔积液细胞学病例制作细胞块行HE染色及免疫细胞化学染色，可提高诊断准确性，具有很大辅助诊断价值，值得应用推广。
【关键词】胸腔积液；细胞病理；细胞块；免疫细胞化学
【中图分类号】R446.8 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2018）06-0033-02
临床上胸腔积液是比较常见的病变，对胸腔积液抽放液体后，都需要常规送检病理细胞学检查。受过培训并有经验的病理医师，对胸腔积液细胞学的诊断在绝大部分情况下是准确可靠的，但在某些情况下良性和恶性细胞形态上存在一定程度的相似性，鉴别诊断会存在困难，因此需要客观的辅助方法以提高细胞学诊断准确性，本研究对存在诊断疑难的胸腔积液细胞学标本制作石蜡细胞块并行免疫细胞化学染色，旨在探讨细胞块制片及其免疫细胞化学检测在胸腔积液细胞学疑难病例鉴别诊断中的临床应用价值。
1.资料与方法
1.1 病例资料
收集2014年1月—2017年12月广州市增城区人民医院临床各科室送检的胸腔积液疑难细胞学标本40例，EP管、离心管、磷酸盐缓冲液（PBS）、免疫细胞化学所用CK、CK5/6、P63，CK7、TTF-1、LCA、Vimentin、Ki-67、WT-1等即用型抗体、二步法免疫组化检测试剂盒及DAB显色剂均购自福州迈新公司。
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1.2 细胞块制作
细胞学标本直接移入50ml离心管，2000r/min离心10min，去掉液体，加入6～10ml醋酸消化液（消除粘液和红细胞），振动器震荡10min，2000r/min 离心10min，去掉液体，如果细胞团块过大，可分装至其他EP管，调整细胞沉淀团块直径约4～5mm，加入95%乙醇，2000r/min离心10min，去掉上清，轻轻加入4%中性缓冲甲醛，2000r/min离心10min，用病理切片刀将EP管底部切开，小镊子轻轻将细胞块顶出，包在擦镜纸并染伊红，放入包埋盒中，进行常规冲洗、脱水、透明、浸蜡。
1.3 免疫细胞化学
石蜡细胞块4μm厚切片，防脱玻片捞片，70℃烤30min，常规脱蜡至水，采用即用型快捷免疫组化两步法染色，操作按照说明书进行，DAB显色镜下控色，PBS取代一抗作阴性对照，用已知阳性细胞做阳性对照。
2.结果
在40例胸腔积液细胞学疑难病例鉴别中，经过细胞块和（或）免疫细胞化学染色辅助诊断，11例诊断为转移性肺腺癌细胞，特征性表现为TTF-1和CK7阳性表达；11例为癌细胞但来源未确定，表现为CK、E-cadherin阳性，Vimentin阴性；6例诊断为反应性增生的间皮细胞，表现为CK、WT-1和Vimentin阳性，5例诊断为可疑癌细胞，4例诊断为各类炎性细胞，1例为转移性甲状腺乳头状癌细胞，1例为转移性肺鳞癌细胞，1例为可疑淋巴瘤细胞。
其中11例为癌细胞但来源未确定，5例诊断为可疑癌细胞，1例为可疑淋巴瘤细胞，是由于患者不愿意加做免疫细胞化学染色检查或其他进一步检查而未能明确诊断。
3.讨论
胸腔积液是由多种病理因素引起的异常病变。恶性胸腔积液由胸膜原发恶性肿瘤或胸膜腔内外恶性肿瘤通过血行、淋巴转移及直接种植至胸膜所引起的胸腔积液。原发性肺癌占恶性胸腔积液的40%或更多，且大多数为腺癌；转移性恶性肿瘤占胸腔积液中的45%[1]。恶性胸腔积液不易控制，积液量不断增多易并发肺不张和反复感染，常造成严重的呼吸困难和循环障碍。因此，早发现恶性胸腔积液，采取有效措施控制胸腔积液，缓解呼吸困难，提高生活质量，延长生命，成为治疗的关键，而胸腔积液细胞学病理检查就是确定胸腔积液良恶性质的重要手段。
受过培训并有经验的病理医师，对胸腔积液细胞学的诊断在绝大部分情况下是准确可靠的，但在某些情况下良性和恶性细胞形态上存在一定程度的相似性，鉴别诊断会存在困难，因此需要客观的辅助方法以提高细胞学诊断准确性。细胞块的出现很大程度上改变了此局面[2]。细胞块结合免疫细胞化学对细胞学疑难病例能大大提高诊断准确率[3,4]。
我们实际工作中，将胸腔积液细胞学标本先涂片染色检查，发现怀疑肿瘤细胞或不能排除恶性的病例或明确是癌细胞需要确定来源的，都归为疑难病例，均进行细胞块制作并根据需要选择多种抗体进行免疫细胞化学染色以进一步诊断。在实际应用40例此类病例后，结果显示在经过细胞块和（或）免疫细胞化学染色，大部分胸腔积液细胞学疑难病例能得到明确诊断。其中有11例为癌细胞但来源未确定，5例诊断为可疑癌细胞，1例为可疑淋巴瘤细胞，这些未能明确诊断的，是由于患者不愿意加做免疫细胞化学染色检查导致无法明确诊断。对细胞涂片诊断有疑难的胸腔积液细胞学病例制作细胞块行HE染色及免疫细胞化学染色，可提高诊断准确性，具有很大辅助诊断价值，值得应用推广。
【参考文献】
[1]冯兴. 恶性胸腔积液的诊断及治疗进展[J].中国医师杂志, 2011,13(12):1714-1717.
[2]吴才良,龙琼先,刘欣雅,等.免疫组化染色在体液细胞块中的作用[J].成都医学院学报,2013,8(3):316-317.
[3]李晓娟,李秀娟.免疫组织化学在胸腔积液细胞块腺癌细胞原发灶判断中的价值[J].肿瘤研究与临床,2017,(7):470-473.
[4]李勇,詹仁溥,曹文瑜,等.胸腹水细胞块技术的临床应用研究[J].中国基层医药,2017,(24):3727-3729.
论文作者:刘钰君1,吴共发1,邱丽浈2,曾宇婷1,黄绮亭1
论文发表刊物:《心理医生》2018年6期
论文发表时间:2018/3/24
标签：细胞论文; 胸腔论文; 细胞学论文; 积液论文; 免疫论文; 癌细胞论文; 病例论文; 《心理医生》2018年6期论文;