益阳市中心医院病理科,湖南 益阳 413000
摘要 目的 分析荧光原位杂交(FISH)与免疫组化(IHC)联合使用对乳腺癌患者HER-2检测的效果。方法 选取我院收治的乳腺癌患者96例作为实验组,另选取96名健康志愿者作为对照组,对比两种检测方法检测效果。结果 FISH与IHC检出率差异较大,其中FISH能够阳性检出率远高于IHC,而IHC阴性检出率远高于FISH,两种方法合用检出正确率为100%。结论 FISH、IHC联合使用能够有效避免假阴性和假阳性的发生,具有更高的检出准确率。
关键词 乳腺癌;荧光原位杂交;免疫组化HER-2
乳腺癌是目前影响女性生命健康的最常见的肿瘤,据世界卫生组织统计,乳腺癌的发病已经不仅局限于女性,在男性身上也发现了乳腺癌,对乳腺癌的研究刻不容缓,目前尚没有一种机制能够完全证明乳腺癌的发生、发展,但HER-2的异常是乳腺癌患者的共同特征,因此,把HER-2作为检出乳腺癌的重要指标[1]。在本次研究中重点分析FISH、IHC联合使用对乳腺癌患者HER-2检测的效果,现将试验流程以及结果分析如下:
1基本资料和分析方法
1.1基本资料
选取我院收治的乳腺癌患者96例作为实验组,另选取96名健康志愿者作为对照组,其入选标准是:年龄在23~65岁;均为首次接受治疗,具有较高的治疗依从性;除乳腺癌以外没有其他肿瘤疾病或心血管、心肝肾功能异常。两组患者乳腺癌症状、发病位置等对研究没有影响。
1.2分析方法
两组研究对象在入院以后按照分组进行试验,两组研究对象分别接受FISH、IHC两种方法检查,均采用乳腺石蜡切片标本检查,保证检测方法、时间等一致性,确保没有无关变量。制作石蜡标本:取患者标本,浸泡福尔马林24h,然后采用酒精由低浓度到高浓度进行梯度脱水,然后浸蜡,包埋后切成石蜡片[2]。FISH检测方法:取切片保温24h,采用高浓度大低浓度脱水,然后使用酸性亚硫酸钠处理、SSC洗片2次,蛋白酶孵育,再次洗片、脱水,然后风干后加入探针封片,保温24h杂交,再次洗片、乙醇(70%)浸泡,风干后滴加染色剂观察;IHC检测方法:取切片采用高浓度大低浓度脱水,使用PBS冲洗2次、高温修复、再次冲洗2次,加入过氧化物酶阻滞液中孵育,再次冲洗2次,滴加HER-2一抗孵育1h后再次冲洗2次,加入链霉菌抗生素-过氧化酶溶液孵育10min后再次冲洗2次,然后经过染色、二次复染、冲洗后封片观察[3-4]。
1.3评价指标以及评价标准
判断FISH、IHC两种方法对于HER-2的阳性检出率;对比二者合用后实验组患者和对照组患者检测结果与实际情况。
1.4统计学方法
将研究所得的所有数据进行统计分析,使用统计学软件SPSS 20.0进行统计分析,计量资料以(x±s)表示,采用t检验,计数资料以(%)表示,采用χ2检验。当P<0.05为差异有统计学意义。
2结果
2.1FISH检测结果分析
由表1可知,实验组与对照组阳性检出率与阴性检出率数值对比差异较大,具有比较的意义。
2.2IHC检测结果分析
由表2可知,实验组与对照组检出率对比差异显著,具有比较的意义。
2.3两种方法对比以及联合检测分析
由表3可知,FISH对于阳性检出率较高,而IHC对于阴性检出率较高,二者联合使用能够准确检出,与单一方法相比差异显著,具有比较的意义。
3讨论
乳腺癌是一种女性常见肿瘤,其发病由中老年患者逐渐向年轻化蔓延,对女性患者的生命健康以及工作和生活产生较大威胁。
靶向治疗是近年来新兴的一种治疗方法,即通过检测肿瘤患者中异常的分子结构,然后根据这种异常的分子设计针对性的靶向治疗药物,能够保证治疗效果,同时又不会对患者产生较大的副作用,HER-2基因与肿瘤的发病有关,成为靶向治疗作用点,因此准确检测HER-2基因是治疗的关键[5]。目前对于HER-2基因的检测临床上常用的有荧光原位杂交免疫组化两种方法,两种方法各有优缺点,现对其优缺点以及使用注意、影响因素分析如下:(1)优缺点:FISH检出阳性准确率较高,能够重复检测,信度高,但检测需要各种荧光仪器,检测费用较高,对于技术的要求较高,同时切片保存时间较短;IHC相对来说技术较为成熟,不需要较大的仪器设备,检测成本较低,对患者造成的经济负担较小,切片比较容易保存,但是IHC检测过程中标本容易受到破坏、抗体质量以及观察者的主管因素等会影响检测的准确率;(2)FISH检测影响因素:FISH目前已经发展较为完善,具有较高的准确率、灵敏度等,但使用过程中由于操作不当仍旧会影响检测结果的准确性,如标本制作时固定不足或过当固定会造成切片信号缺失;组织切片时冰冻组织影响观察结果,不能选择;脱蜡是否彻底会影响探针的穿透度,影响检测结果;蛋白酶消化不当造成细胞图像模糊;洗脱时间过长造成信号缺失,过短洗脱不彻底难以观察等;(3)IHC检测注意事项,IHC使用过程中洗涤时间不够容易造成信号模糊,标本处理不当容易造成无信号,消化不充分或者脱蜡不足造成背景过高,难以观察等[6-8]。
在本次研究中,选用96例乳腺癌患者作为实验组,另选96例健康志愿者作为对照组,分别对两组患者采用两种方法进行检测,经过试验分析发现,FISH对于乳腺癌阳性患者具有较高的检出率,能够有效避免假阴性,即能够有效预防疾病检测不出,错过最佳治疗期;而IHC具有较高的阴性检出率,二者合用能够准确的检测患者是否患有乳腺癌,为治疗提供可靠依据,在乳腺癌的诊断中具有较高的使用效果。
参考文献
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论文作者:彭强
论文发表刊物:《总装备部医学学报》2019年第06期
论文发表时间:2019/9/20
标签:乳腺癌论文; 检出论文; 患者论文; 较高论文; 原位论文; 两种论文; 实验组论文; 《总装备部医学学报》2019年第06期论文;