（1.河北省沧州市中心医院消化内一科 河北 沧州 061001）
（2.沧州市中心医院核医学科 河北 沧州 061001）
【摘 要】目的：检测肝硬化患者外周血及腹水降钙素原（PCT）、sCD14和CD64的水平，探讨外周血及腹水PCT、sCD14和CD64检测对自发性细菌性腹膜炎（SBP）的诊断价值。方法：将肝硬化患者分为肝硬化SBP组(30例)(组1)、肝硬化腹水非SBP组（30例）（组2）及健康对照组（30例）（组3）3组。应用电化学发光免疫法测定血清、腹水降钙素原；应用流式细胞术测定外周血及腹水CD64、sCD14。分别采集肝硬化SBP组患者在入院后24小时内、抗菌药物使用前及抗生素有效治疗7d的空腹上肢静脉血及无菌腹水，测定患者体内PCT、sCD14和CD64水平，同时行血常规、肝肾功能、凝血功能检查。肝硬化腹水非SBP组及健康对照组一次性采血及抽腹水测定以上指标。结果：SBP组治疗前外周血PCT、sCD14和CD64水平较腹水非SBP组和对照组明显升高，差异有统计学意义（P＜0.01），而腹水非SBP组和对照组间比较差异无统计学意义（P＞0.05）；SBP组治疗前腹水PCT、sCD14和CD64水平较腹水非SBP组明显升高，差异有统计学意义（P＜0.01）；治疗后肝硬化SBP组血及腹水PCT、sCD14和CD64水平明显下降，与治疗前比较差异有统计学意义(P<0.05)；另SBP组治疗前后腹水中PCT、sCD14和CD64水平均明显高于外周血中的水平，差异均有统计学意义(P<0.05)。结论：血及腹水中PCT、sCD14和CD64水平检测对于肝硬化SBP的早期诊断、疗效判定有一定的临床意义；且腹水检测敏感度优于外周血检测。
【关键词】肝硬化；降钙素原；sCD14；CD64；自发性细菌性腹膜炎
【中图分类号】R657.3+1 【文献标识码】B 【文章编号】1003-5028（2015）8-0872-02
Clinical significance of PCT、sCD14 and CD64 in patients with cirrhosis and spontaneous bacterial peritonitis
【Abstract】Objective：To detect the concentration of PCT,sCD14 and CD64 in blood and ascites and investigate the diagnosis value of PCT,sCD14 and CD64 in blood and ascites. Methods：There were three groups.The sixty patients with liver cirrhosis were divided into two groups.Liver cirrhosis with spontaneous bacterial peritonitis(SBP)(30 patients) were in group 1 and liver cirrhosis without SBP(30 patients) were in group 2.Thirty healthy subjects were in control group(group 3).The PCT in blood and ascites was detemined by electrochemiluminescence immunoassay(ECLI) and The sCD14 and CD64 in blood and ascites were determined by flow cytometry .The fasting venous blood in the upper limb and ascites were obtained from patients in group 1 at the time of within 24 hours after admission, before use of antibiotics and seven days after antibiotic effective treatment.The PCT,sCD14 and CD64 were detected and at the same time the blood count, liver, kidney and blood coagulate functions were tested.All the same tests were applied in group 2 and group 3.Results：The concentration of PCT,sCD14 and CD64 in blood was higher than that in group 2 and group 3 before treatment which had statistical differences(P<0.01).There had no statistical differences between group2 and group 3(P>0.05). The concentration of PCT,sCD14 and CD64 in ascites was higher than that in group 2.The concentration of PCT,sCD14 and CD64 in blood and ascites had decreased dramaticly post-treatment in group 1.There had statistical differences compared with pretreatment(P<0.05). The concentration of PCT,sCD14 and CD64 in ascites was higher than that in blood and there had statistical differences(P<0.05).Conclusions：The detection of the concentration of PCT,sCD14 and CD64 in blood and ascites had certain clinical significance in diagnosis and judgement of curative effect.The detection sensitivity of ascites was superior to that of blood.
【Keywords】Liver cirrhosis;procalcitonin;sCD14;CD64;spontaneous bacterial peritonitis
肝硬化腹水患者并发自发性细菌性腹膜炎(spontaneous bacterial peritonitis，SBP)，是肝硬化失代偿期的严重并发症之一。其一旦发生，治疗困难且临床死亡率高，仍是内科治疗的难题[1]。因此对肝硬化并发自发性细菌性腹膜炎的早期诊断及治疗效果的判定，有重要的临床意义。临床上有很多诊断病人体内炎性病变的方法，但是，却很少有应用于诊断肝硬化SBP的高度特异性的检查。临床目前常用的诊断方法为腹水培养，但其具有细菌培养阳性率较低及有一定时限性等不足之处，从而影响临床诊断、治疗效果。本研究通过观察外周血及腹水PCT、sCD14和CD64水平的变化，来观察其在肝硬化并发自发性细菌性腹膜炎诊断中的临床意义，尽早给临床医师提供诊断、治疗的依据。
1 资料与方法
1.1 一般资料
本院2013年2月至2014年9月确诊的肝硬化住院患者，诊断均符合《病毒性肝炎防治方案》[2]的诊断标准。根据临床表现、实验室检查结果以及是否存在腹水感染，将患者分为肝硬化SBP组30例（其中男19例、女11例，年龄34-72岁）、肝硬化腹水非SBP组30例（其中男17例、女13例，年龄32-68岁）、另选择同期检测的健康体检者30例（其中男18例、女12例，年龄35-70岁）为对照组。三组患者年龄、性别差异均无统计学意义（p＞0.05）。肝硬化SBP组腹水细菌培养结果为大肠埃希菌8例；克雷伯菌1例；表皮葡萄球菌3例；粪肠球菌1例。见表1。
1.2 诊断及排除标准
（1）诊断标准：SBP诊断标准[3-4]具体为：①局部症状和（或）腹膜炎表现：腹痛、腹部压痛、呕吐、腹泻、肠梗阻；②高热或低热、寒战、白细胞计数异常、和（或）呼吸急促；③肝性脑病无明确诱因；④无明确原因的急进型肾损害；⑤未预防应用抗生素的消化道出血；⑥肝功能恶化；⑦休克；⑧腹水中性粒细胞计数≥250 x106/L；⑨腹水细菌培养阳性；⑩血清腹水白蛋白梯度（SAAG）≥11g/L。符合⑧及⑩可确诊，符合⑩及①~⑦或⑨中至少1项为临床疑诊。（2）排除标准：排除近期有明确继发性腹腔感染及其他感染患者、排除14d内服用过肠道非吸收性抗生素的肝硬化患者。
1.3 实验室仪器及试剂
（1）应用美国BD公司生产的FACSCalibur流式细胞计数仪进行sCD14、CD64检测。
（2）采用电化学发光免疫法（双抗夹心ELISA法）检测血清降钙素原。设备为罗氏e601电化学发光免疫机，试剂盒由罗氏提供。
1.4 标本的采集及检测
SBP组治疗前及抗生素治疗后7d、非SBP组和对照组空腹抽取外周静脉血4mL，分别检测血清PCT及外周血sCD14、CD64水平，同时行血常规、肝肾功能、凝血功能等检查；SBP组治疗前及抗生素治疗后7d和非SBP组在无菌条件下进行腹腔穿刺抽液，取无菌腹水4mL；标本放-70℃冰箱保存，分别测定腹水PCT、sCD14和CD64水平。检测结果判定：血清PCT检测值>0.50ng/ml、sCD14>0.55mg/L、CD64>4314mol/cell为阳性。
1.5 统计学方法 本研究采用SPSS15.0统计学软件进行分析处理，所有数据均以均数±标准差（ ±S）表示，多组资料比较采用单因素方差分析，组间和组内比较采用t检验，P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 三组患者治疗前血PCT、sCD14和CD64水平比较
SBP组治疗前血PCT、sCD14和CD64、WBC、ALT和AST水平较腹水非SBP组和对照组明显升高，差异有统计学意义（P＜0.01）。而腹水非SBP组和对照组间比较差异无统计学意义（P＞0.05）。见表2。
2.3 SBP组治疗前后外周血、腹水PCT、sCD14和CD64水平比较
经抗感染、保肝等综合治疗后，肝硬化SBP组外周血及腹水PCT、sCD14和CD64水平明显下降，与治疗前比较差异有统计学意义(P<0.05)；SBP组治疗前后腹水中PCT、sCD14和CD64水平均明显高于血中的水平，差异均有统计学意义(P<0.05)。
3 讨论
晚期肝硬化患者免疫力显著降低，容易形成自发性细菌性腹膜炎，其中肝硬化合并脾脏功能异常者容易导致白细胞计数减少，合并细菌性感染性疾病时，外周血白细胞计数同样减少[5]。但白细胞计数对于肝硬化合并SBP诊断灵敏度和特异度均较低。此外，临床用于细菌感染性疾病的评估指标有外周血中性粒细胞比例、血清CRP和红细胞沉降率等，但其在急性创伤、外科术后、肿瘤转移浸润等状况均显著增加[6]。腹水细菌培养是诊断肝硬化自发性细菌性腹膜炎的金标准，但所需时间较长，灵敏度较低。故进一步探讨敏感、准确的诊断指标是十分必要的。本研究旨在寻找简便、特异的指标提高SBP的早期诊断率。
PCT在正常生理状态下只由甲状腺C细胞合成，是一种无激素活性的降钙素前体，在血浆中含量很少。机体受感染时甲状腺外组织可大量产生PCT [7]。有学者研究表明，PCT在细菌感染患者体内水平急剧升高。从感染后4h开始，6-8h到达峰值，此后24h持续保持较高水平[8]。因此PCT对肝硬化SBP早期诊断具有较高的特异度和敏感度。
本研究中肝硬化伴有细菌性腹膜炎病人血清和腹水PCT均明显高于无细菌性腹膜炎病人及健康人群，说明PCT是鉴别肝硬化腹水是否伴有细菌性腹膜炎的一个敏感指标。而且经临床常规治疗后病情好转，PCT也较前明显下降，证明PCT在SBP治疗过程中可以动态观察、判断治疗效果，指导临床用药。
sCD14介导脂多糖（LPS）诱导内皮细胞，发生激活反应产生：炎症细胞因子如白细胞介素(IL-1、IL-6)、趋化因子及生长因子，这些因子参与炎症反应，从而导致组织、器官损伤[9-10]。还能激活中性粒细胞和单核细胞等炎性细胞（通过不同途径），从而介导一系列的级联生物学反应[11-12]。 Aalto等发现C-反应蛋白(CRP)和sCD14有比较显著的相关性，进而认为：sCD14也是急性时相反应蛋白的一种[13]。
CD64属于免疫球蛋白超家族成员，是免疫球蛋白IgG的受体。主要存在单核细胞及巨噬细胞表面，在中性粒细胞表面呈低水平表达。当受到细菌细胞壁的脂多糖、细胞集落刺激因子和干扰素-?等的刺激可导致CD64可在中性粒细胞表面大量表达[14]。Allen等[15]指出，非感染性炎症和病毒均不会使CD64在中性粒细胞表达增加，因此说明CD64的高表达在细菌感染性炎症中具有很高特异性。因此当机体受到细菌感染时，体内中性粒细胞CD64分子表达在4h内明显增高[16]，可以作为早期诊断的依据。
本研究提示sCD14和CD64在健康人群和肝硬化腹水不伴细菌性腹膜炎病人外周血和腹水中均处于较低水平，而在肝硬化腹水伴细菌性腹膜炎病人中均明显增高，经治疗症状好转后，也降至接近正常水平。说明sCD14和CD64也是一种判断是否伴有细菌性腹膜炎良好指标。
本研究还发现肝硬化腹水伴细菌性腹膜炎病人治疗前后腹水中PCT、sCD14和CD64水平均明显高于血中的水平，说明肝硬化并发自发性腹膜炎早期检测腹水中的PCT、sCD14和CD64较检测外周血的更为敏感。而且，细菌性腹膜炎经治疗后全身症状明显改善，血中的炎症指标已基本正常，但腹水中以上指标尚未完全恢复，这对于指导临床治疗更具有实际意义。
综上所述，血和腹水中PCT、sCD14和CD64检测可以提示肝硬化是否合并腹水细菌感染。血及腹水中PCT、sCD14和CD64水平检测对于肝硬化SBP的早期诊断、疗效判定有一定的临床意义。而且检测腹水中PCT、sCD14和CD64水平敏感度优于检测血中PCT、sCD14和CD64水平。
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作者简介：
李春英， 女，技术职称：副主任医师，学位：硕士研究生。作者单位：河北省沧州市中心医院消化内一科。
论文作者:李春英1,邹金海2,梁育飞1
论文发表刊物:《河南中医》2015年8月供稿
论文发表时间:2015/11/24
标签：腹水论文; 肝硬化论文; 水平论文; 统计学论文; 自发性论文; 细菌性论文; 腹膜炎论文; 《河南中医》2015年8月供稿论文;