翟金俊[1]2002年在《血管内照射对血管成形术后再狭窄大鼠血浆细胞因子影响的实验研究》文中提出目的 研究血管成形术后血管内照射对血浆内皮素-1，肿瘤坏死因子-α，血管紧张素-Ⅱ的影响，并分析其作用机理。方法 252只Wistar雄性大鼠随机分为球囊损伤组，血管内照射组，假手术组，各组分别于不同时相点行血管病理形态学和放射免疫检查。结果 血管损伤组内皮素-1，肿瘤坏死因子-α水平升高，血管紧张素-Ⅱ水平较低。血管内照射可降低内皮素-1，血管紧张素-Ⅱ及肿瘤坏死因子-α水平，血管狭窄程度明显减低(P＜0.01)。结论 1、内皮素-1、肿瘤坏死因子-α、血管紧张素-Ⅱ是引起再狭窄的重要因素；2、血管内照射可抑制导致内膜增生的细胞因子因素；3、24GY的照射剂量较为合理。
徐尚华[2]2004年在《叁硫二丙烯和～（32）P包被支架预防犬冠状动脉狭窄的实验研究》文中提出血管平滑肌细胞(VSMC)迁移、增生和细胞外基质(ECM)在内膜过度沉积形成新生内膜是支架内再狭窄的主要原因。与PTCA相比，冠脉内支架的应用再狭率窄已明显降低，但支架内再狭窄(in-stent restenosis，ISR)仍然是一个严重的问题。目前全身用药都未能减少ISR发生率。近距离放射治疗是预防ISR的有效方法，但最大缺点是内皮化延迟和晚期血栓形成。药物包被支架(drug-coated stent)因具有靶血管局部治疗的优点而备受关注。 大蒜作为一种中草药已经应用了数千年，叁硫二丙烯(diallyl trisulfide，DT)是大蒜的有效成分之一，具有很强的抗炎、抗血小板聚集、抑制血栓形成、预防动脉粥样硬化等多方面药理作用。体外研究结果显示DT能明显抑制兔主动脉VSMC的增殖；我们实验室已先后成功进行了放射性核素~(32)P胶体和DT包被支架的动物实验，证明血浆蛋白涂膜可良好携带~(32)P和DT，抗血流冲刷能力强，能有效预防支架术后内膜增生。 本实验应用血浆蛋白作为载体，制作DT、~(32)P包被支架以及二者联合包被支架，分别植入犬冠状动脉，进一步研究DT预防支架术后再狭窄的剂量效应关系；研究DT与~(32)P联合支架预防再狭窄的疗效；探讨DT抑制再狭窄的可能作用机制。 实验内容包括叁部分。 第一部分，观察DT包被支架对犬冠状动脉损伤后内膜增生的量效关系。制作蛋白包被的DT包被支架，剂量分别为0μg(对照组)、60μg(小剂量组)、130μg(中剂量组)和210μg(大剂量组)。在犬左冠状动脉分别置入过大的单纯蛋白包被支架和DT包被支架，于术后28天和6个月冠状动脉造影后处死动物，取出带支架血管组织分为叁份，一份固定在2.5％戊二醛中，用于制作扫描电镜标本，观察内皮覆盖情况；一份塑料包埋，碳化钨钢刀切片，分别行elastic-van Gieson和Masson染色，形态学观察，另一份用于第叁部分分子生物学指标检测。结果发现，术后28天，对照组血管内膜表面已完全内皮化，210μg DT包被支架组＞90％内皮化；光镜结果显示，各组血管损伤程度无显着性差异(P＞0.05)。内弹力板层包绕面积在各组间无差别。支架置入后28天，对照组内膜明显增厚，ECM面积占内膜总面积的40％，6个月后增加到91％(P＜0.001)。DT呈剂量依赖性减少内膜ECM比例。血管参数分析显示，各指标在小剂量组与对照组差异均无显着性(P＞0.05)；术后28天，大、中剂量组的平均新生内膜厚度、新生内膜面积无差别(P>0.05)，但均大于小剂量组和对照组(P<0.OOI);DT呈浓度依赖性增加管腔面积(P<0.OI)和抑制面积狭窄率(P<0.001)。术后6个月，所有指标大、中剂量组与小剂量组、对照组之间均有统计学差别;DT呈浓度依赖性抑制内膜增生(P<0.01);管腔面积、新生内膜面积及面积狭窄率在大、中剂量组间无差别(P>0.05)。上述结果表明，60林gDT对预防再狭窄无效，在支架置入术后6个月内，中、高剂量DT(130陀，210林g)包被支架呈剂量依赖性地抑制支架术后内膜增生，其机制与DT降低内膜SMC聚集和减少ECM沉积有关。 第二部分，设计DT与32P联合包被支架，置入犬无病变的冠状动脉，期望经两个不同途径，更彻底地抑制内膜增生。分别制作蛋白涂层的DT包被支架(210林留支架)，’ZP包被支架(20林ei/支架)和DT与犯P联合包被支架(210林g+20林ei/支架)置入犬冠状动脉，于术后28天和6个月行冠状动脉造影后处死动物，取材，分别制作扫描电镜标本和组织切片，行elastic一van Gieson和Masson染色，形态学观察，进行参数测量、计算。结果发现，术后6个月，DT包被支架组血管内膜表面完全内皮化，联合包被支架组内皮化程度与32P支架组相似(80%)。Masson染色显示，各治疗组抑制内膜增生的同时伴有ECM含量的降低，联合组最低。血管参数分析发现，术后28天和6个月，各指标在治疗组与对照组差异均有显着性意义(尸<0.05);联合包被组的平均新生内膜厚度、新生内膜面积和面积狭窄率均小于32P和DT组(尸<0.05)，但管腔面积大于32P和nT组(尸<0.05);各指标在32P和DT两组间无差别(P>.05)。术后28天，联合包被组的平均新生内膜厚度虽小于32P组(尸<0.05)，但与DT组无差别(P>.05);6个月后不仅联合包被组对内膜增生的抑制程度大于32P和DT组(尸<0.05)，而且DT组对内膜增生的抑制程度大于32P组(尸<0.05)。6个月后冠状动脉造影结果显示，邻近参考血管直径在各组间差异无显着性。其余指标在治疗组与对照组差异均有显着性意义(P<0.05)。支架段血管直径狭窄程度，联合包被组小于犯P组和DT组(尸<0.05)。支架边缘段血管直径狭窄程度，DT组和对照组无差别，但32P组和联合组直径狭窄程度均大于对照组(p至0.016)。冠造结果未发现动脉瘤及局部血栓形成。上述结果表明，DT和犯P联合包被支架抑制内膜增生程度大于单纯犯P和DT包被支架，但内皮化程度没有进一步减少，提示联合包被支架预防ISR疗效更显着，但不增加副作用。联合包被支架的应用为开发即能有效预防内膜增生，又能快速内皮化的药物提供了新的思路。 第叁部分，观察DT包被支架对基质金属蛋白酶一9，一2(MMP一9，一2)和金属蛋白酶组织抑制剂一1，一2(TIMP一1，一2)基因表达的影响，并探讨血管?
余胜[3]2009年在《舒脉胶囊拮抗AngⅡ诱导血管平滑肌细胞增殖和迁移的机制探讨》文中研究说明1前言随着人们生活的改善,动脉硬化性闭塞症(ASO)的发病率逐年升高,已经严重威胁到人们的生命健康,近年来在治疗ASO上西医多采用降脂类药物和抗血凝药物,疗效有限,而经皮腔内血管成形术(PTA)后,容易出现再狭窄。由于以上原因,近年来越来越多的中药运用于临床治疗ASO,舒脉胶囊就是其中之一,其为首都医科大学附属北京中医医院的院内制剂,具有补脾益气、活血通脉作用,前期动物实验已经证实舒脉胶囊具有防治早期ASO的作用,本实验研究主要从细胞实验的角度进一步证实其具有防治ASO的作用,以及研究其防治ASO的内在机理。ASO形成的原因之一为血管内皮细胞的损伤以及,中层血管平滑肌细胞(VSMC)的增殖和迁移至血管内层,从而形成管腔的狭窄,本实验通过研究舒脉胶囊如何抑制血管平滑肌细胞的增生和迁移,从而揭示舒脉胶囊的作用机理。2方法本实验采用的是体外细胞实验,体外细胞实验以体外培养的兔主动脉VSMC为研究对象,应用血清药理学研究方法,以血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)为诱导因素,随机将生长良好的第3～5代VSMC分为空白组、AngⅡ组、舒脉胶囊大剂量组、舒脉胶囊中剂量组、舒脉胶囊小剂量组、活血化瘀拆方组和补脾益肾拆方组。对细胞活性、细胞周期、细胞代谢产物、细胞因子蛋白表达、细胞迁移距离等方面进行检测,观察舒脉胶囊对VSMC活性、迁移的影响,以阐明该方防治ASO的细胞生物学基础。并通过舒脉胶囊全方与活血化瘀拆方和补脾益肾拆方的比较,证明其立法组方的科学性、合理性。3结果3.1舒脉胶囊对AngⅡ诱导血管平滑肌细胞增殖活性的影响AngⅡ组与空白组相比有显着性差异,舒脉胶囊全方组、活血化瘀拆方组与AngⅡ组和补脾益肾拆方组相比有显着性差异,全方组的差异大于活血化瘀拆方组;全方大剂量组、全方中剂量组与AngⅡ组相比均有统计学差异,全方小剂量组尽管与AngⅡ组A值差异不显着,但是其值仍然低于AngⅡ组,其中大剂量组的差异大干中剂量组和小剂量组。3.2舒脉胶囊对AngⅡ诱导血管平滑肌细胞细胞周期的影响G_0-G_1期补脾益肾拆方组与AngⅡ组相比均有统计学差异;S期AngⅡ组与空白组相比有显着性差异,舒脉胶囊全方组和活血化瘀拆方组与AngⅡ组、补脾益肾拆方组相比均有显着性差异,其中舒脉胶囊全方组差异大于活血化瘀拆方组;G_2-M期活血化瘀拆方组与AngⅡ组相比有显着性差异,补脾益肾拆方组与空白组相比均有统计学差异。3.3舒脉胶囊对AngⅡ诱导血管平滑肌细胞NO、MDA、SOD的影响AngⅡ组与空白组相比有显着性差异,舒脉胶囊全方组、活血化瘀拆方组分泌SOD少,分泌NO、MDA多,与AngⅡ组和补脾益肾拆方组相比有显着性差异,舒脉胶囊全方组表达多于活血化瘀拆方组。3.4舒脉胶囊对AngⅡ诱导血管平滑肌细胞PCNA、α-actin的影响AngⅡ组与空白组相比有显着性差异,舒脉胶囊全方组、活血化瘀拆方组表达PCNA少,表达α-actin多,与AngⅡ组和补脾益肾拆方组相比有显着性差异,舒脉胶囊全方组表达多于活血化瘀拆方组。3.5舒脉胶囊对AngⅡ诱导血管平滑肌细胞迁移的影响AngⅡ组VSMC迁移距离较长,与空白组相比有显着性差异,舒脉胶囊全方组、活血化瘀拆方组迁移距离较短,与AngⅡ组和补脾益肾拆方组相比均有显着性差异,且舒脉胶囊全方组迁移距离短于活血化瘀拆方组;舒脉胶囊大剂量组、舒脉胶囊中剂量组、舒脉胶囊小剂量组与AngⅡ组相比均有统计学差异,舒脉胶囊大剂量组迁移距离短于中剂量组和小剂量组。3.6舒脉胶囊对AngⅡ诱导血管平滑肌细胞MMP-2、TIMP-2的影响AngⅡ组与空白组相比有显着性差异,舒脉胶囊全方组、活血化瘀拆方组表达MMP-2少,表达TIMP-2多,与AngⅡ组和补脾益肾拆方组相比有显着性差异,舒脉胶囊全方组表达多于活血化瘀拆方组。4结论4.1 AngⅡ能够增强细胞的增殖能力及促进细胞的迁移4.2舒脉胶囊能够抑制AngⅡ诱导的细胞活性增强及细胞的迁移,其抑制VSMC的增生和迁移主要是通过抑制细胞的活性,减少细胞的有丝分裂,增加NO、MDA的分泌,减少SOD的分泌,减少PCNA、MMP-2的表达,增加α-actin、TIMP-2的表达,抑制细胞的迁移而发挥作用,其中舒脉胶囊全方组抑制作用强于活血化瘀拆方组,舒脉胶囊大剂量组抑制作用强于中剂量组和小剂量组。4.3补脾益肾拆方组不能起到抑制的作用,甚至可以协同AngⅡ共同具有促进细胞增殖和迁移的作用。
彭哲[4]2004年在《PTA术后益气活血解毒方药物血清对兔VSMC在RS中作用的研究》文中研究说明PTCA 术后 RS 的病理生理机制研究表明,炎症反应和平滑肌细胞增殖在 PTCA 术后RS 的发生发展中起着关键作用。中医认为本病的病机为本虚标实,以脏气虚弱为本,血瘀、痰浊为标。目前中医防治本病主要通过活血化瘀、化痰去浊、益气养血、调补脾肾、理虚调肝等法的配合运用。我们认为 PTCA 术后 RS 从其病理过程与创伤修复相似,则辨治当类同于中医修复创伤的治法。因此,中药治疗的原则应为修复新伤,针对正气亏虚当扶助正气,同时根据病变局部瘀毒互结的病机特点治以活血解毒,而使心脉通畅,瘀毒两清。益气活血解毒方的组方用药体现了这一基本治法。目的 对比研究中医治疗创伤法及其益气活血解毒方与活血理气法经典方血府逐瘀胶囊在 PTA 后防治 RS 的血清药对培养的兔 VSMC 药效、药理作用的研究。方法 1.药物血清的制备:①整体动物模型及给药:用电刺激兔一侧颈总动脉,同时喂饲高脂饲料的方法造成局部动脉粥样硬化斑块和血栓形成后,运用球囊原位扩张和喂饲高脂饲料致 PTA 术后 RS 模型,对模型颈动脉进行 B 型超声和病理切片相结合研究评价,造模成功后给予含益气活血解毒方、血府逐瘀胶囊和西药(普伐他汀、巴米尔)的饲料进行治疗四周;②药物血清获取:获取模型动物和给药动物血清,正常组不施加干预因素,与其它动物同期采血。 2.兔血管平滑肌细胞(VSMC)原代培养:采用组织贴块法进行兔 VSMC 的原代培养,在倒置显微镜下观察细胞形态,并经血管平滑肌肌动蛋白(α-SM actin)免疫组织化学鉴定。 3.观察药物血清对离体定位靶细胞——VSMC 作用 12h、24h 的影响:①药物血清对VSMC 增殖和细胞周期的影响:采用四唑蓝(MTT)比色法测定 VSMC 存活率,采用流式细胞仪碘化丙啶(PI)染色法测定 VSMC 细胞周期、DNA 合成及凋亡;②药物血清对 MDA、SOD、NO、NOS 的影响:采用 MDA 测定试剂盒微量操作法、黄嘌呤氧化酶法分别测定培养上清液中 MDA 含量和 SOD 活力;采用硝酸还原法、一氧化氮合酶测定试剂盒分别测定培养上清液中 NO、NOS 含量;③药物血清对 IL-6、TNF-α、MIP-1、MCP-1 的影响:采用双抗体夹心 ABC-ELISA 法分别测定培养上清液中 IL-6、TNF-α、MIP-1、MCP-1 含量;④ 药物血清对 VSMC 分泌羟脯氨酸的影响:采用羟脯氨酸比色法,测定培养上清液中羟脯氨酸的含量。结果 1.益气活血解毒方药物血清通过 12h 调控 G2-M 转折点、24h 调控 G1-S 转折点,调控细胞周期进而显着抑制 VSMC 增殖,12h、24hMTT 结果(0.396±0.015、0.397±0.031)<WP=5>-2- PTA 术后益气活血解毒方药物血清对兔 VSMC 在 RS 中作用的研究与模型血清组(0.435±0.019、0.479±0.027)比较,p<0.05。血府血清组通过 24h 调控 G1-S 转折点抑制 VSMC 增殖,24hMTT 结果(0.422±0.043)与模型血清组比较,p<0.05。西药血清组有相同作用; 2.益气活血解毒方药物血清 24h 增加 SOD 活力(34.71±1.23)与模型血清组(32.44±0.78)比较,p<0.05;其 24h 降低 MDA 含量(1.79±0.17)与模型血清组(2.14±0.15)比较,p<0.05,其降低 MDA 的作用优于血府血清组(2.09±0.13),二者比较,p<0.05;益气活血解毒方药物血清 12h、24h 均具有显着促进 VSMC 分泌 NO(27.78±2.62、33.07±2.31)的作用,与模型血清组(20.63±4.56、18.54±4.06)比较,p<0.05。而血府血清组12h显着增加 SOD活力(35.56±0.53)与模型血清组(33.21±0.79)比较,p<0.05,但 24h(33.94±0.67)无显着作用;血府血清组 24h(28.64±4.99 )有显着促进 VSMC分泌 NO 的作用,与模型血清组比较,p<0.05。西药血清组有相同作用; 3. 西药血清组 12h、24h 均可抑制 VSMC 分泌 IL-6(278.90±56.16、365.24±28.16),与模型血清组(560.16±88.11、498.98±32.18)比较,p<0.05;西药血清组12h、24h 还可抑制 VSMC 分泌 TNF-α(208.58±25.15、199.54±21.99),与模型血清组(457.14±54.62、308.43±16.83)比较,p<0.05。益气活血解毒方药物血清 12h 能显着抑制 VSMC 分泌 IL-6(353.80±47.06),与模型组比较,p<0.05;该方 12h 亦可显着抑制 VSMC 分泌 TNF-α(294.58±26.01), 与模型血清组比较,p<0.05;该方与血府血清组 12h 抑制 VSMC 分泌 IL-6(370.84±58.37)和 TNF-α(291.28±27.89)的作用相似,24h 血府血清组抑制 VSMC 分泌 IL-6(336.84±80.22)的作用强于益气活血解毒血清组(485.04±99.43),p<0.05。叁组药物血清以西药血清组的药效为佳; 4. 西药血清组在 12h、24h 均有显着抑制 VSMC 分泌趋化因子 MIP-1(355.56±31.41、350.08±18.92)的作用,与模型血清组(572.40±99.53、438.94±59.65)比较,p<0.05。血府血清组在 12h(364.18±32.82)有显着抑制作用,与模型血清组比较,p<0.05。益气活血解毒方药物血清未显示出作用;各药物血清组均未显示出抑制 VSMC 分泌 MCP-1 的作用; 5. 益气活血解毒方药物血清 12h、24h 均显示出抑制 VSMC 分泌胶原(0.2825±0.017、0.2870±0.027)的作用,与模型血清组(0.3807±0.037、0.3494±0.037)比较,p<0.05,12h 其抑制 VSMC 分泌胶原的作用较血府血清组(0.3501±0.047)和西药血
佚名[5]2003年在《中华核医学杂志2003年第23卷主题词索引》文中认为说明:(l)本索引主题词按汉语拼音字母顺序排列;(2)冠有阿拉伯数字、西文字母、西文姓氏的主题词,按其后汉字的拼音排序,在汉字相同的情况下,按数字、英文字母、希文字母顺序先后排列;(3)为集中同一性质的关键词,采用倒装词,如疙疹,带状,耳部;(4)文题、
宁田海, 佟金[6]2015年在《《中国循环杂志》2015年第30卷关键词索引》文中指出说明:1本索引按关键词汉语拼音字母顺序排序。2在第1个汉字相同的情况下,按第2个汉字拼音字母顺序排序,以后依次类推。在第1个汉字音同字不同的情况下,按笔划多少排列。3在关键词相同的情况下按发表先后顺序排列。4以英文为首的词,按第1个英文字母顺序先后排列居文中关键词之前。5在第1个英文字母相同的情况下,按第2个英文字母顺序先后排列,依次类推。6文题、作者后括号内数字为期号,最后为起页。
龙明智[7]2003年在《充血性心力衰竭与儿茶酚胺-β受体系统关系及心肌肌球蛋白基因表达的实验和临床研究》文中指出目的： 1、研究儿茶酚胺(肾上腺素和去甲肾上腺素)对心肌的毒性作用，探讨其作用机制。 2、进一步揭示心衰时循环内分泌的改变，特别是交感神经系统激活情况，了解其在心衰中的意义。 3、观察不同级别(NYHA)心功能患者心肌β受体变化(质和量)，为心衰β受体阻滞剂的应用提供依据。 4、了解心衰究竟如何从代偿转变为失代偿，除与心肌细胞数量及心脏支架有关外，心肌细胞质的变化起着重要作用，这包括心肌结构蛋白及基因表达的异常。 5、筛选出那些预后严重，有猝死高危的心衰患者。 6、指导临床合理用药，特别是β受体阻滞剂在心衰中的应用，从而降低心衰的死亡率，改善其预后。 方法： 本实验分基础研究和临床研究两部分。 基础研究： 1、首先造模，建立肾上腺素和去甲肾上腺素所致兔心肌损害模型：按照Dowing法进行改良，并参照以往的研究进行造模。设立3组，分别是对照组、去甲肾上腺素组(NE组)和肾上腺素组(AD组)，每组6只兔子。NE组给予去甲肾上腺素1mg／kg加入50ml生理盐水中静滴，AD组给予肾上腺素1mg／kg静滴，对照组用生理盐水50ml，均缓慢静滴90分钟。静滴完毕后，各组动物正常饲养(取心肌前12小时禁食但不禁水)，48小时后从耳缘静脉注入空气造成肺栓塞，处死动物，立即剖胸，迅速从右心房或上、下腔静脉取血，经相应的处理后，分别送有关实验检查。同时取出尚在搏动的心脏，用生理盐水洗净，于左心室前壁切取1-2mm~3大小的组织块10粒，用2.5％戊二醛和1％锇酸固定，醋酸铀块染，再用酒精、丙酮进行脱水，环氧树脂包埋，切成超薄切片，枸橼酸铅片染，然后 南京医科大学博士学位论丈在电子显微镜下观察。另外，切取部分左。。室组织，采用 RTPCR测定凋亡基因 P53和 Caspase3的变化，以及采用放射免疫分析法测定心肌 cAMP含量，余下的心肌组织用10％甲醛浸泡、固定，石蜡包埋、切片，HE染色，作普通光镜检查。 2、研究肾上腺素和去甲肾上腺素对。U肌肌球蛋白重链基因表达的影。向。 3、观察a受体阻滞剂酚妥拉明汀egitine）和p受体阻滞剂艾司洛尔ksmdd）对去甲’肾上腺素所致。。肌损害的影响，以及代谢改变。 正 床研究： 1、充血性心力衰竭时机体神经体液系统改变及炎性细胞因子一肿瘤坏死因子化（TN’F化）、白细胞介素6门L6）水平的测定：神经内分泌的改变包括交感神经系统（SNS人 肾素－血管紧张素－醛固酮系统（RAS）和心钠素等。 2、观察充血性心力衰竭患者心肌损害情况，以及反映心衰预后的指标。 3、了解不同心功能（NAq1A）患者心肌p受体含量和。c肌p受体敏感性的变化，以及血浆 CAMP儿GMP比值的改变； 4、观察充血性。G力衰竭时。。肌肌球蛋白重链和轻链基因表达，并通过超声。。动图和有创心功能测定，检测有关』。功能（如EF值）和血流动力学指标，了解心肌肌球蛋白轻链与心功能的关系。结果： 基础研究： l、肾上腺素组和去甲肾上腺素组均显示心肌细胞发生明显脂肪变性，肌溶解，肌凝，淋巴细胞浸润，间质细胞增生；以及收缩带形成卜为，。肌早期坏死的标志），细胞核浓染、核固缩或核碎裂，横带间肌纤维结构遭到破坏，肌纹模糊不清。另外，，J、血管内可见血栓形成，胞内可见＊、点状物浓染。 2、电镜观察所见：肾上腺素组表现为心肌细胞内线粒体肿胀，明显短缩、断裂、溶解、消失，有的线粒体膜破裂、崩解，胶原纤维断裂，基质电子密度降低，胞内糖原颗粒明显减少。去甲’肾上腺素组同样可见G肌 3 南京医科大学博士学位论文细胞内线粒体呈空泡样肿胀，线粒体略断裂、溶解，肌原纤维断裂，电子密度降低，糖原颗粒明显减少。在C肌细胞间毛细血管内可见小的血栓形成，毛细血管内皮细胞肿胀。此外，肾上腺素组和去甲肾上腺素组均可见数量不等的心肌细胞胞核形状不规则，核膜凹陷，核染色质边集，核固缩，胞浆凝集，空泡化，肌丝和致密体减少，细胞膜完整的区域，周围无炎性细胞漫润，此即凋亡的心肌细胞。生理盐水对照组心肌细胞来见病理损窖。 3、在生化检测方面，肾上腺素组、去甲肾上腺素组血CK－MB浓度均显着升高，表明去甲肾上腺素、肾上腺素对。。肌具有直接毒性作用；而且两组CAMP儿GMP比值以及心肌细胞内 CAMP含量均升高。p受体阻滞剂艾司洛尔＊）和a受体阻滞剂酚妥拉明hegitin e能抑制NE、AD所致CAMP升高，从而降低血和心肌细胞内CAMP，同时还降低儿茶酚胺所致CK－MB升高，保护心肌细胞。 4、凋亡基因的检测发现，肾上腺素组和去甲肾上腺素组心肌细胞P53基因和Caspase3基因水平显着高于对照组沪＜0刀5卜 而p受体阻滞剂艾司洛尔能阻止i所致凋亡基因P53和Caspase3的表达。 5、儿茶酚胺作用于心肌细胞后，心肌肌球蛋白重链（MHC）基
佚名[8]2003年在《《中国临床康复》2003年第7卷1～32期主题词索引》文中研究表明(旬刊2003年1月5日至12月25日主题词索引按汉语拼音音序排列)《内经》李建梅,王慧峰,赵鹏.从《黄帝内经》谈太极拳的机制及其应用初探(15):22355-甲氧色胺李淑惠,胡德耀,李晓辉,等.N-乙酰-5-甲氧色胺镇痛作用的实验研究(8):1277A
刘爱琴[9]2001年在《铜蒸气激光照射对兔血管平滑肌细胞凋亡的诱导作用及对增殖抑制作用的研究》文中研究表明经皮冠状动脉成形术（PTCA）是治疗冠状动脉狭窄的重要手段之一，然而术后再狭窄（RS）的发病率在6个月时可高达30-50％。血管平滑肌细胞（VSMC）增殖、迁移，新生内膜形成、增厚是血管成形术后再狭窄发生的主要原因，增生活跃的VSMC在诱发因子的刺激下易发生凋亡，为再狭窄的防治提供了新思路。激光具有定位准确、剂量易于控制、安全简便、无全身不良反应等其他方法所不能替代的优点，将激光用于再狭窄防治方面的研究，具有深远的理论和实际意义。 本课题研究目的：1、观察激光诱导VSMC凋亡的形态学及生物化学特性的改变；2、筛选出适当的诱导VSMC凋亡的激光照射剂量，了解激光诱导VSMC凋亡的剂量规律；3、观察细胞的增殖代谢状态和细胞周期时相、增殖细胞核抗原（PCNA）、以及c-myc、bcl-2 mRNA表达量对激光诱导VSMC凋亡率的影响；4、观察激光照射对细胞增殖代谢状态的影响，并通过观察激光照射对增殖细胞核抗原（PCNA）及对p53、c-myc及bcl-2 mRNA表达的影响，探讨激光照射诱导VSMC凋亡、抑制其增殖的机制，为进一步的在体研究及建立激光在血管内局部照射防治再狭窄的方法提供理论依据。 一、铜蒸气激光照射诱导VSMC凋亡的形态学、生物化学以及分子生物学研究 组织贴块法培养兔胸主动脉SMC，实验取第四代离体培养之VSMC。1、在光学显微镜及透射电镜下观察到经激光照射后VSMC呈现细胞体积变小、染色质浓缩、边集，胞质、胞核固缩，凋亡小体形成等典型的凋亡细胞形态学改变。2、激光照射后VSMC DNA电泳分析结果表明激光照射组出现特征性的凋亡 DNA条带。3、经功率密度为 300 mwcmZ、能量密度为200J／cm‘的激光照射后 24h，流式细胞仪oCM）及 TUNEL法检测 VSMC的凋亡率分别为O．1土8．9）％和O0．0土2．8％卜 明显高于对照组［凋亡率为O＊土3．7）％］。 二、铜蒸气激光诱导血管儡鹏凋亡的照光剂量的筛选及剂量规律研究 以不同照光剂量的铜蒸气激光照射VSMC，照光后24h采用TUNEL法检测各组细胞凋亡率。结果显示：1、各照射组凋亡率均较对照组明显增高O＜0刀匀，当激光剂量为功率密度300mWCm＼ 能量密度200J／cm‘时VSMC凋亡率达到（ O土2．8）％，高于其他照射组o＜0刀5卜2、能量密度与＊S＊C凋亡诱导率之间的关系：在能量密度 100wt00Jfom’范围内，激光的功率密度为 100thw儿m时，随激光能量密度的增加，细胞的凋亡诱导率无明显变化…＞0刀5）；激光的功率密度为200mwtamZ或300mw／cmZ时，随激光能量密度的增加，凋亡率逐渐升高O＞0刀5卜 当能量密度达到200卫口n‘时凋亡率最高，以后逐渐下降。3、激光功率密度与VSMC凋亡诱导率之间的关系：能量密度为 100J／Cin‘时，100niw尔tti‘及 200ttiWCtti‘照射组 VSMC的凋亡率无显着性差异…＞0D5卜而功率密度 300mwtom‘照射组 VSMC凋亡率明显高于前两者…＜0．05）；能量密度分别为200Mm‘，叨＊Mm‘，400Mm’时，在实验所采用剂量范围内，V＊＊C凋亡率随激光功率密度的增加而升高…功．05X4、从实验所采用的照射剂量范围及温度实验之结果分析，激光诱导VSMC凋亡是细胞发生光化学反应的结果。 叁、铜蒸气激光诱导血管平滑肌细胞凋亡的影响因素的研究 VSMC同步化后，随机分为3组：①10％新生牛血清组＊0％NCS卜②PDGF组＊＋20ng／ml PDGF），③40％FBS组。各组分别加入相应的生长因于，16J 后，MTT法检测细胞增殖代谢状态，流式细胞仪检测细胞周期分布情况，兔疫组化法检测 PCNA的表达情况，逆转录FCR（RTICR）法检测细胞内原癌基因c－myc、hcf上 的mRNA表达情况，以功率密度300mw／cm’，能量密度 200J／cm‘激光照射备组 VSMC，照光后 24h TUNEL法检测各组细胞凋亡率，分析各影响因素与VSMC凋亡诱导率之间的相关 XI D ＼，－性，表明细胞的增殖代谢状态、PCNA阳性表达率、S＋GZ／M期细胞百分数、c，myc、bclZ的mRNA表达量均与VSMC激光凋亡诱导率之间呈不同程度的正相关，而G广G；期细胞百分数与VSMC的凋亡诱导率呈明显负相关。 四、激光照射对 VSMC增殖代谢及对 c－myc、bel－2及 p53 mRNA表达的影响 铜蒸
方立[10]2010年在《内皮祖细胞对血管平滑肌细胞增殖与表型转化的抑制作用及其机制研究》文中指出第一章内皮祖细胞与血管平滑肌细胞共培养条件下内皮祖细胞对血管平滑肌细胞增殖的影响研究背景：近年来大量研究提示内皮祖细胞(endothelial progenitor cell, EPCs)能够延缓高血压、冠心病、血管成形术后再狭窄等血管增殖性疾病血管重塑的进程。鉴于血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells, VSMCs)的增殖是形成高血压、冠心病、血管成形术后再狭窄等心血管疾病的共同细胞病理基础之一,本实验拟从细胞水平探讨共培养体系下EPCs对大鼠VSMCs增殖的影响。方法：采用3%明胶沉降红细胞及密度梯度离心法分离人脐血单个核细胞,利用内皮生长培养基(Endothelial growth medium-2,EGM-2,含EPCs分化所需各种生长因子)进行培养,诱导单个核细胞贴壁并向EPCs分化；Dil-ac-LDL和FITC-UEA-1荧光双染色鉴定正在分化的EPCs;流式细胞仪和间接免疫荧光法检测EPCs干细胞分子标志CD34／CD133以及内皮细胞分子标志FLK-1/VWF/CD31/ VE-cadherin/CD 105/CD 146;采用Transwell培养板建立早期EPCs和VSMCs共培养模式,20%FBS诱导VSMCs增殖,利用BrdU标记和蛋白定量法检测血管平滑肌细胞DNA和蛋白合成能力,观察共培养条件下EPCs对VSMCs增殖的影响。结果：从人脐血单个核细胞成功分离培养EPCs,早期EPCs和VSMCs共培养12,24,48和72h时,血管平滑肌细胞DNA和蛋白合成能力均较对照组明显降低(P<0.05)；与此类似,流式细胞术结果显示共培养组VSMCs细胞周期中S期细胞所占百分率较对照组显着降低(P<0.05),而细胞周期中G1期细胞所占百分率均相应高于对照组(P<0.05),其中均以48h抑制效果最明显。结论：共培养条件下早期EPCs能够抑制血管平滑肌细胞DNA和总蛋白的合成,其机制可能与早期EPCs通过阻滞细胞周期进程抑制VSMCs的增殖有关。第二章内皮祖细胞对AngⅡ诱导的血管平滑肌细胞增殖与表型转化的抑制作用研究背景：VSMCs表型转化是高血压、冠心病和血管成形术后再狭窄等心血管疾病VSMCs增殖和迁移的关键性起始步骤。病理条件下VSMCs的增殖和表型转化受到多种血管活性物质和细胞因子的调控,其中AngⅡ诱导的VSMCs增殖和表型转化在心血管疾病的发生、发展中起着非常重要的作用。为了进一步阐明EPCs对VSMCs病理性增殖和表型转化的抑制作用及其机制,本研究拟采用AngⅡ刺激VSMCs后,观察内皮祖细胞条件培养基对VSMCs增殖、表型转化及其信号转导通路的影响。方法：分别制备早期EPCs条件培养基(E-EPC-CM)、晚期EPCs条件培养基(L-EPC-CM)以及人脐静脉内皮细胞条件培养基(HUVEC-CM)后,采用BrdU标记法、蛋白定量、MTT以及流式细胞术分析E-EPC-CM、L-EPC-CM、HUVEC-CM对AngⅡ诱导的VSMCsDNA合成能力、细胞总蛋白含量、细胞存活率、细胞周期进程以及VSMCs收缩表型标志基因平滑肌α-肌动蛋白(α-smootn musle actin,α-SM-actin)和合成表型标志基因骨桥蛋白(osteopontin, OPN)表达变化的影响；进一步采用RT-PCR和Western-blot观察E-EPC-CM、L-EPC-CM、HUVEC-CM对AngⅡ诱导的VSMCs MAPK (P38、JNK、ERK活化)和NF-κB(P65活化)信号通路以及原癌基因c-myc、c-fos表达的影响。结果：AngⅡ(10-6mmol/L)诱导VSMCs增殖48h后,血管平滑肌细胞DNA合成能力、细胞总蛋白含量、细胞存活率均较对照组明显增加(P<0.05)；细胞周期中S期细胞所占百分率较对照组显着增加,G1期细胞所占百分率均相应较对照组减少(P<0.05);α-SM-actin mRNA和蛋白表达明显减少,而OPN mRNA和蛋白表达明显增加(P<0.05),提示VSMCs从收缩表型向合成表型转化；P38、JNK. ERK、P65活化以及原癌基因c-myc、c-fos的表达均较对照组显着增加(P<0.05)。E-EPC-CM、L-EPC-CM、HUVEC-CM预处理后能够显着抑制AngⅡ诱导的VSMCs DNA合成能力、细胞总蛋白含量、细胞存活率的增加以及阻滞VSMCs从Gl期向S期的转化；并且抑制VSMCs从收缩表型向合成表型转化,其中均以E-EPC-CM的抑制效果最明显(P<0.05)。同样E-EPC-CM也抑制了AngⅡ诱导的P38、JNK、ERK.P65的活化以及c-myc、c-fos的表达(P<0.05)。结论：EPCs能够抑制AngⅡ诱导的VSMCs病理性增殖和表型转化,其机制可能与其抑制MAPK和NF-κB信号通路的活化以及原癌基因c-myc、c-fos的表达有关。第叁章降钙素基因相关肽介导内皮祖细胞抑制血管平滑肌细胞的增殖与表型转化研究背景：EPCs许多生物学功能主要都是通过其旁分泌功能而实现的,研究表明降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide, CGRP)能够显着抑制AngⅡ等诱导的VSMCs增殖和表型转化,已有研究证实EPCs(主要是早期EPCs)能够合成并分泌CGRP。前一章研究已证实EPCs可抑制AngⅡ诱导的VSMCs增殖与表型转化,那么EPCs通过旁分泌释放的CGRP是否参与这一过程值得进一步探讨。因此,本研究拟初步探讨CGRP在EPCs抑制AngⅡ诱导的VSMCs增殖与表型转化过程中的作用和可能的分子机制。方法：采用ELISA和RT-PCR检测EPCs和脐静脉内皮细胞CGRP的表达情况,对E-EPC-CM采取CGRP抗体封闭和CGRP受体阻断策略后,观察E-EPC-CM对AngⅡ诱导的VSMCs的增殖、表型转化及其MAPK、NF-κB信号转导通路和原癌基因c-myc、c-fos表达的影响。结果：早期EPCs能够表达并分泌高浓度的CGRP,并且显着高于晚期EPCs和HUVEC; CGRP阻断后,E-EPC-CM对AngⅡ诱导的VSMCs DNA合成能力、细胞总蛋白含量、细胞存活率、细胞周期进程以及表型转化的的抑制作用均较对照组明显降低(P<0.05)；并且对MAPK(P38. JNK、ERK)、NF-κB(P65)信号转导通路的活化以及原癌基因c-myc、c-fos表达的抑制能力也较对照组明显降低(P<0.05)。结论：EPCs通过旁分泌CGRP抑制AngⅡ诱导的VSMCs增殖与表型转化。
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