肖顺[1]2003年在《福建省根结线虫食线虫菌物多样性》文中研究指明调查表明福建省的食线虫菌物资源丰富，并极具生物多样性。从福州、厦门、泉州、诏安、古田、叁明、建瓯、顺昌等十县(市)17种植物采集的根结线虫样本上共获得868个食线虫菌物的分离物，隶属于24个属，已鉴定17个种和3个变种。壳二孢属(Ascochyta)、拟鞘孢属(Chalaropsis)、帚梗柱孢属(Cylindrocladium)、丝葚霉属(Papulospora)、刚毛孢属(Pleiochaeta)、横隔霉属(Pleurophagmium)、帚霉属(Scopulariopsis)、色串孢属(Tolura)、异孢镰孢(Fusarium hetersporium)、半裸镰孢(F.semitectum)、绮丽小克银汉霉(Cunninghamella elegans)为首次报道在根结线虫上分离获得。尖镰孢(F.oxysporium)、茄病镰孢(F.solani)、淡紫拟青霉(Paecilomyces lilacinus)和厚孢轮枝孢(Verticillium chlamydosporium)为福建省根结线虫上的食线虫菌物的优势种群，在17种植物根结线虫标本中出现频率分别为64.7％、82.3％、52.9％和52.9％，分别占食线虫菌物分离物总数的9.78％、17.61％、19.45％和22.78％。根结线虫的食线虫菌物以卵囊寄生菌物为主，卵囊上菌物分离率为66.7％；雌虫上菌物分离率为24.3％。 根结线虫的食线虫菌物区系具有多样性，不同菌物区系其食线虫菌物种类、数量和优势种群与根结线虫寄主植物种以及根结线虫种关系密切。淡紫拟青霉和厚孢轮枝孢是重要的食线虫菌物，种群间(或不同分离物)存在较大的致病性分化现象。选用淡紫拟青霉和厚孢轮枝孢对南方根结线虫进行致病性测定结果：厚孢轮枝孢厚孢变种和串孢变种对线虫离体卵的寄生率分别为29.9％和24.7％，盆栽防治效果为25.9％和40.8％。淡紫拟青霉不同分离物对线虫离体卵的寄生率为11.7％～39.5％，盆栽防治效果为17.9％～77.8％。 室内初步测定了部分菌株的发酵粗提液的杀线虫活性，获得五株杀线虫活性较强的菌株。
肖顺, 张绍升[2]2004年在《根结线虫的寄生菌物生物多样性》文中进行了进一步梳理从福建省8个县(市)采集的果树、蔬菜、花卉等作物根结线虫样本上,分离得到24属、868株菌物分离物,显示了根结线虫寄生菌物的物种多样性.淡紫拟青霉(Paecilomyceslilacinus)和厚孢轮枝孢(Verticilliumchlamydosporium)为优势种群.根结线虫的寄生菌物以卵寄生菌物为主,寄生性菌物区系和优势种群与根结线虫寄主植物关系密切.
肖顺[3]2006年在《根结线虫寄生真菌资源与淡紫拟青霉PL89的研究》文中认为从全省9个县(市)18种作物上根结线虫的雌虫、卵和卵囊上共获得888个寄生性真菌分离物，隶属于26属，鉴定出17种，3个变种．其中厚垣孢普可尼亚菌(Pochonia chlamydosporia)、淡紫拟青霉(Paecilomyces lilacinus)、茄病镰孢(Fusarium solani)和尖孢镰孢(F. oxysporum)是福建省根结线虫的寄生性真菌优势种群，分别占分离物总数的22.30％、19.14％、17.23％和9.57％．根结线虫的寄生真菌类型以卵囊寄生真菌为主．从175株厚垣孢普可尼亚菌(P. chlamydosporia)鉴定出厚孢变种(P. chlamydosporia var. chlamydosporia)143株和串孢变种(P. chlamydosporia var.catenulata)32株，其中厚孢变种为优势变种．厚孢变种与串孢变种在自然界中存在的比例为4.47：1． 构建“几丁质平板筛选、几丁质酶活测定、对根结线虫致病力测定”的寄生性真菌高效菌株筛选模型，从123株淡紫拟青霉分离物中筛选获得5株高产几丁质酶、对根结线虫高致病力的菌株021117-89(即PL89)、021117-77、021029-27、021020-65、021020-36．采用明胶琼脂平板法与几丁质平板法相结合，从175株厚垣孢普可尼亚菌分离物中筛选获得5株产蛋白酶能力与产几丁质酶能力均较强的菌株010727-1、021020-30、021120-48、021020-34、021120-81． 对菌株PL89的发酵生物学特性的研究结果表明，PL89液体发酵的适宜C／N为5：1，C／N为20：1有利于PL89固体平板的产孢；碳源浓度对PL89液体培养大量产孢出现的时间和持续的时间有一定的影响，碳源浓度为1mol·L~(-1)可使液体发酵大量产孢时间提前，适宜PL89固体平板产孢的碳源浓度为0.5mol·L~(-1)；菌株对不同的碳、氮源种类利用能力不同，结构复杂的碳源(可溶性淀粉)及有机氮源有利于PL89的生长；主要元素缺失对菌株PL89的生长影响很大，其中缺失磷、硫和镁等元素对PL89的液体发酵产孢的减产率分别达90.8％，90.6％和83.1％，对固体平板的产孢减产率分别为83.6％，59.8％和58.8％；微量元素添加培养试验结果表明，菌株PL89对铜离子和铝离子较敏感，添加一定浓度的锰离子、镁离子和元素硼对PL89液体发酵的产孢及生物量的形成有显着的促进作用；添加适当浓度的维生素叶酸和维生素B_2均十分有利于PL89液体发酵孢子产量的增加． 根据PL89菌株营养需求特性，研制了虾壳粉培养基．通过单因素试验证明细度为过孔径为149μm标准筛的几丁质粉末对菌株产几丁质酶的诱导性最强，同时添加蛋白胨能使产酶高峰提早、产酶量提高；多因素正交试验确定在添加2g·L~(-1)细度为过孔径为149μm标准筛的几丁质粉末、2g·L~(-1)蛋白胨、1g·L~(-1) KH_2PO_4、0.5g·L~(-1)MgSO_4、0.2g·L~(-1)CaCl_2和0.2g·L~(-1)NaCl的培养基中接入经马铃薯蔗糖培养基(PSA)活化10d的菌碟，接种量为6×10~9个孢子·L~(-1)，500mL摇瓶装量150mL，在28℃、转速为150r·min~(-1)的条件下培养3d，发酵液中几丁质酶活最高，可达到0.11U·mL~(-1)． 用菌株筛选模型获得的PL89菌株具有很强的分解和利用几丁质的能力，适合在以虾壳为主要成分的虾壳粉培养基上生长．通过对虾壳粉的成分进行测定分析，结果表明，虾壳粉培养基所含的营养全面，碳源浓度和碳氮源比率适合；实验结果表明，虾壳粉培养基比马铃薯蔗糖培养基更适宜于菌株PL89液体发酵的产孢及生物量的形成；用虾壳粉作为唯一的营养来源液
黄斌锋[4]2011年在《福建省蔬菜根结线虫病病原鉴定与食线虫真菌应用的初步研究》文中研究说明2009年7月至2010年9月在福建部分蔬菜生产基地采集蔬菜根结线虫病样本16份,根据形态学特征并结合分子生物学方法对其病原线虫种类进行鉴定,确定蔬菜根结线虫种类有南方根结线虫(Meloidogyne incognita)、爪哇根结线虫(Meloidogyne javanica)、花生根结线虫(Meloidogyne arenaria)等3个种,南方根结线虫为优势种。田间根结线虫种群多数为单一种,有31%的样品为2个种组成的混合种群。这些混合种群由南方根结线虫与爪哇根结线虫或南方根结线虫与花生根结线虫组成。将根结线虫接种于17种蔬菜,表现高度感病的蔬菜有生菜、木耳菜、辣椒、茄子、番茄、甜瓜,线虫繁殖指数为52%-114%；中度感病的蔬菜有黄瓜、芥菜、苋菜、荠菜、包菜、白菜、蕹菜、芹菜,线虫繁殖指数为12%-48%；抗病的蔬菜为豇豆、花椰菜,线虫繁殖指数为2.5%-7%；葱为高抗蔬菜,线虫在其上难以繁殖。从8种蔬菜病根上采集根结线虫卵囊样品624份,分离到真菌401株,除34株不产孢及疑难种未鉴定外,已鉴定的真菌有18个属,即：镰孢菌(Fusariumsp.)、淡紫拟青霉(Paecilomyces lilacinus)、根霉(Rhizopus sp.)、曲霉(Aspergillussp.)、厚垣孢普可尼亚菌(Pochonia chlamydosporium)、丝核菌(Rhizoctonia spp.)、弯孢霉(Curvularia sp.)、毛霉(Mucor sp.)、刚毛孢(Pleiochaeta sp.)、木霉(Trichoderma sp.)、链格孢(Alternaria sp.)、拟盘多毛孢(Pestalotiopsis sp.)、青霉(Penicillium sp.)、炭疽菌(Colletotrichum sp.)、黑孢霉(Nigrospora sp.)、小克银汉霉(Cunninghamella sp.)、枝孢霉((?)ladosporium sp.)、横隔霉(Pleuropgagmium sp.)。镰孢菌属、曲霉属、木霉属为优势真菌,分别占总分离数的31.2%、10.2%、12.7%；食线虫真菌淡紫拟青霉和厚垣孢普可尼亚菌分别占8.1%和4.5%。筛选出的淡紫拟青霉高效菌株PL89于实验室条件下对根结线虫卵的寄生率为76%。盆栽试验相对防治效果为65%；田间试验表明该菌株在土壤中具有良好的定殖能力，对寄主植株有促生作用。
张小艳[5]2007年在《陕西省蔬菜根结线虫拮抗真菌的分离与筛选》文中研究指明根结线虫是农业生产中一类重要的病原物,严重威胁着农业生产,特别是随着保护地蔬菜种植面积的扩大,已成为大棚蔬菜生产中的最大障碍,其生物防治也越来越受到人们的广泛重视。本研究从陕西省延安、渭南、西安、咸阳、杨凌、宝鸡、商洛等9个县市根结线虫发生严重的35个蔬菜地块采集根结线虫样品118份,通过直接分离法分别从根结线虫雌虫、卵囊和卵上共分离到拮抗真菌199株,除43株不产孢或疑难种未鉴定外,其余菌株经初步鉴定分属于镰刀菌属、拟头孢霉属、芽枝霉属、链格孢属和拟青霉属等22个属,其中镰刀菌分离频率最高,占分离总数的34%,为优势属,且不同地区间拮抗真菌的数目与种类也呈现较大差异性。在离体条件下,通过测定菌株孢子悬浮液对南方根结线虫卵孵化的相对抑制率对其中131株非镰刀菌拮抗真菌进行筛选,发现大多数菌株对根结线虫卵孵化都有一定的抑制作用,其中相对抑制率达60%以上的菌株有8株。菌株XPE-36对根结线虫卵具有较强的寄生性,相对抑制率达到82.3%,具有一定的生防潜能。通过测定菌株发酵粗提液对南方根结线虫二龄幼虫的致死率对其中68株镰刀菌进行筛选,发现多数菌株对根结线虫二龄幼虫都具有一定的毒杀活性。其中菌株LGEM-5对根结线虫二龄幼虫的校正死亡率达到80.6%,7株镰刀菌的校正死亡率达到60～80%,具有较强的杀线虫活性。此外,还测定了菌株LGEM-5的发酵粗提液的热稳定性,发现该菌株发酵粗提液经热处理后仍保持了较高的杀线虫活性,具有良好的热稳定性。根据形态学特征将菌株XPE-36鉴定为淡紫拟青霉(Paecilomyces lilacinus),LGEM-5鉴定为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)。
姜治清[6]2008年在《杀线虫担子菌的筛选及毛头鬼伞对烟草根结线虫防治的研究》文中研究说明食线虫担子菌的研究始于1941年Drechsler建立毒虫霉属(Nematoctonus),该类真菌以捕食和内寄生的方式作用于线虫。本论文就部分食线虫担子菌生物防治效果、生物学特性及毛头鬼伞(Coprinus comatus)对烟草根结线虫病的防效及对土壤根围线虫的影响作了初步探讨,以期为线虫的生物防治提供科学的理论依据,主要取得以下结果:1、收集担子菌86株,获得纯培养的有43株,经初步筛选,获得作用48h线虫死亡率在700以上的菌株10株;死亡率达1000的有2株。通过担子菌对线虫的作用方式研究发现,其作用方式有菌丝束缚,毒素毒杀兼寄生和降解虫体等。2、毛头鬼伞(C.comatus)的生物学特性与杀线虫作用的关系研究显示:该菌菌丝生长的最适条件为24～28℃、pH6～7、黑暗培养。尽管营养、温度、pH及光照等对菌丝生长均有显着影响,但并不影响其杀线虫的作用,线虫与菌丝接触48h,死亡率(除水琼脂外)均达90%以上。3、毛头鬼伞菌(C.comatus)培养菌渣的盆栽试验结果显示:毛头鬼伞对烟草根结线虫的发生有一定抑制作用,并对烟草的生长有一定促进作用。不同菌量和不同施菌时间(菌量相同)的毛头鬼伞对烟草根结线虫的抑制效果不同,250g/盆、125g/盆、84g/盆和42g/盆的抑制率分别为57.51%、50.36%、40.43%和30.50%,施菌当天、5d和20d的处理组根结的抑制效果分别为42.41%、44.17%和57.51%。4、用毛头鬼伞(C.comatus)进行烟草根结线虫病防效的田间试验研究,结果表明毛头鬼伞对烟草根结线虫有一定的防效,防治效果为47.55%,其它处理组粗皮侧耳、阿维菌素的防治效果分别为47.75%、52.88%。此外几个处理对烟草的生长也都有一定的促进作用。5、试验中共分离鉴定出线虫8目15科20属,分别归属于四大营养类群:食真菌类、食细菌类、植物寄生类、杂食/捕食类。分析各个处理对烟草根围土壤线虫营养类群的影响,结果表明:毛头鬼伞、粗皮侧耳及阿维菌素均能降低烟草根结线虫的数量,达到防治根结线虫的目的。毛头鬼伞、粗皮侧耳能有效降低植物寄生线虫的个体密度,提高腐生线虫的个体密度。
黄斌锋, 陈绵才, 张绍升[7]2011年在《福建省蔬菜根结线虫卵囊寄生真菌鉴定》文中研究表明调查了福建省部分地区的蔬菜根结线虫卵囊寄生真菌。从8种蔬菜病根上采集根结线虫卵囊样品624份,分离到真菌401株,除34株不产孢及疑难种未鉴定外,已鉴定的真菌有18个属:镰孢菌、拟青霉、根霉、曲霉、厚垣孢普可尼亚菌、丝核菌、弯孢、毛霉、刚毛孢、木霉、链格孢、拟盘多毛孢、青霉、炭疽菌、黑孢霉、小克银汉霉、枝孢霉、横隔霉。镰刀菌属、曲霉属、木霉属为优势真菌,分别占总分离数的31.2%、10.2%、12.7%;淡紫拟青霉和厚垣孢普可尼亚菌分别占8.1%和4.5%。
余洁[8]2008年在《苏云金芽胞杆菌杀线虫菌株的筛选及其活性因子研究》文中研究指明化学农药对农业有害生物的防治虽然成效显着,但是由于日益恶化的环境问题,微生物农药的使用是大势所趋。苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)制剂是目前应用最为成功的一类微生物杀虫剂,在植物病害防治方面也取得了一定的进展。深入挖掘我国丰富的苏云金芽胞杆菌资源,分离克隆新型高毒力的杀虫蛋白基因,对构建高效广谱工程微生物和培育转基因抗虫植物具有重要的理论意义和应用价值。新秀丽小杆线虫(Caenorhabditis elegans)是蘑菇等真菌上的重要病原线虫,同时也是一种模式生物,能够在室内培养。本试验采用大肠埃希氏菌饲养,获得大量虫源,建立了以C.elegans为生物测定指标筛选高活力Bt菌株的技术路线,成功地筛选到高效活性菌株Bt 010。从Bt 010中克隆表达了两类Bt毒性因子:晶体蛋白和几丁质酶,采用质谱手段证实了几丁质酶的存在。该试验初步揭示了Bt侵染线虫的机制,丰富了Bt侵染线虫过程中的致病毒力因子几丁质酶的性质及其酶基因,为研究Bt侵染线虫的机制提供了有益的佐证。通过生物测定观察线虫对不同研菌株所产生的毒力反应,发现在118株Bt中只有6株对线虫有毒性,作用时间大约在36h左右,6株中Bt010最为理想,其LC_(50)为0.498μg/ml。Bt010伴孢晶体以菱形和方形为主,对其基因组进行PCR扩增,发现该菌株的基因组中存在cry 1Ⅰa,而未见预期含有的cry 5和cry 6等已知杀线虫的cry基因。根据cry 1Ⅰ基因保守序列设计简并引物,利用PCR技术扩增出杀虫晶体蛋白基因片段并在GenBank登录,登录号为EF065179。对该基因克隆表达结合生测发现该基因的表达产物对线虫不产生毒性作用。提取Bt010的总蛋白进行质谱分析,得到相似肽段推测其主要成分为几丁质酶。利用光学显微镜观察,Bt010处理线虫后,能不同程度地降低线虫的活动力,抑制线虫生长,明显破坏线虫体壁的完整性。透射电镜照片清楚表明Bt010能够有效降解体表层,引起线虫体壁结构的剧烈变化。基于以上结果,根据几丁质酶基因保守序列设计引物,利用PCR技术从Bt010中扩增到几丁质酶Chitinase基因,该基因已在GenBank中登录,登录号为EU030625。对该基因进行了克隆表达,生测发现该菌对线虫具有一定程度的毒杀作用。Bt010在杀灭线虫的过程中对线虫DNA不造成损伤,可以作为Bt安全性实验的辅证。除了对模式线虫Celegans有活性外,Bt010菌株对番茄根结线虫(Meloidogynespp.)也有一定的防效,证明该菌株具潜在的应用价值。本研究的特色和创新主要体现在以下叁点:一.建立了以C.elegans生测为指标筛选高活力Bt菌株的技术路线;二.采用质谱手段证实了Chitinase在Bt中的存在;叁.率先证实了Bt Chitinase对线虫的毒性作用。
卢明科, 潘沧桑, 李舟[9]2004年在《厚垣轮枝孢菌(Verticillium chlamydosporium)防治植物线虫研究进展》文中指出厚垣轮枝孢菌(Verticilliumchlamydosporium)是一种重要的噬植物线虫真菌。文章对该菌的分类地位、生物学习性、噬线虫机制及其在防治植物线虫中的应用情况进行了综述,探讨了影响该菌防治植物线虫的一些因素,并指明了今后的研究方向。
赵鸿[10]2003年在《甘肃省蔬菜根际寄生线虫的种类鉴定、发生分布及根结线虫rDNA-ITS-RFLP及其防治的研究》文中认为2002年3月—8月份，对甘肃省兰州、天水、红古等地区蔬菜根际的植物寄生线虫进行了广泛调查，从番茄、辣椒、茄子、黄瓜、甘蓝、萝卜、菜豆、豇豆、苦瓜、大白菜、芹菜等的根际采集到126份土壤样品，共分离出了植物寄生线虫15个属25个种和一些待定种，包括清亮矮化线虫(Tylenchorhynchus clarus)、马舒德矮化线虫(T.mashhoodi)、网纹矮化线虫(T.aerolatus)；短小节纹线虫(Merlinius brevidens)、M.communium；落选短体线虫(Pratylenchus neglectus)、六纹短体线虫(P.hexincisus)、斯氏短体线虫(P.scribneri)；柱颈丝尾垫刃线虫(Filenchus cylindricollis)、普通丝尾垫刃线虫(F.vulgaris)、F.ditissimus；燕麦真滑刃线虫(Aphelenchus avenae)、茄真滑刃线虫(A.solani)；双宫螺旋线虫(Helicotylenchus dihystera)、热带螺旋线虫(H.tropitus)；活泼平滑垫刃线虫(Psilenchus hilarulus)；薄叶大节片线虫(Macroposthonia xenoplox)；同型伞香线虫(Boleodorus similis)；根结线虫(Meloidogyne spp.)，剑尾垫刃线虫(Malenchus spp.)，米卡垫刃线虫(Miculenchus spp.)，滑刃线虫(Aphelenchoides spp.)，伞滑刃线虫(Bursaphelenchus spp.)，滑刃线虫(Aphelenchoides spp.)，茎线虫(Ditylenchus spp.)。在这些鉴定出的线虫中，大多数种类在甘肃省都未曾报道过。其中，几种重要的线虫如清亮矮化线虫、马舒德矮化线虫、网纹矮化线虫、短小节纹线虫、落选短体线虫、六纹短体线虫和斯氏短体线虫等发生较为普遍，在许多地区的大多数蔬菜上几乎都有寄生。而兰州市安宁区吊场乡茄子、辣椒上的短小节纹线虫(M. brevidens)群体密度相对较大，并且随时间、寄主营养条件等呈现季节性变化。 用PCR技术从北京顺义甘蓝、番茄；四川简阳莴苣、花生、杂草；广西南宁香蕉；山东莒南烟草；河南洛阳烟草、海南儋州番茄、象耳豆、胡椒、番石榴；安徽桔梗；比利时番茄等15个根结线虫群体中分别扩增出一条rDNA-ITS的片段，大小约770bp。用3种限制性内切酶HaeⅢ、DraⅠ、AluⅠ分别酶切M.incognita群体和M.javanica群体的ITS产物，HaeⅢ酶切后产生约370bp、220bp、180bp片段；DraⅠ和AluⅠ酶切后分别产生约400bp、240bp、130bp和420bp、180bp的RFLP片段，另外还有大小约为770bp、520bp和770bp、600bp的多余片段。用RFLP-PCR技术揭示了由于地理条件、气候、环境等因素造成我国的M.incognita和M.javanica群体跟巴西、意大利的M.incognita和M.javanica群体的rDNA-ITS存在异质性。HaeⅢ不能酶切象耳豆根结线虫(M.enterolobii)的ITS扩增产物，DraⅠ酶切后产生约400bp的片段，AluⅠ酶切后产生约600bp、420bp和180bp的3个片段。这叁种酶切结果还显示，仅靠一种限制性内切酶酶切片段的多态性分析(rDNA-ITS-RFLP)是不能将M.incognita和M.javanica两种根结线虫区分开来的。 MMrtgu4WchgurtfArt 在夏秋高温季节，采用35％威百亩水剂进行土壤熏蒸，用于防治日光温室番茄根结线虫病。施用江苏利民化工有限公司生产的 35％威百亩（Metham sodium）水剂，用药剂量为故／mu、4kg／mu、6kg／mu的条件下，对土壤中番茄根结线虫二龄幼虫的防效可达80．乃％、88．m％、91．57％，番茄增产幅度分另达至5．99％、7．抡％、7．的％；对照药剂沈阳农药厂生产的 3 5％威百亩水剂 4kg／mu用量下对二龄幼虫的防效为80．30％，番茄的增产率为5石6％。药效试验研究表明，威百亩土壤熏蒸剂对秋季日光温室番茄南方根结线虫有较好的控制作用，并且可以增加番茄产量，是值得在生产上大面积推广应用的杀线虫剂。
参考文献：
[1]. 福建省根结线虫食线虫菌物多样性[D]. 肖顺. 福建农林大学. 2003
[2]. 根结线虫的寄生菌物生物多样性[J]. 肖顺, 张绍升. 福建农业大学学报. 2004
[3]. 根结线虫寄生真菌资源与淡紫拟青霉PL89的研究[D]. 肖顺. 福建农林大学. 2006
[4]. 福建省蔬菜根结线虫病病原鉴定与食线虫真菌应用的初步研究[D]. 黄斌锋. 海南大学. 2011
[5]. 陕西省蔬菜根结线虫拮抗真菌的分离与筛选[D]. 张小艳. 西北农林科技大学. 2007
[6]. 杀线虫担子菌的筛选及毛头鬼伞对烟草根结线虫防治的研究[D]. 姜治清. 贵州大学. 2008
[7]. 福建省蔬菜根结线虫卵囊寄生真菌鉴定[J]. 黄斌锋, 陈绵才, 张绍升. 亚热带农业研究. 2011
[8]. 苏云金芽胞杆菌杀线虫菌株的筛选及其活性因子研究[D]. 余洁. 福建农林大学. 2008
[9]. 厚垣轮枝孢菌(Verticillium chlamydosporium)防治植物线虫研究进展[J]. 卢明科, 潘沧桑, 李舟. 西北农林科技大学学报(自然科学版). 2004
[10]. 甘肃省蔬菜根际寄生线虫的种类鉴定、发生分布及根结线虫rDNA-ITS-RFLP及其防治的研究[D]. 赵鸿. 甘肃农业大学. 2003