【摘要】本文提供一种高效液相色谱法测定酱油中苯甲酸含量的实验方法，通过实验分析：苯甲酸标准溶液在2.5mg/L～50mg/L内线性良好，其线性相关系数为0.9991，加标回收率为91.7%，测量结果的相对标准偏差（RSD）为2.77%，苯甲酸的检测限为0.90mg/kg。该法简单，快速，具有良好的准确度和灵敏度，可用于酱油中苯甲酸的快速定量检测。
1 概述
酱油是我国传统的、使用最广的调味品，它赋予食品以适当的色、香、味，具有调味之功用。由于酱油营养丰富，适于微生物生长繁殖，为了防止酱油腐败变质，保持酱油的鲜度和良好的品质，达到其对保质期的要求，酱油中一般都会添加防腐剂苯甲酸。因此在酱油的卫生检测中，苯甲酸是一个较为重要的指标。苯甲酸作为防腐剂，由于它们都是人工合成的，过量摄入会对人体造成一定损害。
食品添加剂卫生标准《GB 2760-2014 食品安全国家标准食品添加剂使用标准》作为现行中华人民共和国国标，批准并允许在我国使用的食品防腐剂中最常见的是苯甲酸，并且规定在酱油中苯甲酸最大允许使用量为1.0g/kg。因此，测定苯甲酸的含量，控制其生产使用量，把可能存在的任何风险降低到最低限度，科学保护消费者的利益和健康，是十分必要的，而且具有重要的现实意义。
2 实验部分
2.1 仪器与试剂
（1）仪器：美国Agilent公司1100型高效液相色谱仪；昆山市超声仪器厂KQ-100TDB超声波清洗器；Millipore公司Milli-Q超纯水机。
（2）试剂：色谱纯甲醇；超纯水；色谱纯乙酸铵；10.6%亚铁氰化钾；22%乙酸锌；1.0mg/mL苯甲酸。
2.2 色谱条件
色谱柱：Agillent C18柱（250mm×4.0mm×5μm）；柱温：30℃；紫外检测波长：230nm；流动相：甲醇：0.02mol/L乙酸铵（7∶93）；流速：1.0mL/min；进样体积：10μL。
2.3 样品处理
取样10g，于100mL容量瓶中，加入20mL-30mL纯水混匀，加入10.6%亚铁氰化钾、22%乙酸锌各5.0mL，加水至刻度混匀，静置30min后用滤纸过滤，取滤液过0.45μm滤膜，待测。
2.4 标准曲线的制作
分别移取浓度为1.0mg/mL的苯甲酸标准储备液0.25mL，0.5mL，1mL，2mL，5mL，至100mL容量瓶中，用水稀释成浓度分别为2.5μg/mL，5.0μg/mL，10.0μg/mL，20.0μg/mL，50.0μg/mL的混合标准使用溶液，按上面的色谱条件进样分析，以标准浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，制作标准曲线。
3 结果与讨论
3.1 高效液相色谱条件的选择
乙酸铵缓冲液（0.02mol/mL）作为流动相体系，以抑制苯甲酸的电离效应。实验采用Agillent C18柱（250mm×4.0mm×5μm），通过调整甲醇与乙酸铵的比例，发现当甲醇：乙酸铵为7∶93时，苯甲酸可与干扰峰完全分离，且保留时间适当，分离度较好。
3.2 标准工作曲线
分别配制苯甲酸标准系列溶液，绘制标准工作曲线，结果表明：苯甲酸在2.5mg/L-50mg/L内线性良好，相关系数分别为0.9991，苯甲酸标准曲线如图1。若按本方法中的取样量和定容体积计算，按S/N=3确定检出限，则苯甲酸的检出限分别为0.90mg/L。
3.3 精密度实验
对检出苯甲酸的样品按上述方法重复6次进行测定，计算其结果的相对标准偏差，测量结果的相对标准偏差（RSD）为2.77%，结果见图2。
3.4 回收率实验
对样品作低、中、高3种浓度的回收率实验。在样品中加入苯甲酸各1mg，5mg，10mg，按上述前处理方法和色谱条件进样测定，得出加标回收率为91.7%，结果见图3。
4 结语
本文提出的高效液相色谱法测定酱油中苯甲酸含量方法，通过一系列实验证实其简便、快速、准确可靠、精密度好，可以满足基层日常分析工作的需要。从样品检测看，市场上的一些酱油的苯甲酸含量超过我国规定的最大使用量，食品安全部门需要加强监管，以保障食品安全。
参考文献
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论文作者:雷学梅
论文发表刊物:《中国西部科技》2019年第24期
论文发表时间:2019/11/27
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