【摘 要】目的：探讨乙肝检测的影响因素，并提出有效解决办法。方法：选择2016年7月-2018年10月期间疾控中心收检的460份乙型病毒性肝炎样本为研究对象，回顾性分析其检验结果，对出现假阳性和假阴性检验结果的影响因素进行分析。结果：本次研究的460份样本中，60份出现假阳性或假阴性，占13.04%，其中35份为假阴性，占7.61%，25份为假阳性，占5.43%；同时，影响检验结果的因素包括：30份为操作因素，占50%，20份为标本因素，占33.33%，5份为干扰物质，占8.33%，5份为药物，占8.33%。结论：在乙肝检测中容易受到诸多因素的影响，应该规范操作，减少影响因素，提高检测准确率。
【关键词】酶联免疫酶标法；乙型病毒性肝炎；影响因素；处理方法
乙型病毒性肝炎是比较常见的一种疾病，其发病与感染乙型肝炎病毒有关，以腹胀、乏力、蜘蛛痣、恶心以及肝区疼等症状为主要表现，具有传染性强、传播途径广等特点，不仅危害患者健康，还严重影响人们的正常生活和工作[1]。当前在检测乙肝时，酶联免疫酶标法（ELLSA）是常用的一种方法，但是在检测的过程中，容易受到标本采集、操作不当等因素影响，出现假阴性或假阳性结果，影响病情判断。因此，本文对乙肝检测的影响因素和解决措施进行了探讨，现报道如下。
1.资料和方法
1.1一般资料
选择2016年7月-2018年10月期间疾控中心收检的460份乙型病毒性肝炎样本为研究对象，回顾性分析其检验结果，对出现假阳性和假阴性检验结果的影响因素进行分析。
1.2方法
1.2.1仪器和试剂
选择HEALESMB-530酶联免疫分析仪，由上海科华生物工程股份有限公司提供的标准品和试剂盒。
1.2.2检测方法
于清晨空腹状态下，采集5ml肘静脉血，以3000r/min转速进行10min离心处理后，对上层血清进行分离，并且保存于-20°C条件下待测。同时，运用ELLSA双抗夹心法检测乙肝病毒，操作的过程中，严格按照说明书要求进行。
1.3观察指标
统计假阳性和假阴性例数，并且对影响因素进行分析，包括药物、干扰物质、标本因素以及操作因素等。
1.4统计学分析
运用SPSS15.0软件分析数据，组间计数资料比较行X2检验，以P<0.05表示有差异。
2.结果
本次研究的460份样本中，60份出现假阳性或假阴性，占13.04%，其中35份为假阴性，占7.61%，25份为假阳性，占5.43%；同时，影响检验结果的因素包括：30份为操作因素，占50%，20份为标本因素，占33.33%，5份为干扰物质，占8.33%，5份为药物，占8.33%，见表1。
表1 乙肝检测的影响因素
3.讨论
ELLSA法是临床上诊断乙肝的一种常用检测方法，也是因相酶免的一种测定方法，具有敏感度高、环保、经济、简便以及实用的优点，被广泛运用在临床上[2]。但是本次研究发现，在乙肝检测中，有以下因素会导致假阳性或假阴性，降低检出率。
3.1标本因素
标本影响因素包括以下几点：①标本凝固不完全。通常情况下，正常血液在采集后30in-2h内开始凝固，18-24h血块完全收缩。在临床检验中，为了缩短检测时间，往往在血液还未凝固时便对血清进行分离，使部分纤维蛋白残留在血清中，运用ELLSA法检测时，则容易出现假阳性；②标本保存不当。标本长时间保存在冰箱中，容易出现本底过深，从而导致假阳性；③标本严重溶血。运用ELISA法对乙肝进行检测时，反应孔能够吸附血红蛋白，细胞内液进入也会稀释血清，影响检验结果；④标本出现细菌污染。细菌菌体中存在内源性辣根过氧化物酶，会出现非特异性显色，对测定结果造成干扰[3]。所以，为了减少标本因素干扰，在采集标本后，应该待其充分凝固后再对血清进行分离；对于溶血严重的标本，应该避免使用，并且选择新鲜采集、无污染的标本。
3.2操作因素
操作技术的影响及解决措施：①温浴的影响。抗原体结合及酶促反应对温度有严格的要求，通常为37°C，如果温度<4°C，会对反应速度产生影响；如果温度>45°C，会导致标记物脱落和失活，并且水浴和干浴的差异明显。所以在检测的过程中，尽量选择水浴，在水肿放入固相板，使其均匀受热，并且将密封膜贴上，避免侵入污物；②洗板。洗板是ELISA法的一个重要环节，洗涤不彻底或手工洗板，都会影响结果，而全自动或半自动洗板机不容易影响结果，但是洗板不当也会导致假阳性或假阴性[4]。所以在操作的过程中，要严格按照说明书要求，控制洗涤液浓度，最少洗板3-5次，并且洗板时，不能着急从板孔中倒掉洗涤液，而应该使孔中的洗涤液停留一段时间，这样可以彻底清洗，使结果的准确性提高。
3.3干扰物质和药物的影响
有研究发现，特异性干扰物质存在于40%的人血清中，包括交叉反应物质、嗜靶抗原自身抗体、嗜异性抗体、补体以及类风湿因子等，可以通过56°C30分钟灭活补体来使假阳性的检出率降低[5]。同时，免疫球蛋白能够结合乙肝表面抗原生成复合物，降低乙肝表面抗原的检出率。所以在操作时，可以运用0.5M的盐酸对标本进行60min处理，使阳性检出率提高，并且对于1个月内接种过乙肝疫苗的患者，应该避免再行乙肝表面抗原检测。
综上所述，乙肝检测有诸多影响因素，包括操作因素、标本因素等，应该规范操作，使影响因素减少，从而提高诊断准确率。
参考文献：
[1]侯新华.2014年舒兰市乙型病毒性肝炎监测结果分析[J].中国卫生产业，2017，14（07）：33-34.
[2]杜小燕.乙肝检验的假阴性与假阳性结果原因研究[J].临床医药文献电子杂志，2016，3（09）：1593+1596.
[3]李建芳.酶联免疫法检测乙肝的影响因素[J].中国社区医师，2016，32（07）：119+121.
[4]李丽娟.ELISA法检测乙肝的影响因素[J].中国卫生产业，2013，10（03）：95.
[5]杨琳.乙肝检测的影响因素及其处理方法[J].求医问药（下半月），2012，10（01）：42.
[6]赵一红，张振显.抗结核药物对乙肝病毒标志物阳性肺结核患者肝功能影响及处理[J].医药论坛杂志，2010，31（18）：155-156.
论文作者:杨琴
论文发表刊物:《中国蒙医药》2019年第2期
论文发表时间:2019/7/8
标签：因素论文; 阳性论文; 乙肝论文; 标本论文; 阴性论文; 操作论文; 血清论文; 《中国蒙医药》2019年第2期论文;