曹馨予
武警后勤学院 300309
【摘 要】目的：研究PCR在医学检验乙肝中的应用。方法：随机抽取2015 年9 月进入我院治疗的60例患者，均为乙肝携带者，需要进行采、化验等检验患者的病况。将患者随机分为两组，实验组和对照组，各30例，实验组采用PCR技术对患者进行检测，对照组采取常规的方法对患者进行检测。记录两组实乙肝患者检测出的病毒数量并探其性。结果：观察组检测乙肝患者病毒的速度和准确性的效果明显高于传统检测方法，两者之间具有显著的统计学差异（P <0.05）。结论：通过PCR术对乙肝患者的检测结果更快速准确，其检测方法明显优于传统检验方法。。
【关键词】聚合酶链式反应；检验；乙肝
目前，全世界乙型肝炎病毒HBV携带者约有3.8亿，而我国就将近有1.5亿人。如此高患者中每年死于乙型肝炎相关性肝病约为50万人。乙型肝炎病毒（HBV）是肝脏疾病的重要致病因子，是严重危害人类健康的病毒之一[1]。乙型肝炎病毒（HBV） 感染后临床表现呈多样性，可表现为无症状携带者、慢性肝炎、急性肝炎、重症肝炎，部分慢性肝炎可演变为肝硬化或肝癌。因此对其快速准确的诊断成为一种必需，聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction），简称PCR［2］，是一种分子生物学技术，用于放大扩增特定的DNA片段，已广泛地应用于病原学检测、基因组研究领域。为比较PCＲ与传统检测方法的差异，本文通过与采用传统检测手段患者资料进行对照分析，结果如下。
1 资料与方法
1.1一般资料
经严格检验，随机抽取于2015年12月入我院进行乙肝治疗的60例患者，年龄在30-60 岁之间。研究的60例患者均为乙肝患者，均无系统性疾病和药物过敏史。将60例患者随机分两组，即实验组和对照组，实验组30例，男16例、女14例；对照组人数30人，男15例、女15例。采用统计学分析，两组患者在年龄、性别及疾病原因等方面差异不显著，无统计学意义，具有可比性。
1.2纳入和评价标准
按照成军[3]等实验选择标准：年龄在30～60岁的乙肝患者；没有免疫缺陷等疾病、智力正常、自然状况一切正常；排除标准：高血压；存在感觉功能缺陷；先天性的疾病等患者。
1.3方法
实验组采取PCR检测技术，利用乙肝患者抗原抗体检测的灵敏度进行评价；对照组采取常规的物化检测，即传统检验方法。两组的用药方法用量相同，均采用局部浸润方法注射。
1.4效果评价标准
评估标准是通过观察检测抗原抗体的数量和灵敏度作[4]。
1.5统计学处理：
数据采用SPSS 17. 0软件进行统计学分析，百分率（ %） 表示计数资料，采用χ2 检验进行定性资料的比较，t检验用于组间比较，当P＜0.05时，可认为差异有统计学意义。
2结果
通过相应的实验检测观察，两组的检测效果见表1。
由表1中数据可知，实验组与对照组的实验数据比较具有统计学意义（P<0.05），表明PCR技术用于对乙肝的检测优于传统方法即常规的物化检测。
3讨论
由实验结果可知观察组检测乙肝患者病毒的速度和准确性的效果明显高于传统检测方法，两者之间具有显著的统计学差异（P<0.05）。通过PCR术对乙肝患者的检测结果更快速准确，其检测方法明显优于传统检验方法。
PCR是利用DNA 在体外高温时变性变成单链，低温引物与单链按碱基互补配对的原则结合，再调温度至DNA 聚合酶最适反应温度，DNA 聚合酶沿着磷酸到五碳糖（ 5－3＇） 的方向合成互补链。主要包括ELISA和FQ-PCR，两者PCR技术优缺点如表2。
PCR技术优点缺点
ELISA辅助诊断乙肝的常规方法，对急性乙肝的发现有重要作用。对检测慢性乙肝表现得越来越不灵敏，特别是在乙肝病毒发生了变异以后，需要进行HBV-DNA检测才能确诊。
FQ-PCR采用荧光标记和闭管检测，克服了常规PCR 扩增产物污染所致假阳性的缺点，使结果具有极高的特异性和敏感性。①FQ-PCR 的反应体系复杂，易受多种因素影响。待测标本的溶血、脂血、处理不当都会导致其假阳性或假阴性；
②FQ-PCR只能检测血中游离的HBV-DNA，当病毒整合到肝细胞染色体上，随同肝细胞一起复制、表达时，ELISA 可出现阳性反应，但血清中已没有HBV 颗粒存在［5］，此时FQ-PCR为阴性反应；当患者感染的HBV-DNA发生突变，不能与荧光探针结合，FQ-PCR为阴性，而ELISA可为阳性。
由表2可知，在乙肝病毒感染的诊断上，二者有各自的优点，不可互相替代。FQ-PCR客观地反映HBV 感染、复制及病程变化，修正或补充了对ELISA测定结果的解释，尤其是在病毒感染早期，ELISA 不能检测到低滴度的病毒抗原时，FQ-PCR即可检测到HBV-DNA 的复制，有利于乙肝的早期诊断。
参考文献：
[1] Olinger CM，Jutavijitttum P，Hubschen JM，et al. Possible new hepatitis B virus Genotype，southeast Asia[J]. Emerg Infect Dis，2008，14（11）：1777-1780.
[2] 李伟，李峰生，陈舒，等.肝病毒血清hbv-DNA标记物与血清的关系[J].细胞与分子免疫学杂志，2011，24：818-821.
[3] 成军，孙关忠，陈瑜，等.高低浓度血清中五项乙肝标志物的表现模式分析[J].细胞与分子免疫学杂志，2012，17：443-444.
[4] 林杓锋，李校坤，吴帆，等.实行定量PCR在乙型肝炎（HBV）诊断中的应用[J].中国生物工程杂志，2012，22（ 3）：68-70.
[5] 张健，李宁，吕维红，等.HBV-DNA定量测定对乙肝五项的评价意义[J].中华中医学杂志，2013，25（1）：15-17.
论文作者:曹馨予
论文发表刊物:《中国医学人文》(学术版)2016年1月第2期
论文发表时间:2016/5/10
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