侯俊民[1]2001年在《紫杉醇对人食管癌细胞作用的体外实验研究》文中指出目 的 （1）观察不同浓度的紫杉醇对食管癌细胞Eca109生长的影响； （2）研究紫杉醇能否阻滞细胞周期及诱导细胞凋亡，并在此基础之上探讨两者之间的关系； （3）通过测定bcl-2、p53、p21~(WAF1/CIP1)在紫杉醇处理前后的变化，探讨紫杉醇治疗食管癌的分子机制。方 法 （1）细胞与细胞培养 人食管癌细胞株Eca109来自北京肿瘤防治研究所，用含10％小牛血清的RPMI1640培养液培养，生长于37℃含5％的CO_2孵箱中，待细胞长至单层后，以0.25％的胰蛋白酶消化贴壁细胞，选用对数生长期细胞用于实验。 （2）细胞增殖抑制实验 采用MTT法，选择对数生长期细胞，调整细胞数为2.5×10~4/ml接种于96孔培养板，每孔200μl，24h后，实验组分别给予终浓度为0，20，40，80，100nmo1/L泰素，同时设立对照。每组的每个浓度设3个复孔，12h、24h、48h后，每孔加入20μl 5mg/ml MTT，孵育4h后弃上清，加入DMSO终止反应。微振荡后，于酶标仪波长570nm处测吸光度（A）。计算抑制率（％）=（1-实验组 A/对照组 A）×100％。由此得出的半数抑制浓度（IC_(50)）作为确定紫杉醇体外实验浓度的依据。 南京医科大学硕士学位论文 门）形态学观察 细胞经不同搬的紫杉醇作用后定时用形罪海 化收集，细胞离。c涂片，乙醇室温固定，Giemsa染色，光彩汐见察．收集的细胞同时按常规进行透射电镜观察、摄片。 N）细胞周期和细胞凋亡率的测定 收集不同贩药物作用的 Eca109细胞，PBS洗躯用 4C的 7ds乙醇固定 12h以上，经离。r去乙醇，加 1％Rnase200 111，37℃水浴 15 r，加 PI染色，用Beet皿 Dickins。公司跳 ChlibUr 型流式细d（抓敝光波长为 48812ill），IRI％ DNA ％f测定兰胞日相（ Gf1，S，GN），位于 Gk前期的亚二倍体峰为‘碉亡峰”，所得酬均经 Lysis＊车大f牛 集、贮存和掀。 u）bCIQ、p53、PZI””‘蛋白在紫杉醇处理椭的表达变化朋免喇删u，另比12加用流式细BI。结 果 门）紫杉醇对细胞生长的影响 不同浓度紫杉醇与Eca109细腆同孵育后，细胞生长受到抑制，并呈剂量酮关系，其妨＊时＊ 为151：lllDI 儿。 K）细月眺态学变化正常情况下；Eca109细雕多角形，贴壁生长。在紫杉酬用下，癌细hsi＆A）t变圆，折光姓减弱，贴壁细BS，．．Mv，少。5删VI 紫杉醇处埋的细胞撇下E小时可贼大小不均，而ltonllnl八紫杉醇处理的细咖台终大小均匀。电镜下经紫杉醇处理的细腑出现细B咙伽固缩、解聚以及凋亡小体；并可见牌处于分驯彬田胞，而对照组细胞生长盼，枫上述改变。 门）细舶期及脱脓 无删氏搬的紫杉醇，跟高浓度的紫杉醇均可将 kal阴刎包阻滞于GN期。寸搬（5删V 1）紫杉醇处理的细胞阻断GN期短暂、不完全；而高浓度（15mVI、二）白紫杉酬树癌细胞白“肋期阻断较低搬的完全、持久，24小时达高峰，且搬愈高梆作用尤为明显。在Gy期阻断作用过去后，流式细胞仪可检测到凋亡峰， 2 南京医科大学硕士学位论文snllDI八的紫杉醇由于其较早越过GW期，12。J、时便可检钡到凋亡峰，15TlllDI八、35nllDI八的紫杉躲药物作用后48，1、时才 倒凋亡峰。 忖）be12、P53、咋l—一‘蛋白的表达变｛b be12、P53蛋白在紫杉醇处理前后无变化；P21”一蛋白在紫杉醇作用后表辅力口。结 论 门）紫杉眺体外肺抑制人食管癌细胞株Eca109增殖的作用，这种作用与剂量、时间呈州B关。 K）紫杉醇不lxM－－arxgude管癌细胞阻滞于 GN期，还啸导其凋亡。姚搬的紫杉贼高搬的更易赃刎 包凋亡，对临床紫杉醇治疗剂量的制定具有一定的树峋。 （3）在ra109细脓中，kIQ、p53蛋白的表滩紫杉醇处理椭并无改变；提示bCI亿、P53可能并不参与紫杉醇腑食管癌细胞凋亡的腑；研究中梆扯1——‘的表达在紫杉郧用后增加，献阅…’有可能参与紫杉醇阻滞细3响期及诱导细胞凋亡，贿关确切栅0仍有敝一步腑。
佚名[2]2004年在《肿瘤药理与化疗》文中指出5-氟尿嘧啶纳米微球抗肿瘤作用的实验研究姜文奇李苏王安训管忠震中山大学肿瘤防治中心内科目的:研究载5-氟尿嘧啶(5-Fluorouracil,5-Fu)的聚乙二醇.聚谷氨酸苄酯PEG-PBLG)纳米微球对口腔鳞癌及结肠癌的体内抗瘤作用。方法采用超透析法制备-FU/PEG-PBLG纳米胶束,透射电镜观察纳米微球的形态,应用5-FU/PEG-PBLG纳米微球治疗口腔鳞癌或结肠癌裸鼠移植瘤,观察移植瘤的生长状态及组织病理学改变。结果5-FU/PEG-PBLG纳米微球为核-壳型结构,大小约230 nm;于对照组比较,
何丽[3]2012年在《多烯紫杉醇对人食管癌细胞的放射增敏作用及其机制的实验研究》文中指出目的：通过观察多烯紫杉醇对人食管癌ECA109和TE-13细胞增殖、细胞周期分布、凋亡率及相关蛋白表达的影响，探讨多烯紫杉醇对人食管癌细胞放射增敏的作用机制，为临床应用提供理论依据。方法：1体外培养人食管癌ECA109和TE-13细胞，采用MTT法测定不同浓度（0、0.1、0.5、1、5、10、50、100nM）多烯紫杉醇作用细胞24h、48h、72h后的增殖情况，绘制细胞生长曲线，筛选出低细胞毒性药物浓度进行后续实验。2采用克隆形成实验检测1nM和0.5nM的多烯紫杉醇对食管癌ECA109和TE-13细胞的放射增敏作用。3将ECA109、TE-13两株细胞分别设为空白对照组、单纯照射组（4Gy照射）、单纯药物组（1nM和0.5nM多烯紫杉醇）、药物加照射组（1nM和0.5nM多烯紫杉醇加4Gy照射），采用流式细胞技术测定不同处理后24h、48h、72h各组细胞周期分布及凋亡率的情况。4采用western blotting技术检测1nM多烯紫杉醇对食管癌ECA109细胞照射后24h，p21、bax、bcl-2蛋白表达的影响。结果：1MTT结果显示：不同浓度多烯紫杉醇（0、0.1、0.5、1、5、10、50、100nM）作用食管癌ECA109和TE-13细胞24h后，与对照组比较，各处理组OD值下降均不明显(P>0.05)；作用细胞48h、72h后，各处理组细胞OD值较对照组均显着下降，差异具有统计学意义（P <0.05），各处理组间比较差异同样具有统计学意义（P<0.05）。根据生长曲线，我们选用48h的IC12.5，即1nM和0.5nM分别作为ECA109和TE-13细胞后续实验药物浓度。2克隆形成实验结果显示食管癌ECA109和TE-13细胞的接种效率分别为82.7%和71.7%；ECA109及TE-13细胞的D0值和SF2值分别为3.00Gy和0.95、2.41Gy和0.93。ECA109的多烯紫杉醇（1nM）联合照射组D_0值和SF2值分别为2.54Gy和0.88，TE-13的多烯紫杉醇（0.5nM）联合照射组D0值和SF2值分别2.31Gy和0.90。3流式细胞技术检测细胞周期结果显示：正常情况下大部分细胞处于G_0/G_1期，其次是S期，G2/M期比例最少。给予ECA109和TE-13细胞单纯药物、单纯照射、药物加照射处理后12h、24h、48h均引起细胞G2/M期比例的增加和G0/G1期比例的下降。单纯药物作用细胞后，G2/M期比例的增加和G0/G1期比例的下降较早，并于12h时变化最明显，而后逐渐恢复，至48h与空白对照组未见明显差别（P>0.05）；4Gy照射细胞后，细胞也表现为G2/M期比例的增加和G0/G1期比例的下降，但较单纯药物组变化较晚，且恢复也较慢，48h时仍未恢复至正常（P<0.05）；12h、24h、48h时，药物加照射组的G0/G1期比例较单纯药物组和单纯照射组显着下降（P<0.05），G_2/M期比例则较单纯药物组和单纯照射组显着增加（P<0.05）。12h、24h、48h时S期细胞比例变化趋势不明显。细胞凋亡结果显示：给予ECA109细胞单纯药物、单纯照射、药物加照射处理后12h，各处理组凋亡指数均未见明显变化（P>0.05），观察至24h、48h，与空白对照组比较，单纯照射组仍未见明显差别（P>0.05），单纯药物组和药物加照射组的凋亡指数明显增加(P＜0.05)，且药物加照射组高于单纯药物组(P＜0.05)；给予TE-13细胞单纯药物、单纯照射、药物加照射处理后12h、24h、48h，与空白对照组比较，单纯照射组凋亡指数在各时间点均未见明显变化（P>0.05），单纯药物组和药物加照射组的凋亡指数在各时间点均明显增加，差异具有统计学意义(P＜0.05)；且药物加照射组显着高于单纯药物组(P＜0.05)。4western blotting技术检测多烯紫杉醇(1nM）对4Gy照射食管癌ECA109细胞24h后结果显示：单纯照射组、单纯药物组和药物加照射组p21蛋白表达水平均高于空白对照组，且差别具有统计学意义（P<0.05），药物加照射组的表达量高于单纯药物组和单纯照射组（P<0.05），单纯药物组与单纯照射组之间p21的蛋白表达量未见明显统计学差异（P>0.05）；单纯照射组、单纯药物组和药物加照射组的bax蛋白表达水平均高于空白对照组，且差别具有统计学意义（P<0.05），药物加照射组显着高于单纯药物组和单纯照射组（P<0.05），单纯药物组高于单纯照射组（P<0.05）；单纯照射组、单纯药物组和药物加照射组的bcl-2蛋白表达水平显着降低，与空白对照组比较，具有统计学意义（P<0.05），各处理组间bcl-2蛋白表达未见明显差异（P>0.05）；与空白对照组比较，单纯照射组、单纯药物组和药物加照射组的bcl-2/bax比值均显着下降，差别具有统计学意义（P<0.05），药物加照射组低于单纯药物组和单纯照射组（P<0.05），单纯药物组低于单纯照射组（P<0.05）。结论：1多烯紫杉醇对食管癌ECA109和TE-13细胞有明显的增殖抑制作用，且呈时间-剂量依赖效应。2多烯紫杉醇能明显增加食管癌ECA109和TE-13细胞的放射敏感性。3多烯紫杉醇可能通过p21、bax、bcl-2等相关蛋白调节细胞周期时相分布和细胞凋亡而影响细胞放射敏感性。
裴迎新[4]2007年在《苹果提取物与叶黄素对食管癌细胞的抗癌活性及标志物筛选》文中指出背景和目的食管癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一。对食管癌和其它癌症寻求预防和治疗途径，减少癌症对人类健康的威胁是一项重要的工作。植物化学物为植物性食品中天然存在、含量较少的一类具有抗氧化、抗癌、减少脂质过氧化和降低胆固醇等生理活性的化学物质。寻找植物中抗癌成份进行食管癌的预防及治疗具有十分重要的意义。流行病学研究表明蔬菜水果的消费与降低心血管疾病以及某些癌症的危险有关。水果和蔬菜中的植物化学物尤其是酚类作为主要的生物活性物质，在对健康的保护方面起着重要作用。类黄酮属于多酚类化合物家族，广泛存在于水果、蔬菜、茶叶等各类植物之中，具有较强的抗氧化、抗过敏、消炎、抑菌、抑制肿瘤生长等作用。近年来一些调查结果表明，人类每天从膳食中摄入相当数量的类黄酮，其摄入量甚至超过了一些微量营养素。苹果中富含植物化学物如类黄酮及多酚类，实验室研究显示苹果提取物具有很强的抗氧化活性，可以减少脂质过氧化，降低胆固醇以及抑制结肠癌、乳腺癌等肿瘤细胞的生长，动物实验研究表明苹果提取物可以预防乳腺肿瘤的发生。虽然流行病学研究结果提示苹果的消费与降低肿瘤的危险性有关，一些体外和动物体内实验结果表明苹果提取物对某些肿瘤具有抑制作用，但对其复杂多样的作用机制还不甚了解，需进行深入的研究加以阐明。叶黄素(lutein)属于类胡萝卜素，流行病学研究表明，在预防视黄斑退化、肿瘤的发生与发展、心血管疾病和增强机体免疫力等方面有着广泛的生物学活性。水果蔬菜中天然存在的植物化合物的联合作用在抗氧化以及肿瘤预防方面至关重要。通过苹果中类黄酮物质含量的检测以及探讨苹果提取物和叶黄素抗肿瘤细胞增殖、诱导凋亡，以及作用于肿瘤细胞后在基因和蛋白水平发生的变化，对于揭示水果蔬菜预防肿瘤的作用机制以及开发研制复合型保健品具有重要的理论和实际意义。由于食管癌是严重危害人体健康的恶性肿瘤，寻找对其干预和治疗的措施非常重要。流行病学研究表明蔬菜和水果的消费与肿瘤发病呈负相关，但其作用机制尚未阐明。苹果中含有丰富的类黄酮，为了解苹果中类黄酮的含量水平、苹果提取物和叶黄素的抗肿瘤效应以及作用机制，以期为食管癌的膳食预防和肿瘤的辅助治疗提供参考。本课题选用苹果提取物和叶黄素作为处理因素，利用食管癌细胞建造体外模型，采用MTT法、流式细胞仪、免疫组织化学、western blot、DDRT-PCR和蛋白质组学等技术，从苹果提取物含量化学分析入手，以细胞增殖和凋亡事件为切入点，对细胞周期，凋亡诱导，差异基因乃至差异蛋白表达情况进行系统的研究，对苹果提取物和叶黄素抗食管癌作用及其机制进行深入探讨，同时筛选其作用的靶分子，为食管癌的预防及低毒抗癌药物的研制提供理论依据。方法全文共分五个部分，主要研究方法及内容如下：第一部分苹果提取物的制备和检测。采用溶剂提取法从苹果样本中提取可溶性黄酮类物质制备苹果提取物，铝离子显色法检测其中的总黄酮含量。第二部分苹果提取物与叶黄素对食管癌细胞周期和分化的影响。用不同浓度的苹果提取物和叶黄素处理EC9706细胞，采用MTT法，观察对细胞增殖抑制的影响。流式细胞术检测细胞周期分布，免疫组织化学的方法检测周期调节蛋白cyclin D1表达情况。第叁部分苹果提取物与叶黄素对食管癌细胞凋亡的影响。用不同浓度的苹果提取物和叶黄素处理EC9706细胞，采用流式细胞术和原位细胞凋亡检测技术，观察对细胞凋亡的影响，免疫组织化学方法和Western印迹杂交技术检测凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达情况。第四部分苹果提取物对食管癌细胞作用的差异基因表达。采用荧光标记mRNA差异显示技术(DDRT-PCR)对处理组和对照组差异基因表达谱进行比较，筛选差异表达基因并进行克隆与测序鉴定。以探讨苹果提取物对食管癌细胞作用后基因水平的分子变化。第五部分蛋白质组学方法筛选标志物。以苹果提取物作用于体外培养的人食管癌EC9706细胞为模型，采用双向凝胶电泳和质谱技术筛选作用后在食管癌细胞中表达的差异蛋白质，旨在为阐明苹果提取物对食管癌细胞的作用及其抗癌的分子机制，以及为进一步探讨肿瘤治疗标志物提供依据。结果1．对9种新鲜水果提取物总黄酮检测表明，总黄酮的含量范围为40.11mg／100g～122.88mg／100g。由高到低依次为：红富士苹果、沙梨、黄金梨、香梨、丰水梨、红橙、砀山梨、水晶梨和猕猴桃。2．在体外实验条件下苹果提取物和叶黄素均显示出抑制食管癌EC9706细胞增殖的作用。苹果提取物通过抑制细胞DNA合成，降低了细胞周期中S期百分率，使细胞停滞于G_2／M期，叶黄素则使细胞停滞于G_0／G_1期，并抑制了Cyclin D1的表达。叶黄素作用后使食管癌增殖型细胞减少，分化型细胞增多，诱导了良性分化。3．苹果提取物和叶黄素均可诱导EC9706细胞凋亡，同步分析凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达结果显示，苹果提取物和叶黄素可下调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达及上调促凋亡蛋白Bax的表达。4．采用DDRT-PCR技术对苹果提取物作用于食管癌细胞后的差异表达基因进行检测，获得了差异表达指纹图谱，经克隆和测序获得了差异表达片段的基因序列。这些差异表达的基因序列主要涉及SET结构域和PDZ结构域、细胞周期生长调节、参与细胞有丝分裂的肿瘤蛋白D52以及与肿瘤发生有关的甲硫氨酸腺苷基转移酶Ⅱ。5．采用蛋白质组学技术检测苹果提取物作用后的差异表达蛋白，获得了差异表达蛋白的双向凝胶电泳图谱，用基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱(MOLDI-TOF-MS)鉴定了18个差异蛋白的肽指纹图谱，经数据库检索匹配，筛选出了一些相关蛋白，分析发现这些蛋白功能涉及细胞代谢、信号转导、细胞骨架组成、氧化应激、免疫、细胞增殖和凋亡以及分子伴侣等方面。这些生物标志物主要有：微管去稳蛋白、微管蛋白伴侣分子、蛋白激酶C抑制剂、泛素、HMG B1、异质性核内核糖核蛋白、微管蛋白分子伴侣和醛缩酶A。结论1．所检测的9种水果中均存在黄酮类化合物，但在不同种类的水果中差别较明显。与其它水果相比苹果总黄酮含量较高，是膳食黄酮类化合物的重要来源。2．苹果提取物和叶黄素在一定浓度范围内均可抑制食管癌EC9706细胞增殖，表明具有抗癌作用。干扰食管癌细胞周期，降低分裂期细胞可能是其抗癌机制之一。对细胞周期关键蛋白Cyclin D1表达水平的检测表明，经叶黄素作用后，其表达水平降低，揭示叶黄素通过调节Cyclin D1表达，调控细胞周期的进程，进而使食管癌EC9706细胞阻滞于G_0／G_1期，可能是叶黄素抑制食管癌细胞增殖的另一重要机制。叶黄素还具有促进细胞分化潜能，有助于延缓细胞生长，降低恶性程度。3．苹果提取物和叶黄素抑制EC9706细胞增殖的作用伴随着对凋亡的诱导和细胞循环周期的阻滞，研究结果提示苹果提取物和叶黄素通过介导Bax和Bcl-2的表达诱导细胞凋亡过程的发生，是其诱导食管癌细胞凋亡的分子机制之一。4．DDRT-PCR分析表明，差异表达的基因序列主要涉及SET结构域、PDZ结构域，揭示了苹果提取物在基因水平上的影响涉及到跨膜受体或离子通道蛋白，与细胞内信号调节以及蛋白质间相互作用有关的结构域。进而可影响到蛋白质定位、信号转导和蛋白复合体的组装等方面。从基因水平进一步深入探讨了苹果提取物的抗癌作用机制。研究中发现苹果提取物作用后，可使食管癌EC9706细胞周期停滞于G_2／M期，抑制细胞增殖，这种抑制作用机制可能与D52表达下调介导的抑制细胞有丝分裂有一定的联系。苹果提取物还可能通过抑制与细胞的生长、去分化和癌症有关的甲硫氨酸腺苷基转移酶Ⅱ的表达发挥抗肿瘤作用。5．经苹果提取物作用后，与细胞代谢、信号转导、细胞骨架组成、氧化应激、免疫、细胞增殖和凋亡以及分子伴侣有关的多种蛋白表达水平发生了变化。提示苹果提取物可作用于细胞代谢、信号转导、氧化应激等多种途径。鉴定的蛋白质可以作为苹果提取物作用的生物标志物，同时有可能成为临床上治疗食管癌药物作用的靶分子。苹果提取物调节微管去稳蛋白和微管蛋白伴侣分子表达，可影响细胞有丝分裂阻止肿瘤细胞生长；苹果提取物上调蛋白激酶C抑制剂，提示PKCI途径可能是苹果提取物发挥抗肿瘤作用的机制之一；对肿瘤细胞的作用与抑制泛素-蛋白酶体途径，去泛素化作用有关，潜在的机制可能涉及泛素-蛋白酶体途径介导的IKB降解，进而阻断NF-κB的活化，影响细胞内的信号传导过程；苹果提取物的抗氧化，预防氧化应激损伤与HMC蛋白有关，其抗氧化、抗炎的机制可能是通过HMC介导的；苹果提取物与蛋白质酪氨酸激酶抑制剂染料木黄酮作用相同的是，可下调异质性核内核糖核蛋白和上调微管去稳蛋白，表明这两种蛋白是它们作用的共同靶分子，提示苹果提取物可能具有酪氨酸激酶抑制剂作用；苹果提取物下调微管蛋白分子伴侣，这一作用类似抗肿瘤药物紫杉醇，微管蛋白分子伴侣是其作用的靶分子。苹果提取物可抑制醛缩酶A表达，醛缩酶A是肝癌诊断的标志物，也是药物作用的靶分子。提示苹果提取物在作用和途径上与某些抗肿瘤药物类似。6．综合研究结果表明苹果提取物和叶黄素作用后导致的细胞生长抑制、诱导凋亡与基因和蛋白表达的改变之间有着潜在的联系。由于苹果提取物中黄酮类化学物的综合作用，调节了多种基因和蛋白的表达，进而经由细胞代谢、信号通路、氧化应激、免疫调节等多途径，最终导致肿瘤细胞增殖的抑制和促进凋亡而发挥抗癌作用。
李赛赛[5]2018年在《Lapatinib联合紫杉醇对食管癌的抗肿瘤活性及作用机制研究》文中进行了进一步梳理背景在晚期食管癌患者中,化疗药物紫杉醇的应用取得了良好的临床疗效,但随着用药时间的延长,毒副作用及耐药的出现限制了紫杉醇的使用。目前,化疗药物与靶向药物的联合使用在许多肿瘤中都有研究,并呈现出协同抗肿瘤活性。本文旨在研究小分子酪氨酸激酶抑制剂lapatinib与化疗药物紫杉醇的联合使用对食管癌细胞体内外抗肿瘤活性及作用机制。目的检测lapatinib联合紫杉醇对食管癌的抗肿瘤活性及作用机制。方法1.Western blot技术检测人正常食管上皮细胞及食管癌KYSE150、KYSE450、KYSE510及TE-7细胞系中EGFR、HER2蛋白的表达情况。2.MTT实验检测lapatinib、紫杉醇单独及联合使用对食管癌细胞的体外增殖抑制活性,并计算lapatinib、紫杉醇联合作用指数(CI值)。3.细胞划痕实验和transwell实验检测lapatinib、紫杉醇单独及二者联合使用对食管癌细胞迁移及侵袭能力的影响。4.Annexin V-FITC和PI双染法结合流式细胞术检测lapatinib、紫杉醇单独及联合使用对食管癌细胞凋亡的影响。5.Western blot技术检测lapatinib、紫杉醇单独及联合使用对EGFR和HER2的磷酸化及其介导的下游两条主要信号通路(Ras-MAPK和PI3K/AKT)活化的影响。6.采用人食管癌裸鼠移植瘤模型检测lapatinib、紫杉醇单独及联合使用的体内抗肿瘤活性,并进行比较。结果1.四种不同的食管癌细胞系(KYSE150、KYSE510、KYSE450和TE-7)在体外对lapatinib的敏感性相似,IC_(50)值分别为:4.39μmol/L、4.09μmol/L、4.25μmol/L和4.57μmol/L,且食管癌细胞对lapatinib的敏感程度与细胞表面EGFR和HER2受体的表达水平之间无相关性。紫杉醇单独处理组中,TE-7细胞与其它叁个细胞系相比对其敏感度较低,其对四种食管癌细胞的IC_(50)值分别为:12.56 ng/ml、14.03 ng/ml、15.46 ng/ml和43.56 ng/ml。Lapatinib与紫杉醇联合处理(lapatinib与紫杉醇浓度比为100:1)显示出更为显着的增殖抑制活性。采用中效作用原理对两药联合作用指数(CI值)进行了计算,结果显示除了KYSE150细胞在高浓度药物下(lapatinib:5μmol/L,紫杉醇40 ng/ml)表现出拮抗效应以外(CI>1),lapatinib和紫杉醇的联合使用在其他叁种食管癌细胞系均呈现出协同效应(CI<1)。2.细胞划痕实验和未包被matrigel的transwell实验结果显示,lapatinib(5μmol/L)、紫杉醇(5 ng/ml)单独处理对食管癌细胞的迁移有较弱的抑制作用,而联合药物处理则显着抑制食管癌细胞KYSE150和TE-7的迁移(P<0.05,vs对照组),且迁移抑制作用显着高于任何一个单独药物处理组(P<0.05)。3.侵袭实验结果显示,联合药物处理组中穿过matrigel的细胞数目显着少于对照组和lapatinib、紫杉醇单独处理组(P<0.001),表明lapatinib和紫杉醇联合使用可显着抑制食管癌细胞的侵袭。4.Annexin V-FITC/PI双染实验结果显示,在四种食管癌细胞系中,lapatinib联合紫杉醇诱导食管癌细胞的凋亡率均显着高于任何一个单独药物处理组,且差异具有统计学意义。此外,在联合药物处理组中cleaved-PARP蛋白的表达水平与对照组相比,表达水平显着升高。5.Western blot实验结果显示,紫杉醇在5 ng/ml的浓度下单独使用对EGFR和HER2的磷酸化水平及下游的MAPK和AKT信号通路的活化没有影响;Lapatinib(5μmol/L)单独使用可抑制磷酸化EGFR,HER2的表达水平和下游的信号传导,但两者联合使用时对EGFR和HER2及下游信号分子(ERK和AKT)的磷酸化发挥更显着的抑制作用。Lapatinib和紫杉醇单独及联合使用对EGFR、HER2及下游的ERK、AKT、p38MAPK等信号分子的总蛋白水平没有影响。6.Lapatinib在100 mg/kg剂量下连续灌胃给药24天,紫杉醇在7.5 mg/kg的剂量下以腹腔注射方式每周给药1次,共给药4次,二者单独使用时对人食管鳞癌KYSE450移植瘤具有显着的生长抑制作用(抑瘤率分别为46.3%和40.6%,且与对照组相比具有显着性差异);而联合药物处理组对移植瘤的抑制作用更加显着(抑瘤率为64.3%),与药物单独处理组相比具有统计学差异(P<0.001)。结论1.Lapatinib联合紫杉醇在体外和体内对食管癌细胞均表现出协同抗肿瘤效应。2.Lapatinib联合紫杉醇所发挥协同抗肿瘤活性的机制可能与其抑制细胞增殖、侵袭迁移、诱导细胞凋亡以及抑制EGFR/HER2及其介导的信号通路的活化有关。
卢红, 王建军, 周芳, 程传耀[6]2014年在《吉非替尼联合紫杉醇对食管癌细胞体内外生长抑制实验研究》文中进行了进一步梳理目的:探讨吉非替尼联合紫杉醇对人食管癌细胞株Eca-109在体内外生长的影响及其可能机制。方法:按两因素析因设计试验,并应用MTT法观察单用吉非替尼、紫杉醇及联合应用对Eca-109细胞增殖的抑制作用,流式细胞术检测细胞周期和凋亡。按单因素影响设计,建立裸鼠人食管癌皮下移植瘤模型,并分为4组各10只,分别为对照组、紫杉醇组、吉非替尼组及吉非替尼+紫杉醇联合组。经过不同处理4周后,切除瘤灶,称瘤质量,计算抑瘤率。结果:MTT法结果显示,药物干预72h后,各用药组与对照组比较,吸光度A值均减小,吉非替尼作用72h的半数抑制浓度为(1.72±0.27)μmol/L,紫杉醇的半数抑制浓度为(5.27±0.88)μmol/L。流式细胞术检测结果显示,4组G0/G1、S和G2/M期细胞比较差异均有统计学意义,P<0.05;对照组Eca-109细胞的凋亡率为(9.69±1.42)%,紫杉醇组为(12.41±2.75)%,吉非替尼组为(22.0±4.26)%,吉非替尼+紫杉醇联合组为(33.1±3.78)%,差异有统计学意义,P<0.001。对照组肿瘤体积为(1.56±0.16)cm3,紫杉醇组为(0.81±0.15)cm3,吉非替尼组为(1.35±0.08)cm3,紫杉醇+吉非替尼联合组为(0.54±0.11)cm3,差异有统计学意义,P<0.05。结论:吉非替尼与紫杉醇合用对体内外食管癌Eca-109细胞具有显着的抑制作用,且强于药物单一作用。
唐兴[7]2012年在《~(18)F-FDG评价食管癌Eca109细胞放化疗疗效的体外实验研究》文中研究表明第一部分~(18)F-FDG评价5-FU对食管癌Eca109细胞生长抑制作用的体外实验研究目的：建立~(18)F-FDG与食管癌Eca109细胞结合实验的方法学；探索~(18)F-FDG细胞结合实验早期评价5-FU对食管癌Eca109细胞生长抑制作用的可行性。方法：以人食管鳞癌Eca109细胞为实验对象，依据预实验结果依次更改实验条件：(1)细胞浓度，(2)反应时间，(3)~(18)F-FDG放射性活度，(4)葡萄糖浓度，进行18F-FDG细胞结合率测定；通过~(18)F-FDG细胞结合试验及细胞增殖、细胞毒性检测试剂CCK-8测定5-FU对Eca109细胞生长抑制作用；应用透射电子显微镜观察细胞凋亡形态学变化；同时应用流式细胞技术检测5-FU对Eca109细胞凋亡及周期的影响。结果：(1)~(18)F-FDG与食管癌Eca109细胞结合实验基本条件：细胞数量为1×106/瓶，~(18)F-FDG放射性活度3.7KBq，反应时间100min，葡萄糖浓度0mol/L，细胞结合率为(40.63±0.76)%。(2)加入浓度125、250、500和1000μg/ml5-FU1mL作用24h后，~(18)F-FDG细胞结合抑制率分别为(32.2±3.3)%、(43.15±2.33)%、(51.61±1.88)%、(71.97±2.09)%，各组间差异有统计学意义（P<0.05）。细胞结合抑制率随药物剂量增加而增加，两者呈正相关（r=0.97,P<0.01）。相同浓度5-FU作用24h后，CCK-8抑制率与细胞结合抑制率呈正相关(r=0.844，P<0.01）。以上浓度药物作用48h后，~(18)F-FDG细胞结合抑制率分别为(68.14±0.85)%、(76.18±0.92)%、(79.36±0.83)%、(88.97±0.25)%，各组间差异有统计学意义（P<0.05）。细胞结合抑制率随药物剂量增加而增加，两者呈正相关（r=0.969,P<0.01）。相同浓度5-FU作用48h后，CCK-8抑制率与细胞结合抑制率呈正相关(r=0.831，P<0.01）。(3)透射电子显微镜可见典型细胞凋亡及坏死形态学变化。(4)流式细胞技术检测发现0、125、500、1000μg/mL5-FU作用Eca109细胞48h后，其凋亡率（早期凋亡和晚期凋亡之和）分别为(2.2±0.32)%、(8.6±0.39)%、(14.6±1.61)%、(29.7±2.27)%，各组间差异有统计学意义（P<0.05)。500、1000μg/mL5-FU作用48h后可检测到G0/G1前期的亚二倍体峰为“凋亡峰”。随着5-FU浓度增高，G0/G1期的细胞比例升高，G2/M期、S期细胞比例则明显降低（P<0.05）。结论：5-FU对食管癌Eca109细胞体外生长有抑制作用；~(18)F-FDG细胞结合抑制率、CCK-8细胞生长抑制率、流式细胞技术检测细胞凋亡率，都可用于评价5-FU作用24h、48h后对食管癌Eca109细胞的生长抑制作用。第二部分~(18)F-FDG评价放疗对食管癌Eca109细胞生长抑制作用的体外实验研究目的：探索~(18)F-FDG细胞结合实验早期评价放疗对食管癌Eca109细胞生长抑制作用的可行性。方法：以人食管癌Eca109细胞为实验对象，通过~(18)F-FDG细胞结合实验和细胞增殖、细胞毒性检测试剂CCK-8测定不同放射剂量(分别为2、4、6、8Gy)对Eca109细胞生长抑制作用；应用透射电子显微镜观察细胞凋亡形态学变化；同时应用流式细胞技术检测放疗对Eca109细胞凋亡及周期的影响。结果：(1)不同放射剂量(分别为2、4、6、8Gy)作用Eca109细胞24h后，18F-FDG细胞结合抑制率分别为(-6.16±2.92)%、(8.33±3.88)%、(15.73±2.71)%、(22.6±3.46)%，各组间差异有统计学意义（P<0.05）。细胞结合抑制率随放射剂量增加而增加，两者呈正相关（r=0.786,P<0.01）。以上放射剂量作用48h后，细胞结合抑制率分别为(31.04±3.29)%、(45.13±3.12)%、(51.47±1.36)%、(57.24±2.68)%，各组间差异有统计学意义（P<0.05）。细胞结合抑制率随放射剂量增加而增加，两者呈正相关（r=0.964,P<0.01）。相同放射剂量作用48h后，CCK-8抑制率与细胞结合抑制率呈正相关(r=0.736，P<0.01）。(2)透射电子显微镜可见典型细胞凋亡及坏死形态学变化。(4)流式细胞技术检测发现0Gy，2Gy，4Gy，8Gy组放射线作用Eca109细胞48h后，其凋亡率（早期凋亡和晚期凋亡之和）分别为(2.5±0.39)%、(9.5±1.56)%、(16.8±2.39)%、(22.3±1.87)%。各组凋亡率比较，差异有统计学意义（P<0.05)。8Gy组作用48h后可检测到G0/G1前期的亚二倍体峰为“凋亡峰”。随着放射剂量增加，G0/G1期和S期细胞比例降低，G2/M期比例则明显升高（P<0.05）。结论：放疗对食管癌Eca109细胞体外生长有抑制作用；~(18)F-FDG细胞结合抑制率、CCK-8细胞生长抑制率、流式细胞技术检测细胞凋亡率，都可用于评价放疗作用24h、48h后对食管癌Eca109细胞的生长抑制作用。
王坚[8]2016年在《沙利度胺治疗食管癌的基础和临床研究》文中研究指明第一部分沙利度胺联合照射对人食管癌荷瘤鼠皮下移植瘤血管生成影响的研究目的:观察沙利度胺或(和)照射对人食管癌裸鼠移植瘤血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达以及血管生成的影响。方法:将32只人食管鳞癌移植瘤荷瘤裸鼠随机分为4组:对照组、沙利度胺组、照射组、照射+沙利度胺组,每组8只。照射组和照射+沙利度胺组荷瘤鼠肿瘤予6Me V电子线照射,照射剂量为20Gy/10f/12d,每周5次。沙利度胺组和照射+沙利度胺组每天胃灌注沙利度胺溶液一次(200mg/kg/d),连续12天。隔天对荷瘤鼠称重并测量肿瘤体积。照射后13天处死荷瘤鼠并计算肿瘤抑制率,用免疫组织化学法检测移植瘤瘤组织VEGF和微血管密度(MVD)的表达水平。结果:实验过程中,对照组和沙利度胺组瘤体体积逐步增长,对照组增长速度较快,照射组和照射+沙利度胺组瘤体体积先增长后缩小,照射+沙利度胺组缩小最显着。各组荷瘤鼠瘤体重量比较,差异有统计学意义(P<0.05);照射+沙利度胺组抑瘤率最高,高达66.96%。沙利度胺的放射增敏比(SER)为1.56。析因分析显示,沙利度胺与照射对降低荷瘤鼠瘤体重量具有明显的协同作用(F照射×沙利度胺=4.266,P=0.048)。与照射组相比较,照射+沙利度胺组中裸鼠移植瘤组织中VEGF蛋白表达有所降低(P<0.05);照射组MVD值高于照射+沙利度胺组(P<0.05)。结论:沙利度胺联合照射可提高射线对人食管癌裸鼠移植瘤的杀伤作用;沙利度胺可降低放疗后瘤体内VEGF的表达、降低瘤体内微血管密度。第二部分食管癌放疗或放化疗中肿瘤病理反应和血清血管内皮生长因子变化对预后的影响目的:分析非手术食管癌患者放疗或放化疗过程中肿瘤组织病理反应和血清血管内皮生长因子(VEGF)的变化及其对预后的影响。方法:对89例经病理证实的食管癌患者进行放疗,其中同步放化疗65例,单纯放疗24例;放疗方案:叁维适形或调强放疗;化疗方案:脂质体紫杉醇+顺铂,同步化疗2周期,巩固化疗2周期。放疗第4周行胃镜检查,并取病理活检,病理反应根据放疗后肿瘤组织病理学特点分为轻度、中度、重度反应。在放疗前、放疗第4周、放疗结束后1周测定患者血清VEGF水平。另采集30例健康体检者血清作为对照组。结果:全组患者完全缓解(CR)率和部分缓解(PR)率分别为56.2%和40.4%,总有效率96.6%。全组1、2、3年生存(OS)率分别为70.8%、49.4%、33.3%,1、2、3年无进展生存(PFS)率分别为61.8%、35.3%、28.2%,1、2、3年局部控制(LC)率分别为76.9%、59.7%、50.0%。轻度病理反应组1、2、3年OS率均低于重度反应组(P均<0.05);轻度病理反应组1、2、3年PFS率均低于中、重度反应组(P均<0.05);轻度病理反应组1、2、3年LC率均低于中、重度反应组(P均<0.05)。血清VEGF水平增高组1、2、3年OS率均低于降低组(P均<0.05);增高组3年PFS率低于降低组(P<0.05)。病理反应与放疗前血清VEGF水平、VEGF变化均无相关关系(P均>0.05)。重度反应组放疗中、放疗后血清VEGF水平较放疗前下降,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素分析显示,TNM分期、VEGF变化是影响食管癌患者OS的独立因素(P均<0.05)。结论:放疗或放化疗过程中肿瘤组织病理反应和血清VEGF变化可预测非手术食管癌的疗效,监测治疗中肿瘤组织病理反应和VEGF变化对指导临床个体化治疗有重要意义。第叁部分食管癌放疗或放化疗中血清血管内皮生长因子变化规律及检测时机的研究目的:观察食管癌患者放疗或放化疗过程中血清血管内皮生长因子(VEGF)的变化,探寻放疗或放化疗中血清VEGF变化规律以及其最佳检测时机。方法:76例食管癌患者行根治性放疗,其中53例行同期化疗,单纯放疗23例;放疗方案:叁维适形或调强放疗;化疗方案:脂质体紫杉醇+顺铂,同步化疗2周期,巩固化疗2周期。放疗前、放疗中每周、放疗后1周内连续采集患者血清并测定VEGF水平。另采集30例健康体检者血清作为对照组。结果:食管癌患者不同时间点检测的血清VEGF水平均高于健康对照组(79.6±39.2)ng/L,差异均有统计学意义(t=2.165~3.896,P均<0.05)。随着放疗进行,患者血清VEGF水平总体呈逐渐降低趋势(F=6.806,P=0.001)。放疗中血清VEGF水平跟放疗前比较,21例患者血清VEGF增高,增高时间大多在放疗第2、3周或放疗后1周内。结论:放疗第2、3周和放疗后1周内可能是筛选血清VEGF增高食管癌患者的较好时间窗,此时检测对指导临床个体化治疗有重要意义。第四部分沙利度胺联合放化疗治疗食管癌随机对照研究目的:评价沙利度胺联合放化疗治疗食管癌的安全性及疗效。方法:对食管鳞癌患者进行根治性放化疗。放疗方案:叁维适形或调强放疗;化疗方案:脂质体紫杉醇+顺铂,同步化疗2周期,巩固化疗2周期。放疗前、放疗第2~4周、放疗结束后1周内测定患者血清VEGF水平。将血清VEGF水平增高的患者随机分为两组:试验组31例、对照组30例。试验组给予沙利度胺+放化疗,对照组行常规放化疗。结果:沙利度胺不良反应主要表现为不同程度嗜睡。全组患者完全缓解(CR)率和部分缓解(PR)率分别为68.9%和24.6%,总有效率为93.5%。51例患者完成治疗且随访资料齐全,其中试验组26例,对照组25例。全组1、2、3年生存(OS)率分别为70.6%、34.1%、22.5%;1、2、3年无进展生存(PFS)率分别为56.9%、29.5%、22.0%;1、2、3年局部控制(LC)率分别为81.0%、59.1%、52.6%。局部晚期患者(Ⅱ、Ⅲ期)分层分析显示,试验组患者3年OS率、3年PFS率、3年LC率均高于对照组,差异均有统计学意义(P均<0.05);两组局部晚期患者PFS曲线比较,差异有统计学意义(P<0.05)。放疗后与放疗中血清VEGF水平比较,试验组和对照组降低、稳定、增高的病例数分别为14、14、2例和6、18、6例,差异有统计学意义(P<0.05)。试验组放疗后血清VEGF降低患者1年OS率、1年PFS率和1、2、3年LC率均高于血清VEGF增高患者(P均<0.05)。多因素分析显示:TNM分期是影响患者生存期的因素,TNM分期和放疗后是否有肿瘤残存是影响患者无进展生存期的因素。结论:沙利度胺可改善放疗中血清VEGF水平增高的局部晚期食管癌患者预后,其治疗毒副作用可耐受。
张志锋, 黄沂, 施烯, 王日雄, 林小燕[9]2010年在《光动力联合紫杉醇对食管癌细胞株Eca-109增殖的影响》文中研究表明目的探讨血卟啉衍生物联合紫杉醇注射液对人食管癌细胞Eca-109体外光动力疗法效应的影响。方法将食管癌细胞株Eca-109分为8组:对照组、化疗组、化疗+高剂量光敏剂治疗组、化疗+中剂量光敏剂治疗组、化疗+低剂量光敏剂治疗组、高剂量光敏剂治疗组、中剂量光敏剂治疗组和低剂量光敏剂治疗组。种板孵育24 h,检测肿瘤细胞的存活率;于化疗方案组加入紫杉醇作用12 h,再往含光敏剂实验组分别加入血卟啉衍生物高、中、低剂量,4 h后行光动力照射,照光前后荧光显微镜下观察细胞凋亡形态,照光后继续培育24 h,开始行MTT法检测食管癌细胞增殖的抑制率;流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果血卟啉衍生物浓度越高食管癌细胞显示的荧光强度越强,荧光强弱与细胞的活性成正比,与紫杉醇联合组则可见到更多凋亡细胞。在肿瘤细胞的生长抑制率、细胞凋亡率方面,化疗+高剂量光敏剂光动力治疗组与空白对照组、单纯化疗组及低剂量光敏剂光动力治疗组相比,差异均有显着意义(P<0.01);含光敏剂大剂量组与小剂量组相比,差异有显着意义(P<0.05);化疗组及光动力组与空白对照组相比,差异有显着意义(P<0.05)。结论光动力联合紫杉醇化疗对人食管癌细胞细胞株Eca-109增殖有协同抑制作用,二者可协同诱导人食管癌细胞株发生凋亡。
杨震[10]2007年在《丹皮酚体内外抗人食管癌Eca-109细胞增殖及其部分机制》文中指出丹皮酚(Paeonol,Pae)又称牡丹酚,是毛茛科植物牡丹Paeonia Suffruticosa Andr根皮和萝摩科植物徐长卿Pycnostelma Paniculatum(Bunge)K Schum干燥根或全草的主要有效成分。Pae是一种小分子的酚类化合物,呈白色有光泽的针状结晶,具有熔点低(mp51℃±1℃)、易挥发及水溶性差的特性,其分子量为166.18,分子式为C9H10O3,化学名为2-羟基-4甲氧基苯乙酮。有关Pae的药理活性国内外诸多学者进行了研究。业已研究表明,Pae具有解热镇痛、镇静催眠、抗炎抗菌、抗动脉粥样硬化、抑制血小板聚集以及增强细胞免疫功能和抗氧化作用。同时大量体内外实验研究证明, Pae能抑制多种肿瘤的生长,包括人红细胞白血病细胞系K562、人乳腺癌基因细胞系T6-17及肝癌细胞系BEL-7404,但在食管癌领域,尚未研究报道。本研究采用人食管癌Eca-109细胞分别和不同浓度的Pae进行培养,选用MTT法检测Pae对体外培养人食管癌Eca-109细胞的抑制增殖作用。建立人Eca-109食管癌裸鼠皮下移植瘤模型,随机将裸鼠分成7组,对照组、Pae不同剂量组(25、50、100、200 mg/kg)、顺铂对照组(CDDP,剂量5 mg/kg)以及联合组(Pae 100 mg/kg+CDDP 5mg/kg),所有组别给药时间为2周,计算药物抑瘤率。采用光镜及电镜观察各组的肿瘤组织的形态学变化。用TUNEL及S-P免疫组化法检测各组肿瘤组织,并比较各组肿瘤组织中凋亡指数及Bcl-2/Bax和caspase-3的表达,初步探讨Pae对人食管癌Eca-109生长的影响及其部分机制。1. Pae对人食管癌细胞Eca-109的增殖抑制作用选用人食管癌Eca-109细胞,采用MTT法检测了Pae体外抑制人食管癌Eca-109的抑制增殖作用。结果显示:Pae在0.047～1.504 mmol/L对人食管癌Eca-109细胞的生长有抑制作用,抑制率随着药物的浓度升高而升高,呈现明显的剂量效应关系。Pae在0.094～1.504 mmol/L对Eca-109细胞的抑制率为12.28%～89.98%。以药物浓度的对数与抑制率进行直线相关分析,r=0.964,P<0.01,得出IC50值为0.342 mmol/L。2. Pae对人Eca-109食管癌裸鼠移植瘤的抑制作用2.1 Pae单药对人Eca-109食管癌裸鼠移植瘤生长影响的动物体内观察Pae灌胃给药对人Eca-109食管癌裸鼠移植瘤的生长有明显的抑制作用。Pae在25 mg/kg剂量时抑瘤率为10.67%,与对照组相比无显着性差异。Pae在50 mg/kg,100 mg/kg及200 mg/kg剂量时抑瘤率分别为23.54%,27.91%和34.46%,与对照组相比有显着性差异(P<0.05)。由此可见,一定剂量的Pae对人Eca-109食管癌裸鼠移植瘤有抑制生长作用,且抑瘤率随着剂量的增加而逐渐上升,呈剂量依赖关系,以药物剂量的对数与抑制率进行直线相关分析,r=0.974,P<0.05。2.2 Pae联合CDDP对人Eca-109食管癌裸鼠移植瘤生长影响的动物体内观察Pae单药在100 mg/kg剂量下抑瘤率为27.91%。CDDP单药在5mg/kg剂量下抑瘤率为58.71%。Pae与CDDP联合用药抑瘤率达到77.91%。采用CDI分析药物相互作用性质,结果发现,两药合用具有协同作用。3.Pae诱导人Eca-109食管癌裸鼠移植瘤的细胞凋亡3.1 Pae诱导人Eca-109食管癌裸鼠移植瘤的细胞凋亡的形态学观察采用苏木素伊红(hematoxylin and eosin,HE)染色,光镜下细胞的形态学观察。结果发现,与对照组相比,用药组肿瘤组织中可见肿瘤细胞数量减少,部分细胞见核染色质边集,核内出现空泡,核固缩、核碎裂,即明显的凋亡细胞,但多散在分布,坏死灶不多。采用透射电镜(transmission electron microscope,TEM)观察,结果发现肿瘤细胞核染色质浓缩边聚、胞浆浓缩、核碎裂以及凋亡小体形成等典型的凋亡表现。3.2 TUNEL检测人Eca-109食管癌裸鼠移植瘤的细胞凋亡选用末端脱氧核苷酸转移酶介导的缺口末端标记(terminal-deoxynucleotidyl transferase mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)方法,检测肿瘤组织的细胞凋亡。采用凋亡指数分析凋亡细胞百分比。结果发现,对照组有少许细胞核深染为棕褐色的凋亡细胞,用药组凋亡细胞明显多于对照组。用药组凋亡指数与对照组相比有显着性差异(P<0.05或P<0.01)。4.Pae诱导人食管癌Eca-109细胞凋亡的可能分子机制采用免疫组化S-P法分别检测人Eca-109食管癌裸鼠移植瘤Bcl-2/Bax以及caspase-3的表达。采用生物图像分析系统软件分析结果,发现Pae可抑制Bcl-2的表达,其增强Bax的表达,且随着药物剂量的增加Bcl-2/Bax的比值降低。Caspase-3的表达随着Pae药物剂量的增加而加强。结果提示,Pae诱导人食管癌Eca-109细胞凋亡可能与调节Bcl-2、Bax以及caspase-3表达有关。5.结论本研究结果提示:Pae在体内外具有抑制人食管癌Eca-109细胞增殖,并且在体内可有协同CDDP的作用。Pae能够诱导细胞凋亡,其诱导凋亡的机制可能与下调Bcl-2/Bax比值及激活caspase-3有关。
参考文献：
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