荧光原位杂交与免疫组化联合检测乳腺癌组织HER-2价值评价论文_彭强

益阳市中心医院病理科,湖南 益阳 413000

摘要 目的 分析荧光原位杂交(FISH)与免疫组化(IHC)联合使用对乳腺癌患者HER-2检测的效果。方法 选取我院收治的乳腺癌患者96例作为实验组,另选取96名健康志愿者作为对照组,对比两种检测方法检测效果。结果 FISH与IHC检出率差异较大,其中FISH能够阳性检出率远高于IHC,而IHC阴性检出率远高于FISH,两种方法合用检出正确率为100%。结论 FISH、IHC联合使用能够有效避免假阴性和假阳性的发生,具有更高的检出准确率。

关键词 乳腺癌;荧光原位杂交;免疫组化HER-2

乳腺癌是目前影响女性生命健康的最常见的肿瘤,据世界卫生组织统计,乳腺癌的发病已经不仅局限于女性,在男性身上也发现了乳腺癌,对乳腺癌的研究刻不容缓,目前尚没有一种机制能够完全证明乳腺癌的发生、发展,但HER-2的异常是乳腺癌患者的共同特征,因此,把HER-2作为检出乳腺癌的重要指标[1]。在本次研究中重点分析FISH、IHC联合使用对乳腺癌患者HER-2检测的效果,现将试验流程以及结果分析如下:

1基本资料和分析方法

1.1基本资料

选取我院收治的乳腺癌患者96例作为实验组,另选取96名健康志愿者作为对照组,其入选标准是:年龄在23~65岁;均为首次接受治疗,具有较高的治疗依从性;除乳腺癌以外没有其他肿瘤疾病或心血管、心肝肾功能异常。两组患者乳腺癌症状、发病位置等对研究没有影响。

1.2分析方法

两组研究对象在入院以后按照分组进行试验,两组研究对象分别接受FISH、IHC两种方法检查,均采用乳腺石蜡切片标本检查,保证检测方法、时间等一致性,确保没有无关变量。制作石蜡标本:取患者标本,浸泡福尔马林24h,然后采用酒精由低浓度到高浓度进行梯度脱水,然后浸蜡,包埋后切成石蜡片[2]。FISH检测方法:取切片保温24h,采用高浓度大低浓度脱水,然后使用酸性亚硫酸钠处理、SSC洗片2次,蛋白酶孵育,再次洗片、脱水,然后风干后加入探针封片,保温24h杂交,再次洗片、乙醇(70%)浸泡,风干后滴加染色剂观察;IHC检测方法:取切片采用高浓度大低浓度脱水,使用PBS冲洗2次、高温修复、再次冲洗2次,加入过氧化物酶阻滞液中孵育,再次冲洗2次,滴加HER-2一抗孵育1h后再次冲洗2次,加入链霉菌抗生素-过氧化酶溶液孵育10min后再次冲洗2次,然后经过染色、二次复染、冲洗后封片观察[3-4]。

1.3评价指标以及评价标准

判断FISH、IHC两种方法对于HER-2的阳性检出率;对比二者合用后实验组患者和对照组患者检测结果与实际情况。

1.4统计学方法

将研究所得的所有数据进行统计分析,使用统计学软件SPSS 20.0进行统计分析,计量资料以(x±s)表示,采用t检验,计数资料以(%)表示,采用χ2检验。当P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1FISH检测结果分析

由表1可知,实验组与对照组阳性检出率与阴性检出率数值对比差异较大,具有比较的意义。

2.2IHC检测结果分析

由表2可知,实验组与对照组检出率对比差异显著,具有比较的意义。

2.3两种方法对比以及联合检测分析

由表3可知,FISH对于阳性检出率较高,而IHC对于阴性检出率较高,二者联合使用能够准确检出,与单一方法相比差异显著,具有比较的意义。

3讨论

乳腺癌是一种女性常见肿瘤,其发病由中老年患者逐渐向年轻化蔓延,对女性患者的生命健康以及工作和生活产生较大威胁。

靶向治疗是近年来新兴的一种治疗方法,即通过检测肿瘤患者中异常的分子结构,然后根据这种异常的分子设计针对性的靶向治疗药物,能够保证治疗效果,同时又不会对患者产生较大的副作用,HER-2基因与肿瘤的发病有关,成为靶向治疗作用点,因此准确检测HER-2基因是治疗的关键[5]。目前对于HER-2基因的检测临床上常用的有荧光原位杂交免疫组化两种方法,两种方法各有优缺点,现对其优缺点以及使用注意、影响因素分析如下:(1)优缺点:FISH检出阳性准确率较高,能够重复检测,信度高,但检测需要各种荧光仪器,检测费用较高,对于技术的要求较高,同时切片保存时间较短;IHC相对来说技术较为成熟,不需要较大的仪器设备,检测成本较低,对患者造成的经济负担较小,切片比较容易保存,但是IHC检测过程中标本容易受到破坏、抗体质量以及观察者的主管因素等会影响检测的准确率;(2)FISH检测影响因素:FISH目前已经发展较为完善,具有较高的准确率、灵敏度等,但使用过程中由于操作不当仍旧会影响检测结果的准确性,如标本制作时固定不足或过当固定会造成切片信号缺失;组织切片时冰冻组织影响观察结果,不能选择;脱蜡是否彻底会影响探针的穿透度,影响检测结果;蛋白酶消化不当造成细胞图像模糊;洗脱时间过长造成信号缺失,过短洗脱不彻底难以观察等;(3)IHC检测注意事项,IHC使用过程中洗涤时间不够容易造成信号模糊,标本处理不当容易造成无信号,消化不充分或者脱蜡不足造成背景过高,难以观察等[6-8]。

在本次研究中,选用96例乳腺癌患者作为实验组,另选96例健康志愿者作为对照组,分别对两组患者采用两种方法进行检测,经过试验分析发现,FISH对于乳腺癌阳性患者具有较高的检出率,能够有效避免假阴性,即能够有效预防疾病检测不出,错过最佳治疗期;而IHC具有较高的阴性检出率,二者合用能够准确的检测患者是否患有乳腺癌,为治疗提供可靠依据,在乳腺癌的诊断中具有较高的使用效果。

参考文献

[1]邵明昱, 孙振柱. 分析对比荧光原位杂交(FISH)与免疫组化(IHC)检测乳腺癌HER-2基因扩增和蛋白表达[J]. 新疆医学, 2015(6):701-703.

[2]张欢, 罗洞波, 赵兵. 免疫组织化学法与荧光原位杂交技术检测乳腺癌HER-2状态一致性的对比研究[J]. 新疆医科大学学报, 2018, 41(2).

[3]杨伟洪, 钟守军, 段立锋,等. 荧光原位杂交检测乳腺浸润性导管癌HER-2基因扩增及其与SATB1、HR蛋白表达关系[J]. 中国妇幼保健, 2015, 30(22):3884-3887.

[4]曾玉梅, 曹晓珊, 杜娟,等. 双色银染原位杂交检测HER2基因在乳腺癌中的临床应用研究[J]. 新疆医学, 2017(05):43-46.

[5]王力夫, 龚智泉, 宋晓霞,等. 全自动双色银染原位杂交技术在乳腺癌HER-2基因状态评估中的应用[J]. 临床与实验病理学杂志, 2015(9):1065-1067.

[6]吴东霞, 郭苑莉, 沈溪明,等. HER-2蛋白表达和基因扩增状态在乳腺癌中的一致性研究[J]. 中国卫生检验杂志, 2015(9):1377-1379.

[7]李晓娜. 荧光原位杂交技术对宫颈癌和乳腺癌早期筛查的诊断价值及临床表达意义[J]. 中国卫生工程学, 2017(03):94-95+99.

[8]周爱清, 陈志军, 孙正魁, et al. 乳腺癌患者血清HER-2/neu浓度与组织HER-2表达水平的相关性[J]. 实用癌症杂志, 2015(4):479-481.

论文作者:彭强

论文发表刊物:《总装备部医学学报》2019年第06期

论文发表时间:2019/9/20

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