( 云南昆明市食品药品检验所，昆明 650032)
【 中 图 分 类 号 】 Ｒ９６【 文 献 标 识 码 】 Ａ【 文 章 编 号 】 １５５０ －１８６８（ ２０１６） ０４
[摘 要] 目的：建立沙丁胺醇气雾剂每揿含量的超高效液相色谱-串联三重四级杆质谱测定方法。方法：每揿取样，采用 Agilent C18色谱柱，流动相梯度洗脱，电喷雾离子源电离，正离子多反应监测扫描模式( MRM) 定性和定量分析。结果：方法线性相关系数（r）为0.99992，检出限为0.2ng/mL，回收率98.7%。结论：该方法检出限低、线性及回收率良好，适用于沙丁胺醇气雾剂每揿含量的检验。
[关键词] 沙丁胺醇气雾剂；超高效液相色谱-串联质谱；每揿主药含量
沙丁胺醇气雾剂，收载于中国药典2015年版二部，[1]主要用于缓解哮喘或慢性阻塞性肺部疾患患者的支气管痉挛，及预防运动诱发的哮喘，或其他过敏源诱发的支气管痉挛。本品不良反应的发生和严重程度取决于给药剂量和给药途径。[2]中国药典，揿压喷射10次，采用高效液相色谱法测定，计算10揿的平均每揿主药含量。方法的系统实用性实验分离差，而且检出限高。[3]本文采用超高效液相色谱串联质谱仪定性定量检测，提高检出灵敏度，实现了揿压喷射1次取样测定，更有利于考察沙丁胺醇气雾剂的质量稳定性。
1 材料与方法
1.1仪器
超高效液相色谱仪(Agilent 1290)；三重四级杆质谱仪 ( 4000 Q TPAP， AB ) ；C18 色 谱 柱 ( 1.8um ×2.1×50mm, Agilent) ；
1.2试药
对照品：沙丁胺醇（中国食品药品检验研究院）；甲醇( 色谱纯) ；甲酸( 色谱纯)；氨水( 色谱纯)。
样品：沙丁胺醇气雾剂（某药业有限公司 批号20150501）。
1.3方法
1.3.1对照品溶液的配制
精密称定标准品约10mg 置于 10mL 容量瓶中，用甲醇定容，摇匀，于 4 ℃冷藏，作为储备液，使用时用流动相稀释至所需浓度。
1.3.2 供试品溶液制备
取样品1瓶，充分振摇，试揿5次，用流动相洗净喷头及套头，充分干燥后，振摇30秒，倒置于已加入流动相吸收液30mL 的烧杯中，将套口浸入吸收液的液面下（至少25mm），揿压喷射1次，取出，用吸收液洗净套口内外，合并洗液与吸收液，转移至50mL容量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，再取1mL，定容至50mL，摇匀，做为供试品溶液。[1]
1.4色谱条件
液相色谱条件：流动相 A 为 0.1% 甲酸溶液 ，流动相 B 为甲醇。流速：0.2 mL/min；柱温 35℃。梯度洗脱：0 ～1 min，30% ～70%B；1～2 min， 70% B；2 ～2.1 min，70% ～30% B；2.1 ～5min，30% B。
1.5质谱条件
ESI-MS/MS 条件：电喷雾正离子，MRM 多反应监测扫描；气帘气，离子源雾化气，离子源加热辅助气，碰撞气分别设定为25，60，70 和 5，喷雾电压为5500 V，加热器温度为 550 ℃，接口加热器打开。[4]
2 结果
2.1质谱条件优化
用流动相将对照品储备液稀释成约为1ug/mL的对照溶液，直接注射进样方式分别扫描各对照品母离子Q1 和子离子 Q3，优化离子质荷比、去簇电压、碰撞电压等参数，选用两个离子对分别作为定量和定性离子，建立沙丁胺醇的质谱检测方法，优化结果见表1，沙丁胺醇的二级质谱图，见图1。
2.3供试品溶液测定
照供试品溶液制备方法，分别揿压前、中、后各10揿，制备供试品溶液。照上述液质联用方法进样测定。按外标法以定量离子峰面积每揿主要含量。测定结果见表3。
3 讨论
本文建立的实验方法，检出限低，定量定性准确，改变了中国药典“每揿主药含量”检查法的取样方法。[5]更真实地反映了沙丁胺醇气雾剂的稳定性，更好地控制了制剂的质量。每揿药量，还和正确使用气雾剂揿压方法有关，患者用药时需正确掌握。
参考文献:
[1]国家药典委员会编．中华人民共和国药典（2015年版二部）[S]．北京：中国医药科技出版社，2015:523-524．
[2]陈德辉，翟莺莺，林育能，等．硫酸沙丁胺醇在治疗儿童支气管哮喘中的临床疗效分析．临床儿科杂志[J]．2011．29（10）：967-970．
[3] 汪麟，刘立群，白政忠．黑龙江医药[J] ．2014．27(1):12-15．
[4] GB/T 22286-2008．动物源性食品中多种β-受体激动剂残留量的测定 液相色谱串联质谱法[S]．
[5]国家药典委员会编．中华人民共和国药典（2015年版四部）[S]．北京：中国医药科技出版社，2015:17-18．
论文作者:李应才
论文发表刊物:《医药界》2016年4月第4期
论文发表时间:2016/6/23
标签：色谱论文; 气雾剂论文; 药典论文; 溶液论文; 离子论文; 高效论文; 方法论文; 《医药界》2016年4月第4期论文;