甘南州舟曲县峰迭新区小蒜坝舟曲县疾病预防控制中心 746300
摘要：目的：规范结核菌抗酸染色操作，提高结核病痰检阳性检出率。方法：总结18年的抗酸染色经验，分析各个染色环节中的注意事项。结果：规范化操作加之探究技巧，达到了质控要求。结论：质控达标，提高了结核菌阳性检出率，发现了更多的传染源，使其得到及时的免费治疗。
【关键题】结核杆菌；抗酸染色；痰检质量
肺结核病是严重危害我国人民群众生命健康的慢性呼吸道传染病，它分布广，传染性强，尤其是痰检涂阳病人是最危险的传染源，那么怎样发现此类病人呢？我国结核病项目中所用的方法是——痰直接厚涂片法抗酸染色（即萋尼氏染色法）查结核菌。此法是结核菌检查的金标法，其简便、经济、检出率高，但在实际工作中要真正达到项目中规定的质控要求却比较困难。本人承担此项工作十年有余，在实际工作中深有体会。就如何提高痰检质量，以下是我近几年的几点工作经验浅谈：
1、痰检人员要有高度的职业素养和奉献精神
众所周知痰是人体的一种分泌物，其很脏，尤其是肺结核病人的痰，粘性大又极具传染性，如果要按质控要求涂成一定厚度、大小均匀的痰膜确实不容易。如果没有一定的职业素养和奉献精神能搞好此项工作吗？
2、痰检人员要稳定
干好任何事都是一个积累过程，痰检工作也一样。本身此项工作又脏又累，又极具传染性，很少有人愿意干，据我所知好多单位的痰检人员最多干一两年就调科了，能坚持干五年以上的人就很少了，只有痰检人员稳定了才能使痰检工作持续健康的发展，才能发现更多的涂阳病人。
3、留取的痰标本一定要合格
这是提高阳性检出率的前提。这就要求门诊大夫在留取标本时要特别强调病人要深咳，尽量咳出肺内粘稠的、干酪样的，甚至带血的脓痰，这 样的痰标本才能防止一些排菌量少且间歇排菌的病人漏掉而出现假阴性。痰液不合格时，要求重新送检，痰量以3-5ML为宜。另外不合格的痰标本就不可能按质控要求涂成具有一定厚度、大小的痰膜。合格的痰标本染色镜检后，可发现大量的脓性炎症细胞、肺上皮细胞。在结核病控制项目中要求每个病人送检三份痰标本，即即使痰、夜间痰、晨痰，每类痰各涂片一张。根据本人在实际工作中发现，三类痰标本中晨痰检出率最高，所以要注意病人一定不要漏掉晨痰。下面我就2013-2015年三年发现的141例涂阳病人中，各类痰的阳性率汇总如下：
4、涂片
这是整个制片过程中最关键的一环，要求痰检人员不怕脏，不怕累，非常细致、耐心的涂片。涂片的时用折断的竹签的茬端尽量挑去可疑性大的脓性或带血的部分，在玻片右侧三分之二交汇处认真涂抹大小直径约为1-2厘米且非常均匀的卵圆形痰膜，痰膜的厚度掌握在能清晰地看见痰膜为好。如有一点零星的组织碎块也不能放过，要把它压碎涂均匀，避免造成脱色困难。本人在涂片染色中发现，在涂好的痰膜上如有一点未涂抹均匀的组织碎块，最终片子染成后，都会留下肉眼可见的红色斑块，造成镜检困难，为质控所忌。此外，有些病人怎么咯也咳不出合格的痰标本，这是我们可以在痰盒底部放一团吸附性较强的餐巾纸，然后倒掉上清液，挑去吸附在纸上的痰标本进行涂片，也可以得到不错的效果。
5、染色
待痰膜自然干燥后（一般约需要30分钟）进行染色。初染时按常规加热染色要比冷染效果好一些。本人曾多次做过对照实验，发现加热染成的片子抗酸菌呈明显的鲜红色，而冷染成的片子有点发暗，造成镜检时抗酸菌难以辨认，易造成假阴性。另外加热时，以石炭酸复红刚冒蒸汽为宜，不要加热之沸腾。这样会造成染液干涸，痰膜碳化，无法读片。复染则易掌握，只要按规范染色就会达到好的效果。染色时间以30秒为宜，不要延长染色时间。这样会遮掩抗酸菌的红色，造成读片困难。此外，本人发现染色的时间受一定室温的影响。温度高时着色快，反之则着色慢，故应随时随地灵活的缩短或延长染色时间。
6、脱色
这是整个抗酸染色中最难把握的一环。因为此法为厚痰膜涂片，痰膜与染液结合的较深，脱色时间太短则痰膜上的复红无法脱掉而导致染好的片子上留下红色斑块，造成读片困难且不符合项目质控要求。反之脱色时间太长，则影响抗酸菌的抗酸性（结核菌的抗酸性也有一定的极限，是相对的，而不是绝对的），而最终导致抗酸菌发暗，甚至无法辨认，本人在长期染色中总结经验，打破常规，利用多次水洗多次脱色的方法进行脱色。即脱色以后如发现红色尚未脱去，再进行水洗，水洗后再加盐酸酒精脱色，反复几次，直至痰膜放到白色背景上 无明显红色为止，这样就缩短了脱色时间，且最终染成的片子效果良好。
7、镜检
这是最后一关，但也绝不可忽视。镜检的时候一定要仔细、认真的读完全片。尤其是“1+”的病人，全片中只有几条抗酸菌，稍不留神就会漏掉造成假阴性。
以上是我十几年的工作经验总结，我认为只要痰检人员稳定，具有良好的职业素养和奉献精神，能严格按痰检手册规范，熟练掌握好我所阐述的这几个环节，定能搞好痰检质量，提高痰检阳性检出率，及时发现更多的结核病传染源，使他（她）们很快得到合理、有效的治疗，切断了传染源，保护了健康人群。
参考文献：
[1]赵雁林、刘宇红等主编的结核病防治规划痰涂片镜检标准及质量保证手册检质量手册
[2]王克俭等主编的甘南结核病防治
[3]杨枢敏主编的甘肃结核病防治手册
作者简介：刘书代，男，藏，47岁，舟曲县疾病预防控制中心，主管检验师，检验科科长，检验。
论文作者:刘书代
论文发表刊物:《健康世界》2017年24期
论文发表时间:2018/1/19
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