邵阳市中心医院 湖南邵阳 422000
摘要：目的：初步探讨四逆散传统饮片汤剂和代颗粒汤剂作用于肝损伤小鼠的药效学研究。方法：选择SPF级昆明种健康雄性小鼠，分为3组。对每组小鼠尾静脉注射粉刺杆菌20mg/kg生理盐水溶液，每日注射1次，连续给予3天。B组在注射粉刺杆菌的同时每日给予600 mg/g四逆散传统饮片汤剂，治疗3天。C组在注射粉刺杆菌的同时每日给予600 mg/g四逆散配方颗粒汤剂，治疗3天。对比三组治疗前及治疗后谷丙转氨酶、谷草转氨酶水平。结果：A组、B组、C组治疗前谷丙转氨酶、谷草转氨酶结果比较无差异（P>0.05）；B组、C组治疗后谷丙转氨酶、谷草转氨酶结果比较无差异（P>0.05）；A组治疗后谷丙转氨酶、谷草转氨酶明显高于B组、C组，结果比较有差异（P<0.05）。结论：本次研究认为四逆散传统饮片汤剂和代颗粒汤剂对粉刺杆菌造成的肝脏损伤小鼠模型有较好的保护作用。
关键词：四逆散；饮片汤剂；代颗粒汤剂；肝损伤模型
[Abstract] Objective：Preliminary Study on the traditional herbs decoction and granule decoction of Sini San on the mice of liver injury. Methods：SPF KM healthy male mice were divided into three groups. Each group of mice were injected by 20mg /kg acne bacilli normal saline solution once a day and continued for 3 days. Group B were injected by 20mg/kg acne bacilli normal saline solution and administered 600 mg/g Sini San traditional herbs decoction for three days. Group C were injected by 20mg/kg acne bacilli normal saline solution and administered 600 mg/g Sini San granule decoction for 3 days. Compared the levels of alanine aminotransferase and aspartate aminotransferase among the three group before and after the treatment. Results：The levels of group A，group B，group C of ALT and AST showed no significant difference before treatment（P> 0.05）；The levels of Group B，group C of ALT and AST showed no significant differences after treatment（P> 0.05）；the levels of A group of ALT and AST was significantly higher than group B and group C，the result showed a significant differences between the two group after treatment（P <0.05）. Conclusion：The traditional herbs decoction and granule decoction of Sini San both are effective on improving the liver function in liver-injury mice model．
[Key words] Sini San；traditional herbs decoction；granule decoction；liver-injury mice model
四逆散出自《伤寒论》，是广泛应用于临床的基础方剂之一，由柴胡、枳实、白芍、甘草等构成，本方以柴胡为君，柴胡入肝经，为疏肝解郁常用药，故此方有透邪解郁、疏肝理脾功效。药理学指出服用四逆散后可以改善肝中毒小鼠模型的丙氨酸转氨酶水平。目前临床上四逆散以传统饮片汤剂与配方颗粒汤剂两种服用形式［1］。因此本论文通过复制小鼠肝损伤模型，探讨四逆散传统饮片汤剂与代颗粒汤剂对该模型的药效学研究。
1 材料选择
1.1 样品的配制 （1）四逆散传统汤剂由湖南邵阳神农药材有限公司生产，组成成分：柴胡、枳实、白芍、炙甘草各250 g，我院煎药室制备，10倍量水浸泡半小时后煮沸1小时，浓缩，提取 3 次合并滤液浓缩。（2）四逆散配方颗粒由广东一方制药有限公司生产，上述药物以1：1、1：1：1配制成配方颗粒汤剂。
1.2主要试剂 粉刺杆菌由美国Peprotech公司提供；脂多糖由北京燕生科技有限公司提供；谷丙转氨酶、谷草转氨酶检测试剂盒由天根生化科技有限公司提供；环孢菌素 A由河北博海生物工程技术有限公司提供；维生素 C由 美国Cell Signaling公司提供。
1.3 动物 清洁级昆明种健康雄性小鼠，6周龄，体重（21±2）g，购于河北医科大学实验动物中心（实验动物批号：1012133）。小鼠正常饮食，饲养 1 周后进行实验。
1.4 主要仪器 MK3型酶标仪（美国Thermo公司）；高速冷冻离心机（英国TECHNE公司）；天平（海门市其林贝尔仪器制造有限公司）；酸度计（瑞士TECAN公司）。
1.5 研究方法 将小鼠进行随机分组：A组、B组、C组，每组8只。对每组小鼠尾静脉注射粉刺杆菌20mg/kg生理盐水溶液，每日注射1次，连续给予3天。B组在注射粉刺杆菌的同时每日给予600 mg/g四逆散传统饮片汤剂，治疗3天。C组在注射粉刺杆菌的同时每日给予600 mg/g四逆散配方颗粒汤剂，治疗3天。即A组：应激模型组。B组：应激模型组+ 四逆散传统汤剂。C组：应激模型组+四逆散配方颗粒汤剂。在研究第4天时进行麻醉，采集无菌条件下腹主动脉血，血样放入12000rpm离心5min，放入冰箱统一进行保存测定谷丙转氨酶、谷草转氨酶。
1.6 观察指标 对比A组、B组、C组治疗前及治疗后谷丙转氨酶、谷草转氨酶水平。
1.6 统计学处理 实验数据使用SPSS13.0软件统计，结果用x(_)±s表示，多样本均数比较采用单因素方差分析，P<0.05为有显著性差异。
2 结 果
2.1 对比A组、B组、C组治疗前及治疗后谷丙转氨酶、谷草转氨酶水平 A组、B组、C组治疗前谷丙转氨酶、谷草转氨酶结果比较无差异（P>0.05）；B组、C组治疗后谷丙转氨酶、谷草转氨酶结果比较无差异（P>0.05）；A组治疗后谷丙转氨酶、谷草转氨酶明显高于B组、C组，结果比较有差异（P<0.05），见表1。
3 讨 论
中药的传统服药方法以汤剂为主，中药配方颗粒是中药饮片改革创新产物。相对于传统汤剂，中药配方颗粒同样具有“服用安全性好、使用便捷、控制理想 ” 的特点，而且中药配方颗粒保存方便。目前众多文献有关两种制剂的疗效评价报道较少，所得结论并不统一。主要与缺乏稳定的动物模型、实验室测量标准有关［2］。
本次研究中我们选择清洁级昆明种健康雄性小鼠为动物研究对象，具有实验重复性好、模型制作便捷的优点。此外我们使用粉刺杆菌制作肝损伤小鼠模型，粉刺杆菌的抗原可分为菌体抗原（O）和表面抗原（K），后者有抗机体吞噬和抗补体的能力，会攻击肝细胞表明的磷脂酶，引起过氧化酶反应，造成肝细胞线粒体的破裂。谷丙转氨酶、谷草转氨酶是诊断肝脏损伤最常用的酶指标，粉刺杆菌模型实验结果表明明，与A组对比，四逆散配方颗粒汤剂或四逆散传统汤剂均能较好的保护肝细胞的功能［3］。
四逆散，中医方剂名。为和解剂，具有调和肝脾，透邪解郁，疏肝理脾之功效。主治阳郁厥逆证。主要成分为柴胡、芍药、枳实、甘草。柴胡微寒，归肝、胆经。有和解表里，疏肝升阳之功效；芍药具有镇痉、镇痛、通经作用；枳实苦、辛、酸，温。归脾、胃、大肠经。功效主治积滞内停；痞满胀痛；大便秘结，枳实与柴胡配伍，一升一降，加强舒畅气机之功，并奏升清降浊之效［4］。
现代药理学指出四逆散具有以下疗效：（1）使肝纤维化过程中升高的Ⅲ型前胶原、层粘连蛋白含量明显下降，能修复肝损害，缓解减轻肝纤维化的程度。（2）有阻止慢性肝炎肝纤维化的进展和促进肝内增生的纤维组织降解的作用。（3）同时通过提高胶原酶活性，促进胶原降解及肝细胞再生［5］。（4）影响免疫细胞活化，移动及杀伤能力，发挥改善细胞免疫性肝损伤的作用。
本次研究发现A组、B组、C组治疗前谷丙转氨酶、谷草转氨酶结果比较无差异（P>0.05）；B组、C组治疗后谷丙转氨酶、谷草转氨酶结果比较无差异（P>0.05）；A组治疗后谷丙转氨酶、谷草转氨酶明显高于B组、C组，结果比较有差异（P<0.05）。因此我们认为四逆散传统饮片汤剂和代颗粒汤剂对粉刺杆菌造成的肝脏损伤小鼠模型有较好的保护作用。
参考文献
［1］ 王传晶，黄世领，龚传美.四 逆 方 煎 液 及 醇 提 液 对 四 氯化碳致小白鼠肝损害的影响［J］.解放军医学高等专科学校学报，2012，26（l）：15.
［2］ 王东强.四逆方的保肝作用 及机制研究［D］.天津：天津中医药学院，2013．
［3］ 郭标.四逆方有效成分提取和 成 分 分 析 研 究［D］.成都：成都中医药大学，2012．
［4］ 林渊，周良良，吴水生.对中药汤剂剂型改革 研究的思考［J］.中国实验方剂学杂志，2013，7（5）：264.
［5］ 崔景朝，赵自明.中药配方颗粒研究进展（Ⅰ）—文献综合分析［J］．中国实验方剂学杂志，2011，17（3）：235.
论文作者:罗飞
论文发表刊物:《健康世界》2015年28期供稿
论文发表时间:2016/4/7
标签：转氨酶论文; 汤剂论文; 谷草论文; 小鼠论文; 颗粒论文; 杆菌论文; 粉刺论文; 《健康世界》2015年28期供稿论文;