冷萍 田烨
永顺县疾病预防控制中心 湖南永顺 416700
【摘 要】目的：探究胶体金免疫层析法试纸条快速检测霍乱弧菌的灵敏性及临床意义。方法：选取2015年1月～2017年12月间因疑似霍乱弧菌感染而前来我院就诊的134例患者的粪便样本作为研究对象，所有样本均分别进行血清凝集试验以及胶体金免疫层析法试纸条试验，以血清凝集试验作为诊断金标准来检测胶体金免疫层析法试纸条对霍乱弧菌的灵敏性。结果：134例样本中，胶体金免疫层析法试纸条检测结果为阳性27例，远远高于传统培养分离的15例，两组检出率的比较，差异具有统计学意义（P<0.05）。以传统分离培养作为金标准，结果显示胶体金免疫层析法试纸条的检测灵敏度为15/（15+0）×100%=100.00%，特异度=107/（107+12）×100%=89.92%。结论：胶体金免疫层析法试纸条在检测霍乱弧菌工作中，具有快速、准确和特异性高的优势，有利于临床诊断和治疗方案的快速实施，避免了传染的扩散。
【关键词】胶体金免疫层析法试纸条；快速检测；霍乱弧菌；灵敏性；临床意义
[Abstract] objective：to explore the colloidal gold immune chromatography test paper strip rapid detection sensitivity and clinical significance of vibrio cholerae. Selection methods：from January 2015 to December 2017 to come to our hospital because of suspected cholera vibrio infections between the stool samples from 134 patients as the research object，all samples are conducted respectively the serum agglutination test and colloidal gold immune chromatography test paper test，serum agglutination test as the diagnostic gold standard to test article colloidal gold immune chromatography test paper to the sensitivity of vibrio cholerae. Results：134 cases of samples，colloidal gold article immune chromatography test paper test result is positive 27 cases，much higher than traditional separation of 15 cases，the comparison of two groups of detection rate，statistically significant difference（P < 0.05）. Separation in the traditional culture as the gold standard，the results show that the colloidal gold immune chromatography test paper of the detection sensitivity of 15 /（15 + 0）x 100% = 100.00%，specific = 107 /（107 + 12）x 100% = 89.92%. Conclusion：colloidal gold immune chromatography test paper strip in the detection of vibrio cholerae in work，has the advantages of quick，accurate and high specificity for the rapid implementation of clinical diagnosis and treatment，to avoid the spread of the infection.
[Key words] colloidal gold immune chromatography test paper；Rapid detection；Vibrio cholerae. Sensitivity；Clinical significance
霍乱是一种由01群和0139群霍乱弧菌所导致的严重的世界性的恶性传染病，具有强烈的爆发性和流行性，感染者主要表现突发急性腹泻、呕吐，严重者甚至出现血压下降以及脉搏细数等现象，具有较高的死亡率[1]。其中01群已经在世界上导致了7次大流行，而0139群目前也逐渐成为优势菌株，因此对霍乱弧菌的检测和防疫等工作受到世界各国的重视[2]。在我国也将其列入了法定的甲类传染病，如何快速对疑似霍乱患者进行确诊和治疗，避免更大范围的传染出现，从而有效确保患者身心健康以及公共卫生安全，已经成为当下亟待解决的关键问题[3]。胶体金免疫层析法试纸条是目前临床使用较为广泛的检测方法之一，为进一步考证该方法的诊断灵敏性，我们特开展了本次研究，现总结报告如下。
1 材料与方法
1.1材料
选取2015年1月～2017年12月间因疑似霍乱弧菌感染而前来我院就诊的134例患者的粪便样本作为研究对象，所有患者均因突发腹泻且常规治疗效果不佳而前来就诊，经问诊得知患者有在疫区生活或疑似接触疫水史。排除标准：①严重胃肠功能紊乱而致腹泻者；②食物中毒致腹泻者。将收集的粪便样本均加水振荡均匀后取10ml置于标记好的试管内备用。
1.2 试剂
郑州万泰生物科技有限公司生产的01/0139群霍乱弧菌快速检测试剂盒（胶体金法）；中国药品生物制品检定所提供的霍乱01群多价、小川型、稻叶型以及0139群诊断血清；北京路桥技术责任有限公司提供的碱性蛋白冻水和庆大霉素培养基。
1.3 方法
1.3.1水样增菌 将备用样本液加入事先调配好的pH值在8.4～9.2的450mL烧瓶内，再加入50mL的10倍浓缩碱性蛋白冻水以及0.3mL的1%亚碲酸钾溶液。37℃过夜培养后，利用无菌棉签再挑取适量增菌液转种于碱性蛋白冻水，37℃培养6～8h。
1.3.2 血清凝集试验 参考刘翔[4]等文献报道中的方法进行。
1.3.3 胶体金试纸条检测法 用试剂盒配套的吸管吸取3滴增菌液样本，系数滴加到试纸条的白色加入端，2～15min后观察试纸条变化情况。其中若检测线和质控线位置均无红线出现者视为无效；若检测线和质控线位置都出现 红线视为阳性；若只有质控线位置出现红线则视为阴性。
1.3统计学处理
应用SPSS 19.0版软件对本次研究数据进行统计分析，n或%表示计数资料，采用x2检验；以P<0.05为具有统计学意义。
2结果
3 讨论
对于霍乱弧菌的检测，其中应用最早也是最为广泛的便是传统分离培养后进行血清凝集，不可否认该方法具有较高的诊断灵敏度和特异性较高，但缺点也是非常明显的：过程繁杂且耗时较长，这给临床的诊断与预防工作带来了极大的不便；而且容易受外界细菌或杂志的干扰，从而影响诊断结果的准确判断[5]。随着医学设备的更新和进步，PCR技术的出现大大缩短了传统培养的时间，使其降低到3h即可，但是新技术的缺点是无法保存致病菌的菌株、对实验室环境和设备的要求较高、而且检测费用不菲，实际应用难以全面推广和普及。
事实上对于传染病的检测预防和诊断治疗过程中，除了要求准确率之外，还对诊断时间有着较高的要求，必须做到快速反应从而最大限度地降低传染率。本研究所采取的胶体金免疫层析法试纸条，是事先将相应的抗原或抗体以条带状形式固定在膜上，再将胶体金标记抗体或单克隆抗体吸附在结合垫上，最后利用抗原抗体特异性结合的免疫反应原理，在检测线处形成抗体-待测抗原-金标抗体的复合物，而在对照线上形成抗金标抗体-金标抗体复合物，因此方便检测人员直径通过肉眼就能有效辨别霍乱弧菌是否存在[6]。该技术不仅便于携带和使用，而且又具有较高的准确性和特异性，本研究表1结果显示胶体金免疫层析法试纸条的检测阳性率显著高于传统血清凝集试验，而且准确性和特异性分别达到了100.00%和89.92%，充分证明了胶体金免疫层析法试纸条法在快速检测霍乱弧菌上具有较高的实用价值。
综上所述，对于霍乱弧菌的检测，利用胶体金免疫层析法试纸条不仅具有快速、准确和特异性高，而且有利于临床诊断和治疗方案的快速实施，有效保障了人民群众的健康。
参考文献：
[1]刘名根，涂珊，舒惠嫦，等. 奉新县1例霍乱疫情流行病学调查及应急处置报告[J]. 中国预防医学杂志，2016，17（01）：78-80.
[2]王鹏. 2005-2014年宿州市霍乱流行病学分析[J]. 中国农村卫生事业管理，2015，35（07）：902-904.
[3]郭惠，杨晋川，王路梅，等. 23起疑似霍乱疫情的快速诊断和分子流行病学分析[J]. 中华全科医学，2015，13（09）：1393-1395.
[4]中华人民共和国卫生防疫司. 《霍乱防治手册》[M].第五版. 中华人民共和国卫生部防疫局.1999.
[5]陈福辉，杨梦，刘晓青，等. 胶体金免疫层析法应用于环境水体中霍乱检测的效果评价[J]. 现代预防医学，2015，42（03）：420-422.
[6]刘江，孙永，余寿杰，等. 淮南市O139霍乱疫情3种快速检测方法的应用比较及菌株相似性分析[J]. 中国卫生检验杂志，2015，25（01）：47-49.
论文作者:冷萍,田烨
论文发表刊物:《中国蒙医药》2018年第2期
论文发表时间:2018/6/4
标签：层析论文; 霍乱论文; 弧菌论文; 胶体论文; 试纸论文; 免疫论文; 快速论文; 《中国蒙医药》2018年第2期论文;