幸兵[1]1998年在《逆转录病毒载体介导IL-4基因治疗大鼠脑胶质瘤的实验研究》文中指出胶质瘤是一种严重影响人类健康的恶性肿瘤，具有易复发、难根治的特点，对于多种治疗方法如手术、放疗和化疗效果均不理想，这促使人们探讨其它的治疗途径和方法，生物治疗就是近年来的研究热点之一，而以增强机体免疫功能为原理的肿瘤免疫基因治疗的研究为最多。目前的免疫基因治疗研究又多集中于细胞因子基因治疗。在以往的研究中，已经发现多种细胞因子具有一定的抗肿瘤作用，如IL-2、TNF、IFN-γ等。IL-4是一种对于许多类型细胞具有多种生物活性的细胞因子。为了探索一条IL-4基因治疗胶质瘤的实验方法，了解胶质瘤浸润性生长的特点及转基因瘤细胞的体内、外生长特性和致瘤性的变化，首先需要获得能稳定表达目的基因的转基因细胞株。 本研究以逆转录病毒做为载体，通过磷酸钙和脂质体转染的方法，分别将含有报告基因LacZ和细胞因子mIL-4基因的重组逆转录病毒载体BAG和pXTIL-4转染辅助包装细胞Ψ2，经G418筛选二周后，获得抗药性细胞克隆一—Ψ2BAG和Ψ2IL-4，继而用其病毒上清感染C6胶质瘤细胞，得到C6BAG和C6IL-4。体外实验表明，转基因细胞C6BAG经反复冻存传代(＞10代)，培养的细胞经X-gal染色后仍能稳定表达LacZ基因产物——β-半乳糖苷酶，细胞均染成蓝色。通过ELISA检测到转基因细胞的病毒上清中IL-4的表达含量，Ψ2IL-4和C6IL-4分别为780和570pg／ml．10~6 cells／48小时。包装细胞Ψ2BAG和Ψ2IL-4病毒上清的病毒滴度分别为1.2×10~5CFU／ml和1.4×10~5CFU／ml，病毒上清经过超速离心、沉淀浓缩，病毒滴度能够提高3～4倍。通过MTT法证实了转有IL-4基因的瘤细胞或包装细胞的病毒上清能促进体外培养的大鼠周
冷怀明[2]2004年在《第三军医大学学报 2004年第26卷总目次》文中认为专家论坛 疟原虫和蚊相互关系研究进展 (黄复生 ) (6) :467 急性呼吸窘迫综合征研究进展 (钱桂生 ,王建春 ) (1 0 ) :843 直肠内脱垂外科治疗 (刘宝华 ) (1 2 ) :1 0 31 结肠慢传输性便秘的临床进展 (张连阳 ) (
参考文献：
[1]. 逆转录病毒载体介导IL-4基因治疗大鼠脑胶质瘤的实验研究[D]. 幸兵. 中国协和医科大学. 1998
[2]. 第三军医大学学报 2004年第26卷总目次[J]. 冷怀明. 第三军医大学学报. 2004