（德阳市人民医院生殖遗传科 四川 德阳 618000）
【摘要】目的：了解德阳地区丙型肝炎患者丙肝病毒基因型分布情况，分析丙肝病毒基因型与HCV病毒载量的相关性，为丙型肝炎患者个体化抗病毒治疗方案提供依据。方法：采用PCR-荧光探针法，对德阳地区471例检测HCV-RNA水平>1.0×104IU/ml 的丙肝患者同时进行HCV基因型检测。结果：471例丙肝患者共检出7种基因型，1b型检出率较高占92.36%（435/471）、2a型占0.85%（4/471）、3a型占0.64%（3/471）、3b型占3.39%（16/471）、 6a型占2.34%（11/471）、2a/3a占0.21%（1/471）、2a/3b占0.21%（1/471）；1b 型患者血清HCV-RNA病毒载量高于非1b 型，差异均有统计学意义(P<0.05)。结论：德阳地区丙肝患者HCV基因型以1b型为主，且1b 型患者血清HCV-RNA病毒载量高于非1b 型。
【关键词】丙型肝炎病毒；基因型；HCV-RNA
【中图分类号】R575.1 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2019）14-0212-03
丙型肝炎病毒(HCV)感染是导致慢性肝脏疾病的的主要原因之一，全球HCV的感染率约为2.8％，约1.85亿人感染HCV，每年因HCV感染导致的死亡病例约35万[1-3]。由于丙型肝炎病毒复制所依赖的聚合酶缺乏校对功能，HCV 基因组序列容易发生变异，呈现高度的异质性。根据HCV 基因组核苷酸序列的差异，可将HCV 分为6 种基因型大约80 余种亚型[4-5]。不同HCV基因型感染者的临床表现、肝病严重程度及慢性化病程进展均有差异，抗病毒治疗的效果也不同，基因型检测可为HCV患者个体化抗病毒治疗方案提供依据[6]。为了解德阳地区丙型肝炎患者HCV基因型分布情况，对471例丙肝患者HCV基因型检测结果及与HCV病毒载量相关性进行统计分析，现报道如下。
1.资料与方法
1.1 一般资料
收集2013年1月－2016年12月在德阳市人民医院门诊及住院部就诊的，471例检测HCV～RNA水平＞1.0×104的IU/ml的同时进行HCV基因型检测的丙肝患者为研究对象。其中男226例，女245例；年龄范围为20岁至78岁。丙肝诊断参照2004 年中华医学会《丙型肝炎防治指南》诊断标准[7],患者此次就诊前均未进行过抗病毒治疗。
1.2样本采集和处理
空腹静脉采血3ml，3000r/min离心10min；分离血清立即检测或置于1.5ml。
经高温高压灭菌处理的EP管内，放置于～20％冰箱保存1周内检测。
1.2 主要仪器和试剂:
丙肝病毒核酸定量检测试剂盒购自凯杰生物（深圳）有限公司；HCV 基因分型检测试剂盒购自泰普生物有限公司，均采用罗氏LightCycler480 II实时荧光定量PCR仪进行检测，操作严格按照试剂说明书进行。
1.3 检测方法
血清HCV-RNA定量检测：样本核酸提取纯化采用二氧化硅吸附分类法，采用RT-PCR方法结合荧光探针扩增检测技术，对血清标本进行HCV-RNA定量检测。
HCV 基因分型：采用RT～PCR方法结合荧光探针扩增检测技术，检测HCV5种基因型（1b、2a、3a、3b、6a）。
1.4 统计学方法
数据采用SPSS20.0统计软件进行统计学分析，计数资料采用率（%）表示，进行χ2检验，计量资料采用（x-±s）表示，进行t检验，P＜0.05为差异具有统计学意义。
2.结果
2.1 德阳地区丙型肝炎患者基因型分布情况：471例丙肝患者共检出7种基因型，1b型检出率高占92.36%（435/471）、其余依次为3b型占3.40%（16/471）、6a型占2.33%（11/471）、2a型占0.85%（4/471）、3a型占0.64%（3/471）、检出两例混合型（2a/3a、2a/3a各1例）各占0.%（1/471）；见表1。
3.讨论
本研究依据Simmonds命名法将HCV遗传变异性分为6 种基因型，每种基因型又分为若干亚型[8]。HCV基因型呈现地域性分布，不同地区HCV基因型构成存在一定的差异[9]。本调查结果显示：德阳地区HCV基因型以１b型为主占比高（93.26％），其次是3b型占3.40%、6a型占2.33%、2a型少占0.85%、存在少量混合感染2a型合并3a、3b各1例。与林江[10]报道川南地区1b、3b 和6a为优势基因型的现象一致，但构成比1b型高达93.26％占绝对优势，高于全国平均水平；与毗邻乐山地区以1b和2a为主不同[11]；文献[12]报道的在西部和南部地区，基因1型比例低于全国平均比例，西部基因2型和3型比例高于全国平均比例，混合基因型少见(约2.1％)，多为基因1型混合2型，与德阳地区存在较显著差异。综上，德阳地区HCV基因分布表现出1b型优势显著，亚型种类丰富的突出特点。
HCV基因分型对丙肝个体化治疗至关重要，达到持续病毒学应答(SVR)是治疗HCV 感染的目的,也是最重要的治疗目标。由于HCV不同基因型具有迥异的致病性和药物敏感性，不同基因型感染的患者的病毒学应答率差距明显，如2、3及6型患者较易获得持续病毒学应答（SVR），而1和4型应答较差，属于难治性丙型肝炎，其利巴韦林的用药剂量和用药时间有显著差别，选择的抗病毒治疗药物和疗程也应不同[13]。由于德阳地区1b类型患者比例高，1b型导致的丙型肝炎在临床上为难治类型，因此研究1b型与非1b型之间的病毒载量差异,通过独立样本t检验，比较1b型与非1b型患者血清HCV-RNA 载量，结果显示1b型患者HCV-RNA载量高于非1b 型患者,t=2.718，P＜0.05，两者病毒载量差异有统计学意义。从患者血清病毒载量方面反映德阳地区1b类型的丙型肝炎病人的病情要比非1b 类型的严重，与临床上1b型为难治型和易形成慢性肝炎的临床特点相符[14]。
本次研究，通过了解德阳地区丙型肝炎患者HCV基因型分布情况和分析丙肝病毒基因型与病毒载量的相关性，显示德阳地区丙肝防治形势依然严峻，同时为德阳地区丙型肝炎患者个体化抗病毒治疗方案提供依据。
【参考文献】
[1]Mohd Hanafiah K，Groeger J，Flaxman AD，et a1．Global ePIDemiology of hePatitis C virus infection：new estimates of age—specific antibody to HCV seroPrevalenee[J]．HePatology，2013，57(4)：1333一1342．
[2]Lavanchy D．The global burden of hePatitis C EJ]．Liver Int，2009，29 SupPl 1：74—81．
[3]WHO．Guidelines for the screening，care and treatment of Persons with hePatitis C infection[EB／OI。]．[2014—04]．http：／／www． who． int／hePatltis／Publications／hePatitis—c—guidelines／en／．
[4] 杨锡琴,修冰冰,王国华,等.HCV 血清分型方法的建立及其评价[J].传染病信息,2012,25(2):91-93.
[5] 周一萌,窦晓光,张琳.丙型肝炎病毒基因分型检测方法研究进展[J].中国实用内科杂志,2014,34(8):819-822.
[6]Pawｌotsky JM.Heｐatｉtｉs C vｉrus genetｉc varｉabｉｌｉty：ｐathogenｉc anｄ
cｌｉnｉcaｌ ｉmｐｌｉcatｉons.Cｌｉn Lｉver Dｉs 2003；7：45-66.
[7]中华医学会肝病学分会,中华医学会传染病与寄生虫病学分会.丙型肝炎防治指南[J].中华传染病杂志,2004,22(2):131-136.
[8]Simmonds P,Holmes EC,Cha TA,et al.Classification of hePatitis C virus into six major genotypes and a series of subtypes by Phylogenetic analysis of the NS-5 region[J].J Gen Virol,1993,74(Pt11):2 391-2 399.
[9]Nguyen MH．Keeffe EB．Chronic hePatitis C：genotypes 4 to 9．Clin Liver Dis，2005，9：41l-426．
[10]林 江,温先勇,唐 敏等.川南地区丙型肝炎病毒基因型的特征及其临床价值.四川医学.2016,12(37):1348-1350
[11]陈玮，谢祥红．周建丽.运用多重PCR对乐山地区丙型肝炎病毒基因的分型研究.医学信息.2012.11(25-7).90
[12]Rao H，Wei L，Lopez Talavera JC，et a1．Distribution and clinical correlates of viral and host genotypes in Chinese Patients with chronic hePatitis C virus infection[J]．J Gastroenterol HePatol，2014，29(3)：545—553．
[13]李伟琴，徐光华，吴殿磊，等.丙型肝炎基因分型进展及其临床意义[J].世界华人消化杂志，2009，17(6)：589-593.
[14]毕蔓茹，王晓韧，王威，等.黑龙江地区丙型病毒性肝炎病毒基因型与亚型的分布特点及临床意义[J].中国医学前沿杂志(电子版)，2014 (9)：30-32.
论文作者:王秀,徐志红,文强,曹桂群
论文发表刊物:《医药前沿》2019年14期
论文发表时间:2019/7/18
标签：德阳论文; 基因型论文; 患者论文; 丙肝论文; 地区论文; 病毒论文; 丙型肝炎论文; 《医药前沿》2019年14期论文;