（湘南学院 湖南郴州 423000）
摘要：目的 探究红曲对改善血吸虫病肝纤维化的实验结果。方法 将40只小鼠随机分为正常对照组、模型组、吡喹酮组、吡喹酮+红曲组，每组各10只。除正常对照组外，其余3组小鼠均经腹部皮肤感染日本血吸虫尾蚴并诱导肝纤维化模型，并在感染42d后分别对正常对照组和模型组进行生理盐水灌胃，而药物组则分别给予相应的药物进行灌胃。再持续治疗42d后，将所有小组的小鼠肝脏取出并观察形态和记录重量，同时光镜下对4组小鼠的肝脏纤维化程度进行分级比较。结果 吡喹酮+红曲组治疗较单纯吡喹酮组治疗肝脏形态学得到了明显改善。正常对照组小鼠的肝、脾指数均显著低于其他3组，差异均具有统计学意义（P<0.05）；此外吡喹酮+红曲组的肝、脾指数与模型组和吡喹酮组相比较，差异均具有统计学意义（P<0.05）。模型组、吡喹酮组、吡喹酮+红曲组的肝纤维化评分与正常对照组相比均显著升高，差异具有统计学意义（P<0.05）；而吡喹酮组、吡喹酮+红曲组的肝纤维化评分虽然两组间比较，无统计学意义（P>0.05）；但均明显低于模型组，差异具有统计学意义（P<0.05）。结论 红曲能够显著改善血吸虫病肝纤维化程度。
关键词：红曲；血吸虫病；肝纤维化
[Abstract] objective to explore the experimental results of hongqu on improving the liver fibrosis of schistosomiasis.Methods 40 mice were randomly divided into normal control group，model group，praziquantel group and praziquantel + hongqu group，10 mice in each group.In addition to the normal control group，the rest three groups of mice after abdominal skin infection with schistosoma japonicum cercaria and induced liver fibrosis model，during 42 d after infection，respectively to the normal control group and model group of physiological saline lavage，and drugs group，respectively give corresponding to fill the stomach.After 42d continuous treatment，the liver of all groups of mice was taken out and the morphology and weight were observed.Meanwhile，the liver fibrosis degree of the four groups of mice was graded under light microscope.Results the liver morphology was improved in the treatment of praziquantel + hongqu group.The liver and spleen indexes of mice in the normal control group were significantly lower than those of the other three groups，and the difference was statistically significant（P<0.05）.In addition，the liver and spleen indexes of the piquaqualone + hongqu group were statistically significant compared with those of the model group and the piquaqualone group（P<0.05）.Compared with the normal control group，the liver fibrosis scores of the model group，the piquaqualone group and the piquaqualone + hongqu group were significantly increased，and the difference was statistically significant（P<0.05）.However，the liver fibrosis score of the piquaqualone group and the piquaqualone + hongqu group was not statistically significant（P>0.05），although the comparison between the two groups was not statistically significant.However，they were significantly lower than the model group，and the difference was statistically significant（P<0.05）.Conclusion hongqu can significantly improve the degree of liver fibrosis in schistosomiasis.
[Key words] hongqu；Schistosomiasis；Liver fibrosis
日本血吸虫病造成的病理损伤主要是沉积在肝脏中的血吸虫虫卵形成的肉芽肿反应以及持续慢性感染引起的组织损伤修复过度，进而形成的肝脏纤维化。控制虫卵肉芽肿及肝纤维化对血吸虫病的防治起关键作用。红曲是指曲霉科真菌红曲霉Monascus purpureus Went.的菌丝体寄生在粳米上而成的红曲米，属于中药的一种，性味甘、温且无毒，具有健脾消食和活血化瘀的效果，并被写入《本草纲目》中。而现代药理研究更是发现红曲内的有效成分之一是具有抗炎和降胆固醇的洛伐他汀，本实验探究红曲对改善血吸虫病肝纤维化的实验结果。
1 材料与方法
1.1实验动物 清洁级昆明小鼠40只，雄性，体质量18~22g，购自湖南斯莱克景达实验动物有限公司，许可证号：SCXK（湘）2013-0004。所有动物研究期间均自由饮水，并喂食统一的标准颗粒饲料，研究期间实验室温度维持在22～25℃，湿度维持在50～60%。阳性钉螺购自湖南省血吸虫病防治研究所。
1.2药品及材料 红曲为北京大学维信公司提供。吡喹酮为武汉合中生化制造有限公司提供。
1.3实验方法 按10只/组的标准将小鼠分为4组，分别为正常对照组、模型组、吡喹酮组、吡喹酮+红曲组。除正常对照组外，其余3组小鼠均经腹部皮肤感染日本血吸虫尾蚴约30条，贴盖玻片于小鼠裸露皮肤上，保持湿润约10min，皮肤可见多处点状出血，表明尾蚴感染成功。正常对照组：未感染血吸虫尾蚴，正常方法饲养12周；实验对照组：感染尾蚴6周以后生理盐水灌胃6周，0.5 mL/（只·d）；吡喹酮组：感染尾蚴6周后用吡喹酮灌胃治疗2 d，剂量为500 mg·kg-1·d-1，0.5 mL/（只·d），之后改为生理盐水，0.5mL/（只·d）；吡喹酮+红曲组：感染尾蚴6周后用吡喹酮灌胃治疗2 d，用法同吡喹酮组，继以红曲灌胃治疗6周，剂量150 mg·kg-1·d-1，0.5 mL/（只·d）。第12周末，禁食16 h，称量体重，颈椎脱臼处死小鼠，称量肝脏、脾脏重量，计算肝脏指数（每克体重的肝脏毫克数），取小鼠肝组织中叶，4%多聚甲醛固定，脱水，包埋，切片，HE染色，封固，光镜下观察肝组织病理变化。
1.4 肝纤维化程度判定标准[3] 通过光镜观察将纤维化程度分为4级：0级，肝细胞正常，视野中几乎无法找寻到纤维化变化，记为1分；1级，在虫卵肉芽肿周围可见胶原纤维包绕，记为2分；2级，虽然小叶间只存在少量纤维，但汇管区可见大量纤维化现象，记为4分；3级，肝小叶间可见明显的纤维组织分布，记为8分。
1.4 统计学处理 应用SPSS19.0版软件对本次研究数据进行统计分析，均数±标准差（±s）表示计量数据，采用t检验，以P<0.05为具有统计学意义。
2结果
2.1各组小鼠肝脏形态的比较 正常对照组的小鼠肝脏表面光滑，颜色红润，质地柔软，边缘锐利且包膜完整，无异常外观表现。模型组小鼠肝脏表面粗糙，且布满米粒样血吸虫虫卵结节，同时肝脏体积明显肿大，包膜紧张且质地较脆。吡喹酮组、吡喹酮+红曲组的小鼠肝脏虽然外观明显不及正常对照组，但相对于模型组，其肝脏形态学得到了明显改善。
2.2各组小鼠肝脏指数的比较 正常对照组小鼠的肝、脾指数均显著低于其他3组，差异均具有统计学意义（P<0.05）；此外吡喹酮+红曲组的肝、脾指数与模型组和吡喹酮组相比较，差异均具有统计学意义（P<0.05）。见表1。
表1 各组小鼠肝脏指数的比较
注，a表示与正常对照组相比较，差异具有统计学意义（P<0.05）；b表示与模型组相比较，差异具有统计学意义（P<0.05）。
3讨论
血吸虫一旦侵袭人畜后，无论是急性期还是慢性期都会对动物的肝脏造成严重影响，尤其是虫卵肉芽肿和肝纤维化，这也是导致宿主发生严重并发症以及造成死亡的最根本原因[4]；方伟[5]等在研究中还指出即便将血吸虫患者进行彻底杀虫，其肝纤维化的发展仍无法抑制。由此可见，临床对于血吸虫病肝纤维化必须坚持长期性治疗。
本研究中通过对小鼠进行相关动物实验后证实，给予红曲进行治疗的小鼠在肝脏形态上较未进行治疗的模型组得到了显著改善，与已知的吡喹酮组的外观形态并无显著差异，而且在表1和表2的结果中也证实了红曲无论是在肝、脾指数还是肝纤维化评分上，其效果均较模型组得到明显改善，这说明红曲治疗对血吸虫感染后的肝脏纤维化具有效果。红曲本身属于天然氧化剂，能够具有保护生物膜结构完整性以及抑制线粒体过氧化的作用，同时还能对免疫系统具有非特异性强化效果，提高抗体的产生以及增强吞噬细胞的吞噬率[6]。
综上所述，红曲能够显著改善血吸虫病肝纤维化发展程度，临床上可根据实际情况进行选择治疗。
基金项目：湖南省教育厅课题资助青年项目（No.11B116）；郴州市科技计划项目（No.CZ2013092）；中南林业科技大学对口支援项目（No.2012XN08）；湘南学院“十二五”重点学科免疫学及湘南学院病理研究所资助。
方会龙，女，副教授，研究方向：抗感染免疫。*王俊杰，通讯作者，男，副教授，研究方向：肝纤维化药物防治。
参考文献
[1] 陈勇.我国流动人口血吸虫病防治进展[J].热带病与寄生虫学，2016，14（2）：116-119.
[2] 张利娟，徐志敏，钱颖骏，等.2015年全国血吸虫病疫情通报[J].中国血吸虫病防治杂志，2016，28（6）：611-617.
[3] 王雅倩.肝脏纤维化程度的超声评估及对纤维化程度的分级价值研究[J].临床合理用药杂志，2017，10（14）：123-124.
[4] 王娴默.血吸虫病导致的肝纤维化血清学检测研究进展[J].检验医学与临床，2017，14（A01）：362-365.
[5] 方伟，王韶华，徐友祥，等.上海市嘉定区2014年晚期血吸虫病患者现况调查[J].上海预防医学，2016，28（6）：388-389.
[6] 苏梦达，关良劲，何燕.红曲复方治疗乙型肝炎肝硬化的疗效观察[J].内蒙古中医药，2017，36（2）：82-84.
论文作者:方会龙 江超 陈福春 黄秀珍 王俊杰
论文发表刊物:《航空军医》2018年10期
论文发表时间:2018/8/15
标签：小鼠论文; 肝脏论文; 血吸虫论文; 红曲论文; 尾蚴论文; 统计学论文; 肝纤维化论文; 《航空军医》2018年10期论文;