邵继海[1]2004年在《土壤中Cu、Cd胁迫对饭豆（Vigna umbellate L.）根瘤菌JMC1402P的生物毒性的研究》文中研究指明本文系统讨论了土壤中Cu~(2+)、Cd~(2+)添加量对饭豆根瘤菌JMC1402P的腐生存活及共生固氮能力的影响，另外还探讨、比较了几种从土壤中直接抽提的微生物总DNA的纯化方法。 YMA培养基平板培养结果表明：Cu~(2+)、Cd~(2+)对JMC1402P的半致死浓度分别为8.05μg／mL和7.82μg／mL，JMC1402P可以在Cu~(2+)或Cd~(2+)含量为12.5μg／mL的平板上生长。YMA液体培养结果表明：当液体培养基中Cu~(2+)浓度达到1μg／mL或Cd~(2+)浓度达0.1μg／mL时已对JMC1402P的生长产生轻微的抑制作用，当Cu~(2+)浓度达到10μg／mL或Cd~(2+)浓度达2μg／mL时，JMC1402P已不能生长。 腐生存活试验结果表明：土壤中Cu~(2+)添加量为20mg／Kg及40mg／Kg时对JMC1402P的腐生存活没有显着影响，Cu~(2+)添加量达80mg／Kg时，已对JMC1402P产生了生理毒性。在灭菌土壤中Cu~(2+)添加量小于200mg／Kg时，JMC1402P数量在37d后能保持在1.74×10~5cfu／g土以上，当土壤中Cu~(2+)添加量达到500mg／Kg时，在接种后第2d其数量已降至10~2cfu／g土以下。在未灭菌土壤中，当Cu~(2+)添加量在0～80mg／Kg范围内时，JMC1402P的数量在接种后23d已由10~8cfu／g土降至10~4～10~5cfu／g土，随着Cu~(2+)添加量的进一步增大，其菌数迅速下降到10~4cfu／g土以下。 土壤中Cd~(2+)添加量为3mg／Kg时对JMC1402P的腐生存活没有显着影响，Cd~(2+)添加量达20mg／Kg时，已对JMC1402P产生了生理毒性。在灭菌土壤中Cd~(2+)添加量为100mg／Kg及200mg／Kg处理组，在接种后的第9d其活菌数已降至10~5cfu／g土以下，在接种后的第37d其活菌数分别只有2.05×10~5cfu／g土及2.08×10~4cfu／g土。在未灭菌土壤中，当Cd~(2+)添加量在0～3mg／Kg范围内时，JMC1402P的数量在接种后23d也由10~8cfu／g土降至10~4～10~5cfu／g土，Cd~(2+)添加量为100mg／Kg和200mg／Kg时，JMC1402P的数量急剧降低，分别于第16d和第5d降至10~4cfu／g土以下。 饭豆盆栽试验结果表明：Cu~(2+)添加量在0～80mg／Kg范围内对JMC1402P共生固氮能力的影响并不大，当土壤中Cu~(2+)添加量达到120mg／Kg时，对JMC1402P产生较明显的生理毒性，当Cu~(2+)添加量达到300mg／Kg时，JMC1402P失去结瘤能力。土壤中添加3mg／Kg的Cd~(2+)对饭豆根瘤菌的结瘤和共生固氮能力没有影响，土壤中的Cd~(2+)添加量达到20mg／Kg时，每株根瘤数、每株根瘤重以及不管接种JMC1402P与否的饭豆植株地上部分干重与没有添加Cd~(2+)的对照组相比在1％水平上表现出了极显着差异，但此时每克根瘤的固氮酶活没有表现出显着差异，当土壤中Cd~(2+)添加量达到50mg／Kg时，对JMC1402P的共生固氮能力产生较明显的抑华中农业大学2004年硕士论文制作用。 对不同Ctlz十、Cd2+添加量的灭菌土壤中营腐生生活37d分离的JMC1402P进行质粒快检及砂培回接试验。质粒快检结果表明JMC 1402P在Cu2+添加量不大于斗00 mg/Kg或cd2+添加量不大于Zoom眯g时，营腐生生活37d没有出现大质粒丢失情况;砂培回接试验结果表明，从含重金属土壤中分离的JMCI 402P的结瘤及共生固氮能力与对照相比没有显着差异。 四种从土壤中直接抽提的微生物总DNA的纯化方法的比较结果显示:l%的琼脂糖凝胶电泳纯化方法及葡聚糖凝胶G一200离心层析纯化方法均不能完全纯化从土壤中抽提的微生物总DNA。若将直接抽提的总DNA先经葡聚糖凝胶G-Zoo离心层析纯化，再用1%的琼脂糖凝胶电泳纯化，则能取得较好的纯化效果。用含2%PVP的1%琼脂糖凝胶电泳纯化，再用DNA凝胶回收试剂盒回收后没有得到纯化后的上壤微生物总DNA。
Yanlong, Wang, Juan, Diwu, Shuao, Wang[2]2015年在《Umbellate Distortions of the Uranyl Coordination Environment Result in a Stable and Porous Polycatenated Framework That Can Effectively Remove Cesium from Aqueous Solutions》文中进行了进一步梳理土壤中Cu，Cd胁迫对饭豆（Vigna umbellate L.）根瘤菌JMC1402P的生物毒性的研究
Yanlong, Wang, Juan, Diwu, Shuao, Wang[3]2016年在《Umbellate Distortions of the Uranyl Coordination Environment Result in a Stable and Porous Polycatenated Framework That Can Effectively Remove Cesium from Aqueous Solutions》文中认为土壤中Cu，Cd胁迫对饭豆（Vigna umbellate L.）根瘤菌JMC1402P的生物毒性的研究
李同臣[4]2010年在《猪苓菌核化学成分及液体发酵法生产猪苓甾体成分的初步研究》文中研究指明中药猪苓来自是真菌猪苓的干燥菌核,是一种珍贵药材,但由于其野生资源日益枯竭,人工栽培又受到诸多自然条件的限制,导致市场供应短缺;利用发酵猪苓菌丝替代或部分替代猪苓菌核或和以发酵菌丝体为原料获取活性物质,成为当前猪苓研究的重点。为进一步开发发酵猪苓菌丝体的药用价值,探求猪苓菌核和发酵猪苓菌丝体药理活性的物质基础,本文在液体悬浮法生产猪苓甾体成分、猪苓发酵生产小试、菌核和发酵菌丝体中小极性化学成分分析,猪苓菌核的化学成分分离纯化等方面展开研究并获得以下主要结论:1.以甾体含量为主要指标,并以菌丝体生长量及多糖含量为辅助指标,对用液体悬浮法生产猪苓甾体所需的培养基条件进行了初步研究,研究结果表明适合于猪苓甾体类化合物积累的最佳液体培养基为:葡萄糖28.0g/L,酵母膏4.0g/L,磷酸二氢钾1.00g/L,硫酸镁1.00g/L,维生素VB10.1g/L,1%羟甲基纤维素钠10mL/L。在此培养条件下每瓶所得菌丝体干重为2.050g,干菌丝体及发酵液中甾体含量分别达到了3.864mg/g, 3.768mg/100mL。此外在此液体培养基中菌丝体及发酵液的猪苓多糖含量分别为11.542 mg/g, 5.885mg/100mL。2. 70L发酵罐发酵生产猪苓菌丝体时,接种量越大,猪苓菌丝达到生长稳定期的时间越短,在接种量分为3%、4%、5%时,达到生长稳定期的时间分别为8、6、5d,而稳定期转向衰亡期的时间不受接种量的影响,发酵培养中,菌丝体达到稳定时期后大约5天就会进入衰亡期,猪苓菌丝细胞开始自溶,菌丝干重得率下降;另外发酵培养猪苓菌丝对数生长期甾体含量较低,在菌丝体生长到稳定期后,菌丝体中甾体含量开始快速增加,在稳定中后期猪苓菌丝中的甾体含量达到最高。3.利用GC/MSD方法对两者甲醇提取物的石油醚萃取相进行化学成分分析,从猪苓菌核甲醇提取物的石油醚萃取相的弱极性馏分和极性馏分中共鉴定出66个成分,其中弱极性馏分以烷烃为主,除正构烷烃外,还有一系列的含量较低的甾烷、烷基环己烷和五环叁萜烷,极性馏分以脂肪酸及其酯和邻苯二甲酸二甲酯为主;发酵菌丝体两个馏分中共鉴定出50个成分,以脂肪酸、脂肪酸酯及其氧化物为主其他成分尤其是甾烷类和萜烷类含量极低。4.应用固液萃取、硅胶柱层析、薄层制备(PLC)、重结晶等植物化学分离纯化手段,从猪苓菌核甲醇提取物中分离纯化出单体化合物经理化性质、IR、1H-NMR、13C-NMR分析鉴定分别为L1(麦角甾醇和麦角甾-7,22-二烯-3醇), L2(二十二碳酸), L3(12-叁十一烷醇), L4(过氧化麦角甾醇), L5(N-(2′-羟基-二十四烷酰)-1,3,4-叁羟基-2-十八鞘氨), L6(猪苓酮A和B),其中12-叁十一烷醇为首次从该真菌中分离得到。本研究初步筛选出液体悬浮培养生产猪苓的最佳培养基组成,并用该培养基进行了发酵生产小试;表明在不同批次的发酵过程中,稳定后期甾体含量最高;又以的发酵猪苓菌丝体为材料比较了菌核和菌丝体的中小极性化学成分种类及含量差异,并从猪苓菌核中分的单体化合物8个,其中12-叁十一烷醇首次从该真菌总分得,以上研究结果,既为发酵发生产猪苓甾体提供了初步的工业参数,又进一步了丰富猪苓菌核的化学成分的组成,而且通过对两者小极性化学成分种类和含量分析,又可以为两者的开发利用提供新思路。
Xianhao, Cheng~(1, 2), Shunxing, Guo~1, 1, Institute, of, Medicinal, Plant, Development, Chinese, Academy, of, Medical, Sciences, &, Peking, Union, Medical, College, Beijing, 100094[5]2008年在《Observation to the growth and development process of artificial cultured sclerotia in Grifola umbellate》文中提出土壤中Cu，Cd胁迫对饭豆（Vigna umbellate L.）根瘤菌JMC1402P的生物毒性的研究
邱鹏程[6]2007年在《蜜环菌与第二营养对猪苓菌丝生长发育的影响》文中认为蜜环菌是猪苓的一种共生菌,在猪苓生长发育的后期为猪苓提供营养,是猪苓的主要营养来源。猪苓自身也具有从周围环境中吸收营养物质的能力。有学者研究发现,猪苓可以吸收无机营养,吸收量随栽培时间的延长而增多;猪苓也可以吸收有机营养,并且也是随着栽培时间的延长吸收量明显增加。但总的吸收量很少,可作为猪苓的补充营养或将其称为第二营养。猪苓以菌核入药,菌丝是菌核形成的物质基础。本文以猪苓菌丝为研究对象,采用液体培养和固体培养2种方法,通过对猪苓菌丝的生长速率、干重、粗多糖含量等生理变化情况进行检测,探讨了第二营养对猪苓菌丝生长发育的影响以及第二营养对猪苓菌丝形成拟核的作用。采用共同培养和发酵液培养的方法,通过这两种培养方式下的猪苓菌丝的生长情况,探讨了蜜环菌对猪苓菌丝生长发育的影响。本文取得主要结论如下:1.P、K、Cu、Zn四种元素对猪苓菌丝的生长速率、干重、粗多糖含量起到促进作用。其中微量元素Cu、Zn这两种处理对猪苓菌丝积累粗多糖含量的作用明显高于P、K处理组以及对照处理组。这解释了猪苓生活土壤中这些元素较同区域非猪苓生活土壤中丰富的原因。2.试验发现氮对猪苓菌丝形成拟核有强烈的促进作用,并且这种作用在氮的高浓度处理中比低浓度处理中更明显。此前有学者认为短时低温可能对猪苓菌丝形成菌核有一定作用。有学者从野外猪苓窝中发现并成功分离出猪苓伴生菌,并认为这种伴生菌是猪苓菌丝形成菌核的关键性因子;离开伴生菌,单独培养的猪苓菌丝不能形成菌核。关于第二营养对猪苓菌丝形成拟核的影响的研究尚未见报道。本文在没有伴生菌与猪苓共培养的情况下,应用第二营养促进猪苓菌丝形成拟核,为人工诱导猪苓菌丝形成菌核的研究开辟了一条新思路3.通过不同来源的蜜环菌与猪苓菌丝共培养,以及不同来源的蜜环菌发酵液对猪苓菌丝生长发育影响的研究,探讨了蜜环菌同猪苓的较优搭配。蜜环菌与猪苓菌丝的共培试验中,两者间有比较明显的拮抗现象。不同来源的蜜环菌发酵液培养的猪苓菌丝的生长情况均好于对照组的情况,对菌丝生长起到促进作用。但是不同来源的蜜环菌发酵液,对菌丝生长起到的促进作用程度不一。
冯华芳[7]2010年在《固态法发酵猪苓多糖及其生产工艺的研究》文中研究表明猪苓作为我国传统的真菌类药材,具有抗肿瘤、增强免疫力等多种疗效,在医药行业应用广泛。由于猪苓菌核生长缓慢,菌核生长周期一般需要3年,导致了猪苓菌核的生产供应不能满足市场需要。本文拟通过固态发酵获得猪苓菌丝的快速增值方法来解决这个问题。首先对猪苓液态发酵工艺参数和培养条件的优化进行了研究,在此基础上,对猪苓固态发酵工艺进行了优化,获得的主要结论如下：(1)通过猪苓液态培养基的优化,可以有效提高猪苓液态菌丝生物量。适宜猪苓液态菌丝生产的培养基组成,培养条件为：淀粉3%、豆粕3.5%、KH2PO40.1％.MgSO4.7H2O0.1％以及VB1 0.01%,pH 6.0、温度25℃、装液量40%(v／v)、培养时间7d,生物量可以达到1.97g／100ml培养基。(2)通过猪苓固态培养基的选择与优化,可以有效提高猪苓固态菌丝多糖的产量。适宜猪苓固态菌丝体多糖生产的培养基组成,培养条件为：玉米粉60%、麦麸30%、淀粉量10%、蜜环菌固态菌丝浸提物5%、KH2PO40.1％.MgSO4.7H2O 0.1％. Fecl30.1％,接种量40%、加水量100%、温度25℃、发酵周期16d,猪苓多糖产量可以达到1.413mg／g培养基。(3)为了提高猪苓固态发酵多糖的产量,本文研究了蜜环菌对猪苓固态发酵的影响,结果如下：适宜蜜环菌固态菌丝生产的培养基组成,培养条件为：玉米粉80%、麦麸20%、KH2PO40.1％.MgSO4.7H2O 0.1％,培养温度27℃、加水量120%、接种量20%、发酵周期16 d,生物量可以达到15.76g／100g培养基。猪苓固态培养基中蜜环菌固态菌丝浸提物添加量为5%时,可以明显提高猪苓固态菌丝多糖的产量,提高率为13.4%。(4)对猪苓固态发酵菌丝体多糖的提取进行了优化设计,经过热水浸提,α-淀粉酶处理,Sevag法除蛋白,分级醇沉得猪苓多糖,然后用SephadexG-100柱层析和紫外光谱分析鉴定纯度；通过红外光谱进行结构分析；通过凝胶渗透色谱分析其分子量。结果表明：猪苓固态发酵菌丝体多糖提取最佳工艺：热水浸提5h,温度90℃,料液比1：50。30%醇沉多糖GUSFMP I30为均一多糖,重均分子量(Mw)：23710Da。本研究以优化猪苓的固态发酵工艺为内容,以实现发酵过程可控性为目标,通过研究固态发酵的工艺条件,改进猪苓固态发酵生产的技术,为猪苓及其它药用菌发酵技术的研究提供理论依据。
崔凯, 张金波, 尤玉红[8]2005年在《MG-1型大孔吸附树脂纯化猪苓多糖的研究》文中认为目的:研究 MG-1型大孔吸附树脂对猪苓多糖的纯化方法。方法:应用 MG-1型大孔吸附树脂,以猪苓多糖含量为考察指标.研究大孔吸附树脂对猪苓多糖纯化的效果。结果:MG-1型大孔吸附树脂对猪苓多糖有显着纯化作用,纯化后猪苓多糖的含量可达到,纯化效果好。结论:生产中可选用 MG-1型大孔吸附树脂对猪苓多糖进行纯化。
杨宇红, 李秀云[9]2006年在《伞形泪道支架治疗慢性泪囊炎126例》文中研究说明目的:探讨伞形泪道支架治疗慢性泪囊炎的疗效及优点。方法:对2005-04/2006-03门诊慢性泪囊炎患者126例(136眼)施行了伞形泪道支架植入术。结果:经过3mo～1a的随访,136眼中,118眼治愈,16眼好转,2眼无效(其中1眼支架脱落,经再次植入支架后治愈,1眼因患者未坚持泪道冲洗及滴抗生素眼液而无效,后经冲洗用药后好转)。结论:伞形泪道支架治疗慢性泪囊炎,操作简单,手术安全,疗效可靠,组织损伤小,皮肤不留瘢痕,适应症广,适于基层推广应用。
秦桂芳, 张国伟, 贝佳涛, 丁良, 张继洪[10]2014年在《利水渗湿中药猪苓调节膀胱癌大鼠AQP1和AQP3作用及意义》文中指出目的:研究猪苓利水渗湿功效对膀胱癌大鼠模型水通道蛋白1(AQP1)、水通道蛋白3(AQP3)调节作用。方法:制作膀胱癌大鼠模型,分为生理盐水组、模型组、猪苓50mg/kg组、猪苓250mg/kg组、猪苓500mg/kg组,按组别分别药物干预后,以免疫组化技术和RT-PCR技术检测膀胱组织AQP1和AQP3表达情况。结果:膀胱癌大鼠模型诱导成功,猪苓干预膀胱癌大鼠模型后,对BBN诱导的膀胱癌模型有显着的抑制作用。与模型组比较,猪苓能明显降低膀胱组织AQP1和AQP3蛋白表达,猪苓250mg/kg组和猪苓500mg/kg组均可显着降低AQP1和AQP3 mRNA相对表达含量(P<0.05,P<0.01)。结论:猪苓利水渗湿功效可通过抑制AQP1和AQP3表达抑制膀胱癌发生发展。
参考文献：
[1]. 土壤中Cu、Cd胁迫对饭豆（Vigna umbellate L.）根瘤菌JMC1402P的生物毒性的研究[D]. 邵继海. 华中农业大学. 2004
[2]. Umbellate Distortions of the Uranyl Coordination Environment Result in a Stable and Porous Polycatenated Framework That Can Effectively Remove Cesium from Aqueous Solutions[C]. Yanlong, Wang, Juan, Diwu, Shuao, Wang. 中国化学会第九届全国无机化学学术会议论文集——B配位化学. 2015
[3]. Umbellate Distortions of the Uranyl Coordination Environment Result in a Stable and Porous Polycatenated Framework That Can Effectively Remove Cesium from Aqueous Solutions[C]. Yanlong, Wang, Juan, Diwu, Shuao, Wang. 中国化学会第七届全国结构化学学术会议论文摘要. 2016
[4]. 猪苓菌核化学成分及液体发酵法生产猪苓甾体成分的初步研究[D]. 李同臣. 西北农林科技大学. 2010
[5]. Observation to the growth and development process of artificial cultured sclerotia in Grifola umbellate[C]. Xianhao, Cheng~(1, 2), Shunxing, Guo~1, 1, Institute, of, Medicinal, Plant, Development, Chinese, Academy, of, Medical, Sciences, &, Peking, Union, Medical, College, Beijing, 100094. Proceedings of China-Japan Pan Asia Pacific Mycology Forum Symposium. 2008
[6]. 蜜环菌与第二营养对猪苓菌丝生长发育的影响[D]. 邱鹏程. 西北农林科技大学. 2007
[7]. 固态法发酵猪苓多糖及其生产工艺的研究[D]. 冯华芳. 华中农业大学. 2010
[8]. MG-1型大孔吸附树脂纯化猪苓多糖的研究[J]. 崔凯, 张金波, 尤玉红. 黑龙江医药. 2005
[9]. 伞形泪道支架治疗慢性泪囊炎126例[J]. 杨宇红, 李秀云. 国际眼科杂志. 2006
[10]. 利水渗湿中药猪苓调节膀胱癌大鼠AQP1和AQP3作用及意义[J]. 秦桂芳, 张国伟, 贝佳涛, 丁良, 张继洪. 中华中医药杂志. 2014
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