（潍坊市人民医院 山东潍坊 261041）
基金项目：山东省中医药科技发展计划项目（2015-430）
【摘要】目的：探究黏附斑激酶在子宫内膜异位症（内异症）细胞分子的表达及其意义。方法：利用免疫组化Elivision检测正常子宫内膜和内异症患者异位子宫内膜及在位子宫内膜中黏附斑激酶的表达情况。结果：（1）FAK的表达率在在位子宫内膜中为73.33%、在异位子宫内膜中为93.33%、在正常子宫内膜中为35.00%，异位子宫内膜与正常子宫内膜的FAK阳性表达相比，差异有统计学意义（P＜0.01）；异位子宫内膜与在位子宫内膜的FAK阳性表达相比，差异有统计学意义（P＜0.05）；在位子宫内膜与正常子宫内膜的FAK阳性表达相比，差异有统计学意义（P＜0.05）。（2）FAK表达水平与内异症临床分期有关，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：FAK在内异症患者异位子宫内膜及在位子宫内膜组织中高表达，且与临床分期有关，提示FAK可能成为内异症潜在的分子标志物或治疗靶点。
【关键词】子宫内膜异位症；黏附斑激酶；在位内膜；异位内膜
The expression and significance of focal adhesion kinase in endometriosis
Xibo Wang Yan Liu
Weifang People’s Hospital，Weifang Shandong ，261041
Abstract：Objective: To investigate the expression and significance of focal adhesion kinase in endometrial cellular elements.Methods: We collected tissue samples from the endometrium of healthy women and from the eutopic endometrium and ectopic endometrium of women endometriosis. FAK expression was assessed by immunohistochemistry.Results: 1.FAK expression in eutopic endometrium was 73.33%，and in ectopic endometrium was 93.33%,and in normal endometrium was 35%. FAK expression was significantly higher in ectopic endometrium than in normal endometrium(P<0.01)，FAK expression was significantly higher in ectopic endometrium than in eutopic endometrium(P<0.05)，FAK expression was significantly higher in eutopic endometrium than in normal endometrium(P<0.05).2. FAK expression was correlated with disease stage(P<0.05).Conclusions: FAK in ectopic endometrium expression was significantly higher in ectopic endometrium and in eutopic endometrium than in normal endometrium，and was correlated with disease stage，which suggests that PAK plays a role in the pathogenesis and progress of endometriosis.
Key words: endometriosis; focal adhesion kinase; eutopic endometrium; ectopic endometrium
子宫内膜异位症（简称内异症）是指具有活性的子宫内膜组织出现在子宫内膜以外的部位所引起的一种疾病，发病率近年上升趋势，虽为良性病变，但具有和恶性肿瘤相似的生物学行为，严重影响着妇女的健康和生活质量。近年来，国内很多学者临床研究发现，内异症患者在位内膜的一些生物因子表达异常,有别于正常子宫内膜,使其具有更强的粘附和侵袭能力。黏附斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)是一种细胞质中的非受体酪氨酸蛋白激酶，与恶性肿瘤有着非常密切的关系，在肿瘤的侵袭、转移以及种植上都起着非常大的作用。目前关于内异症发病与FAK的研究性报道比较少见。本次研究的主要目的是通过检测内异症患者在位内膜、异位内膜及正常志愿者在位内膜FAK水平，并对其相关性进行分析，现将研究结果报道如下。
1资料与方法
1.1 一般资料
选取2016年1月~2016年7月于我院腹腔镜手术治疗的内异症患者30例，作为研究对象，术中获取异位内膜（巧克力囊肿壁）、在位内膜（宫腔内内膜），并选择同期门诊因输卵管阻塞因素不孕拟行试管婴儿术前行宫腔镜检查的患者10例，获取正常内膜（宫腔内内膜）作为对照组。所有患者年龄28~39岁，在年龄、体重及月经周期等一般资料方面的比较，均没有显著性差异(P＞0.05)，具有可比性。
1.2纳入标准 内异症患者均经手术病理证实，术前3个月内均未使用任何性激素类药物，志愿受试，并签署知情同意书者。
1.3 排除标准 合并有严重心脑血管疾病、肝肾功能不全、其他内分泌、免疫和代谢性疾病；精神病者；合并子宫肌瘤或其他生殖系统肿瘤、原发性痛经、盆腔炎性包块者。
1.4 实验方法
手术切除的标本用10%的中性甲醛固定，常规脱水之后，将石蜡进行简单的包埋和固定。
采用免疫组化Elivision的两步法来完成对FAK检测。其中一抗（FAK）的工作浓度比例为1:100，并且作空白对照时用PBS磷酸盐缓冲液来替代一抗（FAK），同时用已知阳性的肠癌对照白片作阳性的对照。
严格按照说明书来对具体流程进行操作。
1.5结果评断的标准
评判标准：主要采用人工半定量积分的方法，根据细胞质和细胞膜在光镜下的颜色对阳性细胞和阴性细胞进行区分和判断，若颗粒的颜色为黄色或者棕黄色则判断其为阳性细胞，若颗粒没有颜色则判断其为阴性细胞。因此，染色阳性细胞的评分主要是按照阳性细胞数评分和细胞颜色的深浅程度来进行判断的。
（1）阳性细胞数的评分：小于10%为0分，11%~25%为1分，26%~50%为2分，大于50%的为3分。（2）细胞颜色的深浅程度：不着色0分，淡黄色1分，棕黄色2分，黄褐色3分；此外两项相加累积的总分在0~1分为阴性（-），2~3分为弱阳性（+），4分为阳性（++），5分以上为强阳性（+++）。
1.6 统计学方法
采用统计软件SPSS16.0分析，计数资料取率（%），计量资料取平均值±标准差（x±s），组间率对比取x2检验（或T检验），P＜0.05为统计差异。
2结果
2.1 FAK在三种子宫内膜中的表达：FAK在三种子宫内膜中的染色由深到浅依次为：异位子宫内膜＞在位子宫内膜＞正常子宫内膜，其中在正常子宫内膜中染色最浅，差异有统计学意义（P＜0.05或0.01）；同时FAK的表达率在在位子宫内膜中为73.33%、在异位子宫内膜中为93.33%、在正常子宫内膜中为30.00%；异位子宫内膜与正常子宫内膜的FAK阳性表达相比，差异有统计学意义（P＜0.01）；异位子宫内膜与在位子宫内膜的FAK阳性表达相比，差异有统计学意义（P＜0.05）；在位子宫内膜与正常子宫内膜的FAK阳性表达相比，差异有统计学意义（P＜0.05），如下表1。
3讨论
内异症为妇科常见病、多发病，其发病机制尚不十分明了[1]。随着医学上对内异症的广泛深入的研究，证实该病具有与恶性肿瘤非常相近的生物学特性，同时具有明显的黏附、侵袭、转移和复发等类似恶性肿瘤的生物学行为。黏附斑激酶（FAK）位于整合素、神经肽及癌基因作用的聚合点，是细胞质中的一种非受体酪氨酸蛋白激酶；它是细胞内多条信号传导通路的交汇点，主要功能是激活后通过Ras／MAPK、PI3K/Akt等信号通路介导细胞和胞外基质的粘附，从而参与细胞多种生理功能及肿瘤细胞的形成、增殖、凋亡、转移与侵袭[2］。研究发现在人类多种恶性肿瘤如乳腺癌、卵巢癌、肝癌、大肠癌等中发现FAK的处于高表达或过度激活状态[3、4、5］，说明FAK的表达水平有可能为肿瘤侵袭和转移的早期事件的标志物[6]，FAK高表达或过度激活可抑制肿瘤细胞凋亡，改变其粘附性能，增强迁移能力，促进肿瘤细胞的增殖，抑制其表达或功能则可抑制肿瘤的恶性表型[2］。
目前有研究表明内异症与FAK表达异常有关，FAK在异位内膜中表达明显升高，其表达水平与内异症临床分期、盆腔疼痛及卵巢子宫内膜异位囊肿的大小呈正相关[7］。本次研究也证明内异症与FAK表达异常有关，差异有统计学意义（P＜0.05），且随着临床分期的增高，FAK的表达也相应升高，说明FAK在内异症的发生、侵袭转移中起重要作用。提示FAK有希望成为内异症的分子标志物或治疗靶点，关注FAK可能成为今后内异症诊治一部分。
参考文献：
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[3]韩少山,刘青光,周振宇,等,FAK在肝细胞癌中的表达及临床病理意义[J].西安交通大学学报（医学版），2013，34（1）:81-85.
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[5]Yao L,et al.An aberrant spliced transcript of focal adhesion kinase is exclusively expressed in human breast cancer[J].J Transl Med,2014,12:136.
[6］Choi CH,Webb BA,Chimenti MS,et al.pH sensing by FAK-His58 regulates focal adhesion remodeling[J].J Cell Biol,2013,
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[7］Mu L，Zheng W，Wang L，et al. Focal adhesion kinases expression in endometriosis[J]. Fertil Steril，2008，89(3):529-37.
论文作者:王希波,刘艳
论文发表刊物:《中医杂志》2016年12月
论文发表时间:2017/6/1
标签：内膜论文; 子宫内膜论文; 阳性论文; 激酶论文; 细胞论文; 统计学论文; 子宫论文; 《中医杂志》2016年12月论文;