1.株洲市食品药品检验所 湖南株洲 412000；2.湖南中医药高等专科学校附属第一医院 湖南株洲 412000
【摘 要】目的：采用高效液相色谱法对右兰索拉唑缓释胶囊中药物含量以及其他物质进行测定。方法：建立高效液相色谱检测法，色谱柱：Dikma C18；流动相：三乙胺-水：乙腈溶液；柱温：30摄氏度；波长285nm，对右兰索拉唑缓释胶囊中的含量以及物质进行测定。结果：20170602、20171108、20170915三个批次样本含量分别为102.7%、100.1%、100.2%，RSD值分别为1.17%、1.04%、1.13%。不同浓度样品平均回收率分别为100.7%、101.7%、100.1%。结论：高效液相色谱法在右兰索拉唑缓释胶囊中的检测准确率非常高，操作简便、重复性好。
【关键词】高效液相色谱；右兰索拉唑缓释胶囊；含量
右兰索拉唑是在兰索拉唑的基础上研究而来，是一种新型质子泵抑制剂，其主要应用在非糜烂性胃管反流病的治疗中[1]。右兰索拉唑缓释胶囊能够持续释放质子泵抑制剂抑制胃酸分泌，持续改善患者反流症状，且患者临床应用安全性非常高[2]。右兰索拉唑缓释胶囊在我国尚未上市，本次研究采用高效液相色谱法对右兰索拉唑缓释胶囊中药物含量以及其他物质进行测定，旨在为右兰索拉唑缓释胶囊的引进、应用提供可参考依据。
1.材料与方法
1.1实验材料
仪器：LC-20AT高效液相色谱仪；电子天平；真空烘干箱；水浴锅；超声仪（SK3200H）；20ml移液管；30ml移液管。
试剂：右兰索拉唑（批号：20170407）；右兰索拉唑缓释胶囊（批号：20170602、20171108、20170915），所有药剂均由协作单位提供。色谱纯：乙腈溶液、三乙胺、磷酸；分析纯为甲醇、乙醇溶液；蒸馏水。
1.2一般方法
1.2.1色谱条件：
色谱柱：Dikma C18；流动相：三乙胺-水：乙腈溶液（比例为1：60：40），流速0.8ml/min；柱温：30摄氏度；波长285nm；进样体积流量：体积流量1.0ml/min。梯度洗脱：0-40min为90%三乙胺-水、10%乙腈溶液；40-50min为20%三乙胺-水、80%乙腈溶液；51-60min为90%三乙胺-水、10%乙腈溶液，体积流量1.0ml/min。
1.2.2样品溶液制备：
取80粒右兰索拉唑缓释胶囊，将所有药物混合后研磨成粉，过筛称重，取24g药物粉末平均分配成6份，精密称重，分别放置在50ml锥形瓶中，精密加入20ml甲醇溶液，在500w、40kHz条件下处理30min，而后精密加入流动相30ml后摇匀，精密量取1ml溶液，精密加入10ml流动相（三乙胺-水-乙腈溶液，比例为1：60：40）摇匀。
1.2.3对照品溶液制备：
精密称取右兰索拉唑25mg，置入锥形瓶中，精密加入20ml甲醇溶液，放入超声仪中，在500w、40kHz条件下处理30min，而后精密加入30ml流动相摇匀，精密量取1ml，精密加入10ml流动相（三乙胺-水-乙腈溶液，比例为1：60：40）稀释，摇匀。
1.2.4阴性对照液：精密称取右兰索拉唑辅料25mg，精密加入20ml甲醇溶液，放入超声仪中，在500w、40kHz条件下处理30min，而后精密加入30ml流动相摇匀，精密量取1ml，精密加入10ml流动相（三乙胺-水-乙腈溶液，比例为1：60：40）稀释，摇匀。
1.2.5线性关系试验：
精密量取对照品溶液0.8、0.9、1.0、1.1、1.2ml放入10ml容量瓶中，加入稀释溶液稀释至10ml，摇匀。而后在1.2.1条件下进行测试，根据测试图谱计算线性回归方程式。右兰索拉唑浓度在36.42-60.17μg/ml浓度下线性关系良好。
1.2.6精密度试验：
按照回收率试验方式制备低、中、高三个浓度的供试品溶液，对三种不同浓度的样品溶液在1.2.1条件下连续进样5次，测定相关成分峰值面积，三个浓度样品溶液精密度RSD值分别为0.9%、1.0%、1.1%，证明仪器精密度良好。
1.2.7稳定性试验：
取同一批号样品溶液，在1.2.1条件下在0h、2h、4h、6h、8h时分别进行一次测试，共进行6次测试，结果样品溶液在8h内稳定。
1.2.8样品含量测定：
精密称重后按照1.2.2方式制备成样品溶液，在1.2.1条件下测定，记录峰值面积，计算样品中各成分含量。
1.2.9回收率试验：取1粒处方量辅料，以处方量80.0%、100.0%、120.0%加入右兰索拉唑对照品，按照1.2.2方式制成样品，而后在1.2.1条件下分析，计算回收率。
2.结果
2.1色谱图：
A为阴性对照溶液图谱、B为对照品溶液图谱、C为样品溶液图谱。右兰索拉唑保留时间为9.3min，辅料对其测定无干扰。
2.2样品含量测定：20170602、20171108、20170915三个批次样品含量分别为102.7%、100.1%、100.2%，RSD值分别为1.17%、1.04%、1.13%。
3.讨论
质子泵抑制剂在酸性条件下不稳定，但其降解产物与右兰索拉唑的紫外线吸收率相同，且在3h内能够保持稳定。因此，其波长的选择要能够保证药物吸收同时保证其不随时间延长而波动[3-4]。在研究过程中发现，对照品溶液、供试品溶液在285nm波长下吸收量最大，而辅料则在此波长下也不会被干扰，因此，波长选择为285nm。
右兰索拉唑不仅在水溶液中的溶解度非常高，在二甲基甲酰胺、乙醇、乙腈溶液中的溶解度也非常高。此外，右兰索拉唑缓释胶囊在上述溶液中的稳定性好，峰型明显，因此数值测量更准确[5]。在提取方面，我们对比了超声和回流提取两种方式，超声提取的操作性更高，效率更高，更有利于提升回收率[6]。
本研究建立的高效液相色谱法检测结果显示，三个批次样本含量分别为102.7%、100.1%、100.2%，不同浓度样品平均回收率分别为100.7%、101.7%、100.1%。此结果证明了本次研究建立的检测方法具有非常高的准确性和可行性，能够对右兰索拉唑缓释胶囊药物含量进行鉴定。
总的来说，高效液相色谱法在右兰索拉唑缓释胶囊中有效成分含量鉴定结果准确、可靠，此种方式操作简单可重复性高，可作为其药物质量检测以及药代动力学提供依据。
参考文献：
[1]张佳琪. 基于液质联用技术的右兰索拉唑生物等效性评价和QO-58lysine在大鼠体内代谢、排泄研究[D].河北医科大学，2017.
[2]陈娟，张坤，杨志强，王杏林，潘凤.右兰索拉唑缓释胶囊溶出度测定方法的研究[J].中国新药杂志，2016，25（23）：2659-2663.
[3]房超，包永初，陈庆华.双相控释制剂的药动学研究及其临床疗效[J].世界临床药物，2011，32（7）：429 -432.
[4]杨艳，谢俊霞，李冰．测定注射用兰索拉哇中兰索拉唑的含量和有关物质[J]．中国药学杂志，2006，41（07）：538-540．
[5]浦锡娟，何峰．HPLC法测定注射用兰索拉唑中主药及有关物质的含量[J].中国药房，2007，18（13）：1013-1014．
[6]方春雪，位鸿，何蕊，等.液相色谱串联质谱临床应用进展[J].长春中医药大学学报，2016，32（2）：405-406.
论文作者:刘水平1,胡雪来2
论文发表刊物:《中国蒙医药》2018年第5期
论文发表时间:2018/7/27
标签：溶液论文; 精密论文; 胶囊论文; 乙胺论文; 样品论文; 含量论文; 条件下论文; 《中国蒙医药》2018年第5期论文;