艾滋病初筛实验室检测样品的规范化要求论文_杨志强

艾滋病初筛实验室检测样品的规范化要求论文_杨志强

杨志强

艾滋病检测最常用的样品是血液,包括血清、血浆、全血和用全血制备的细胞、干血斑。唾液或尿液有时也可以作为测试样品,但目前极少使用。样品采集、运送和保存涉及面较广,与检测结果有一定关系,所以制定规范化要求是非常必要的。

血清样品采集和处理

对于艾滋病和HIV感染的诊断,主要采用血清样品检测HIV抗体。可用一次性注射器(或真空采血管)无菌抽取5~10ML(根据需要确定采样量)静脉血,室温下自然放置1~2h,,待血液凝固、血块收缩后用3000rpm,离心15分钟,吸取血清进行HIV抗体检测。如果当天不能进行检测,应将血清样品置2~8℃冰箱保存备用。

快速检测试剂检测HIV抗体,也可以用末梢全血:成人和1岁以上儿童可选择中指、无名指或食指采集;1岁以下儿童可采用足踵采血。用75%医用酒精或碘伏消毒采血局部皮肤,用无菌纱布擦掉第一滴血。用EDTA毛细管吸取血样时避免气泡进入毛细管。采血结束后,局部必须认真消毒,彻底止血,采血完成后的穿刺针头必须丢弃在利器盒里,严防职业损伤。

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根据实验项目要求选用适当的抗凝剂,采集用于CD4+/CD8+T淋巴细胞测定的样品,可选用EDTA或肝素或柠檬酸钠;HIV病毒分离、核酸定性/定量检测可选用EDTA或柠檬酸钠 。

样品采集后应在规定时间及时送到实验室,避免因采集不当、时间延缓等因素而影响检测结果的真实性,采集的抗凝全血应在4-8h以内分离。分离后将样品放在﹣20或﹣70℃冷冻。

对所有样品进行编号,写明日期和收集时间。

样品的保存

用于抗体检测的血清或血浆样品,应存放于﹣20℃以下,短期(1周)内进行检测的样品可存放于2~8℃.HIV检测阳性反应血清样品保存时间至少十年。HIV检测的阴性血清样品是否需要保存和保存要根据不同情况而定。用于CD4+/CD8+T淋巴细胞测定的样品不能长期保存,样品采集时间超过48h则不可检测。

由于HIV检测阳性反应血清样品都保存在艾滋病检测确认实验室,因此,在HIV检测阳性反应血清样品较多的地区,艾滋病检测确认实验室应根据需要配备﹣20℃以下的低温冰箱和﹣80℃的超低温冰箱,设置血清库。

样品的运送

实验室间传递的样品应符合生物安全要求,样品专人专送。应采用WHO提出的三级包装系统。第一层容器:装样品,要求防渗漏。样品应置于带盖的试管内,试管上应有明显的标记,试管上应标明样品的唯一性编号或受检者姓名、种类和采集时间。在试管的周围应垫有缓冲吸水材料,以免碰碎。随样品应附有“样品的唯一性编号”相对应的送检单。送检单应标明受检者姓名、样品种类等信息,并与样品分开放置。第二层容器:要求耐受性好、防渗漏、容纳并保护第一层容器,可以装若干个第一层容器。将第一层容器装入专用带盖的第二层容器,容器的材料要易于消毒处理。在第三层容器外面要贴标签(注明数量、收样和联系方式)。

特殊情况下如需对个别样品进行复测,可以用特快专递形式投寄,但必须按三级包装系统将盛样品的试管包扎好,避免使用玻璃容器,以保证不会破损和溢漏,运送感染性材料必须有记录。

样品的接受

含有感染性样品的包裹必须在具有处理感染设备的实验室内经过培训的、穿戴防护衣的工作人员打开,用后的包裹应进行消毒。核对样品与送检单,检查样品管有无破损和溢漏。如发现溢漏应立即将尚存的样品移出,对样品和盛器消毒,同时报告实验室负责人和上一级实验室技术人员,检查样品的状况,记录有无严重溶血,微生物污染。如果污染过重或者认为样品不能被接受,则应将样品安全废弃。并要将样品情况立即通知送样人。打开标本容器时要小心,以防内容物泼溅。样品处理时若内容物有可能溅出,应在生物安全柜中戴手套进行。同时戴口罩、防护眼镜,以防皮肤或粘膜污染。接受样品时应填写样品接收单,检查有无不合格样本并记录,同时签名。

参考文献

[1]全国艾滋病检测技术规范.全国艾滋病检测技术规范[M].2004,北京:人民出版社.

[2]陈宇梅主编.卫生检测人员上岗培训[M].2004.

[3]祁国明主编.全国病原微生物实验室生物安全[M].2006,北京:人民出版社.

论文作者:杨志强

论文发表刊物:《中华临床医师杂志》(电子版)2016年2月第4期

论文发表时间:2016/7/15

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