（杭州市红十字会医院检验科 浙江杭州 310000）
【摘要】目的：探究3种不同免疫检验方法检测抗HIV结果的可靠性。方法：选取无偿献血者400例，时间为2014年1月～2015年6月，对这400例无偿献血者的血液进行抗HIV检测，分别采取双抗原夹心ELISA法、金免疫层析试验以及间接酶联免疫吸附试验进行检测，并和确证HIV的确证金标准免疫印迹法做比较，对比3种检测方法在抗HIV检测中的应用价值。结果：双抗原夹心ELISA法检测抗HIV的假阳性率为0.00%，金免疫层析试验检测抗HIV的假阳性率为1.00%，间接酶联免疫吸附试验检测抗HIV的假阳性率为1.50%。双抗原夹心ELISA法检测HIV的假阳性率明显低于金免疫层析试验、间接酶联免疫吸附试验的抗HIV假阳性率（P<0.05）。结论：双抗原夹心ELISA法、金免疫层析试验、间接酶联免疫吸附试验这3种检测方法在抗HIV检测中应用，其中双抗原夹心ELISA法检测的准确性较高，具有较强的可靠性，意义重大，可推广。
【关键词】金免疫层析试验；间接酶联免疫吸附试验；双抗原夹心ELISA法；抗HIV
【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2016）14-0255-02
HIV（人类免疫缺陷病毒）是导致患者出现AIDS（获得性免疫缺陷综合征）的主要病毒[1]，AIDS（获得性免疫缺陷综合征）对患者的生命安全以及生活质量造成了严重的威胁，加强AIDS的控制意义重大。采取有效措施对抗HIV进行检测，利于AIDS（获得性免疫缺陷综合征）传播的控制以及患者疾病的治疗[2]。目前，检测HIV的主要方法包括双抗原夹心ELISA法、金免疫层析试验、间接酶联免疫吸附试验，这3种检测方法的可靠性目前仍然存在一定的争议，本文主要对3种不同免疫检验方法检测抗HIV结果与免疫印迹法进行对比，对它们的可靠性作分析，内容如下文：
1.资料与方法
1.1 基本资料
选取无偿献血者400例，时间为2014年1月～2015年6月，对这400例无偿献血者的血液进行抗HIV检测，分别采取双抗原夹心ELISA法、金免疫层析试验以及间接酶联免疫吸附试验进行检测。
400例无偿献血者中，男女之比为181/219，年龄在18岁～52岁之间，年龄平均值为（30.56±8.23）岁。
1.2 方法
ELISA法：分为双抗原夹心法以及间接酶联免疫吸附法这2种，为进行抗HIV检测时，应严格按照相关的说明进行操作。
金免疫层析试验：将免疫金标试纸的加样区放置在献血者的血液样本中，放置时间在10秒左右，对试纸颜色的变化进行观察，若出现2条红线，则表示检测结果为阳性，若仅出现1条红线，则表示检测的结果为阴性，对阴性标本的观察时间应在30分钟以上[3]。
免疫印迹法：经过PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应，经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。该技术也广泛应用于检测蛋白水平的表达。
1.3 观察指标
对400例无偿献血者经双抗原夹心ELISA法、金免疫层析试验、间接酶联免疫吸附试验检测抗HIV的结果与免疫印迹法的结果进行对比分析。
1.4 数据处理
研究数据录入SPSS 22软件，进行统计学处理。P＜0.05时，统计学有意义。
2.结果
双抗原夹心ELISA法检测抗HIV的假阳性率为0.00%，金免疫层析试验检测抗HIV的假阳性率为1.00%，间接酶联免疫吸附试验检测抗HIV的假阳性率为1.50%。双抗原夹心ELISA法检测HIV的假阳性率明显低于金免疫层析试验、间接酶联免疫吸附试验的抗HIV假阳性率，P＜0.05，统计学有意义。如下表。
表 双抗原夹心ELISA法、金免疫层析试验、间接酶联免
注：与金免疫层析试验、间接酶联免疫吸附试验相比，*P<0.05。确诊阳性的方法为免疫印迹法。
3.讨论
有研究表明[4]，5%～10%的HIV感染者的感染途径为血液传播。近年来，对无偿献血者的血液进行检测，发现HIV感染的几率在不断增加，导致血液安全性较为严峻，因此，应采取有效措施对HIV血液传播的情况进行控制，通过有效的检测措施对血液抗HIV情况进行检测，从而对HIV感染的血液传播进行预防。
导致患者出现AIDS(获得性免疫缺陷综合征）的主要病毒为HIV（人类免疫缺陷病毒），患者在出现HIV感染后，其可以对患者的CD4+T淋巴细胞进行溶解破坏，诱导CD4+T淋巴细胞凋亡，从而进行直接杀伤，导致CD4+T淋巴细胞亚群出现失衡的情况，对患者的自然杀伤细胞、B细胞以及单核细胞产生损伤（不同程度），导致患者的免疫系统缺失，多数HIV感染患者会因继发肿瘤以及感染而出现死亡的情况[5]。AIDS主要的传播途径为垂直传播、血液传播以及性传播，目前，仍然没有治疗AIDS的特效方法，因此，及时对HIV感染进行发现，并采取有效的措施进行控制，将传播途径切断，对易感人群进行保护，从而减少HIV感染的几率。
目前，对抗HIV检测的方法主要包括双抗原夹心ELISA法、金免疫层析试验、间接酶联免疫吸附试验，确证金标准是免疫印迹法。本文对400例无偿献血者的血液进行以上3种方法进行检测，3种检测方法检测抗HIV的结果存在一定的差异性，其中金免疫层析试验、间接酶联免疫吸附试验的抗HIV检测假阳性率较高。金免疫层析试验可以避免对标本进行处理，且受湿度和温度的影响较小，在检测的过程中，不需要使用仪器设备，操作较为简单，可批量对血液样本进行检测，也可以单独对血液样本进行检测。ELISA法主要包括双抗原夹心与间接酶联免疫吸附试验这两种方法，是目前检测抗HIV的主要方法，ELISA法检测的结果是由仪器进行分析，结果较为客观和准确，且检测的数据可以输入至计算机进行相关的储存处理，与其他检测方法相比，更加自动化以及科学化，但是ELISA法检测的过程较为繁琐，受到的干扰因素较多，且需要较长的时间进行检测，较易出现假阳性的情况，同时，ELISA法检测对操作人员的技术水平以及专业知识的要求较高[6]。
本文研究结果显示，双抗原夹心ELISA法检测抗HIV的假阳性率为0.00%，金免疫层析试验检测抗HIV的假阳性率为1.00%，间接酶联免疫吸附试验检测抗HIV的假阳性率为1.50%。双抗原夹心ELISA法检测HIV的假阳性率与金免疫层析试验、间接酶联免疫吸附试验的抗HIV假阳性率相比，差异显著，P＜0.05。
我国免疫诊断的试剂种类较多，其质量存在一定的差异性，因此，加强对免疫诊断的相关管理，对提高检测的准确度意义重大。双抗原夹心ELISA法、金免疫层析试验、间接酶联免疫吸附试验在抗HIV检测中均具有一定的应用价值，但是其诊断抗HIV的可靠性存在一定的差异性，以上3种抗HIV检测方法相比，双抗原夹心ELISA法检测抗HIV的准确性以及可靠性更高，利于HIV感染的检测，意义重大。
【参考文献】
[1]贲银银，李亮助，张晓燕等.三将丹体外抗HIV感染的活性研究及其机制探索[J].中华微生物学和免疫学杂志，2014，34(1):6-9.
[2]李建华，王倩，肖鲲等.核酸检验技术在洛阳市血液筛查中的初步应用与研究[J].中国输血杂志，2013，26(7):628-630.
[3]李猛，刘畅，任莉等.表达 HIV-1建立感染相关病毒（T／F）膜蛋白的重组痘病毒与蛋白疫苗联合免疫豚鼠后体液免疫特征研究[J].中华微生物学和免疫学杂志，2015，35(3):173-178.
[4]吉阳涛，韩晓旭，欧阳金鸣等.三种四代HIV筛查试剂检测窗口期的差异研究[J].中华检验医学杂志，2014，37(8):613-616.
[5]吴忠华，吕沁风，郑伟等.3种进口第四代人类免疫缺陷病毒检测试剂检测性能评价[J].中华医院感染学杂志，2014，24(17):4412-4414.
[6]欧阳金鸣，韩晓旭，吉阳涛等.三种不同技术原理的第4代HIV诊断试剂的临床检测性能比较研究[J].中华检验医学杂志，2013，36(10):903-907.
论文作者:孙海琼
论文发表刊物:《心理医生》2016年14期
论文发表时间:2016/9/29
标签：免疫论文; 层析论文; 抗原论文; 阳性论文; 血液论文; 率为论文; 印迹论文; 《心理医生》2016年14期论文;