黑龙江省大兴安岭地区新林区人民医院 165023
【摘 要】衣原体具有一些与细菌类似的生物学特性，现归属于广义的细菌范畴，这些特征包括：①有细胞壁，其结构与革兰阴性细菌的细胞壁相似，和细胞的不同之处是无肽聚糖，只含微量胞壁酸；②含DNA和RNA两种核酸；③以二分裂方式繁殖；④具有核糖体和较复杂的酶系统，可进行多种代谢，但缺乏供代谢所需的能源，必须由宿主细胞提供；⑤对多种抗生素敏感；⑥除肺炎衣原体外，含有质粒，鹦鹉热衣原体甚至有噬菌体。
【关键词】衣原体；检验
1分类
衣原体是一类原核细胞型微生物，其生物学特性介于细菌与病毒之间。如繁殖方式为二分裂繁殖，对磺胺或抗生素敏感，具有DNA与RNA两种核酸等特性似细菌；个体微小，直径0．2～1．5μm，增殖过程中有隐蔽期，能通过细菌滤器，只能在细胞内生长而不能在人工培养基上生长。革兰染色呈阴性，其细胞壁的化学组成与革兰阴性细菌相似。引起人类感染的衣原体有3种，即沙眼衣原体、鹦鹉热衣原体和肺炎衣原体。
2生物学特性
2.1沙眼衣原体
沙眼衣原体在细胞内专营寄生。其感染相为原体，体形较小，有一电子密度的拟核，可被敏感宿主细胞吞噬。每一生活周期需48～72小时。将鸡胚卵黄囊或细胞培养的沙眼衣原体高度提纯，于电镜下检查，可见原体呈球形或类球形，胞浆膜外有刚性细胞壁，壁外有平滑表层，内层直径l6～18μm，按六角形规则排列的颗粒单位。
2.2鹦鹉热衣原体
鹦鹉热衣原体在37～39℃孵育的鸡胚卵黄囊中极易分离和繁殖，是鸟类胃肠道及呼吸道感染的病原体，可从鸟类传给人，使人发生肺炎、关节炎、尿道炎、结膜炎综合征，有时亦可侵犯心肌、心包、脑膜及肝脏。此类衣原体在宿主细胞浆内形成疏松弥散型包涵体，其中无糖原贮存，均不同于沙眼衣原体。
2.3肺炎衣原体
肺炎衣原体包涵体形态在HeLa细胞中与鹦鹉热衣原体十分相似，Giemsa染色时，呈深密度的卵圆形，不含糖原，碘染色阴性，不如一些鹦鹉热衣原体包涵体的呈多变形态，与含肝糖原的呈空泡形的沙眼衣原体包涵体截然不同。
3细菌学检验
3.1标本的采集
对于衣原体感染的实验室诊断非常重要。衣原体为专性细胞内寄生，故所采集的标本应含有上皮细胞。应根据衣原体感染的部位采集相应的标本。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆沙眼及包涵体结膜炎患者，用棉拭在结膜上穹窿或下穹窿处用力涂擦，或取眼结膜刮片；泌尿生殖道感染可取泌尿生殖道拭子或宫颈刮片，因其仅感染柱状以及鳞一柱状上皮细胞，故必须选择在宫颈的移行部位，深入阴道3～4 cm处采样；性病淋巴肉芽肿可采集患者淋巴结脓液或生殖道上皮细胞刮片，也可取直肠拭子或活检材料送检。
3.2检验方法和结果
3.2.1显微镜检查
①Giemsa染色：标本制片后自然干燥，用无水甲醇固定至少5分钟，加当天新鲜配制的稀释Giemsa染液染1小时，为了增强观察时的鉴别，可于Gi-emsa染色后用95％乙醇迅速冲洗去除多余染料，吸干、镜检。②免疫荧光检查：标本制片固定后，经荧光抗体染色检测上皮细胞内的典型衣原体包涵体。异硫氰酸荧光素标记的抗衣原体LPS单克隆抗体，可与衣原体属所有成员反应。
3.2.2酶免疫检查
可由临床标本中检出衣原体的可溶性抗原，适用于同时检测大量标本。将标本中的抗原吸附在固相熬体上，与抗LPS单克隆抗体或多克隆抗体反应，加入酶标记的抗体孵育，经酶的底物和显色剂作用后通过测定吸光度或肉眼观察（膜）判断结果。
3.3.3核酸检测
①核酸探针：检测衣原体常用的探针有rDNA探针及沙眼衣原体质粒中226 bp的重复片段的探针放射性核素标记的沙眼衣原体rDNA探针检测宫颈拭子、化学发光标记的单链DNA探针检测沙眼衣原体敏感性和特异性均较好，化学发光标记因无放射性危害。②PCR：采用PCR法直接从临床标本中扩增核酸快速、敏感、特异。引物设计通常采用衣原体7．5kh质粒、MOMP基因序列及16S rRNA基因序列，可设计衣原体属、种或型特异性引物。由于PCR高度敏感，因此在实际应用中必须注意控制交叉污染，以减少假阳性结果。
3.3分离培养
分离培养法是确诊衣原体感染最可靠的方法，也是评价其他实验室诊断方法的标准。衣原体的分离培养方法包括细胞培养、鸡胚培养和动物接种。标本在培养前应研磨或破碎上皮细胞以释放出原体，组织标本应采用含抗生素的稀释液将其制成l0％～20％的悬液。目前分离衣原体最常用的方法，不同的细胞对不同衣原体的敏感性存在差异。
4血清学试验
衣原体的血清学检验主要包括补体结合试验（CF）、微量免疫荧光试验（MIF）和酶免疫分析等。其中CF检测属特异性抗体，反应稳定，但方法繁琐，敏感性和特异性较差；MIF较CF敏感且可分型，应用广泛，可用于流行病学调查；ELISA法适用于血清中抗体或衣原体可溶性抗原的检测。近年来，以胶体金或彩色胶乳结构物标记衣原体抗体为基础的胶乳免疫扩散，方法简便，敏感性和特异性较高。由于不易获得衣原体感染急性期和恢复期的双份血清，且性传播疾病的高危人群多有慢性或重复感染，原有的抗体水平较高，所以检测抗衣原体抗体的血清学方法在常规的临床诊断中价值不大。
参考文献：
[1]张树文，王千秋，潘丽.基层适宜的沙眼衣原体检验技术[J].中国计划生育学杂志，2013年08期
[2]杜昆.沙眼衣原体感染不同检测方法的比较[J].国际检验医学杂志，2014年05期
[3]幸彩梅.二种沙眼衣原体抗原检测方法比较与评价[J].海南医学，2009年03期
论文作者:罗春莲
论文发表刊物:《航空军医》2016年第7期
论文发表时间:2016/6/22
标签：衣原体论文; 沙眼论文; 标本论文; 抗体论文; 探针论文; 细菌论文; 特异性论文; 《航空军医》2016年第7期论文;