摘要：目的：探讨淋球菌/沙眼衣原体抗原二联检测试剂盒（乳胶免疫层析法）（以下简称淋球菌/衣原体二联检测试剂）检测女性宫颈分泌物中淋球菌/沙眼衣原体的临床应用。方法：收治疑为淋球菌/沙眼衣原体女性感染者558例，对其宫颈分泌物标本进行检测。淋球菌以培养法为金标准，沙眼衣原体以杭州艾康沙眼衣原体免疫层析试剂为对照，不符的标本用PCR确认，进行评价淋球菌/衣原体二联检测试剂的临床性能。结果：淋球菌/衣原体二联检测试剂检测淋球菌和沙眼衣原体的敏感性分别为96.88%和94.12%，特异性分别为95.75%和99.15%，准确性分别为95.88%和98.39%。结论：淋球菌/衣原体二联检测试剂操作简单、快速、具有较高的特异性、敏感性和有效性，适宜基层计生站孕前检测和妇保院普查应用。
关键词：淋球菌；沙眼衣原体；免疫层析法；培养法
Objective：To explore the clinical application of the combined detection kit of gonococcus and Chlamydia trachomatis antigen（latex immunochromatography）（hereinafter referred to as gonococcus/chlamydia double detection kit）in detecting gonococcus/chlamydia trachomatis in female cervical secretions.Methods：558 women suspected of gonococcal/chlamydia trachomatis infection were examined for cervical secretions.Neisseria gonorrhoeae culture method is the gold standard.Chlamydia trachomatis is compared with Chlamydia trachomatis immunochromatographic reagent in Aikang，Hangzhou.The inconsistent specimens are confirmed by PCR，and the clinical performance of the two reagents for detection of Neisseria gonorrhoeae/Chlamydia trachomatis is evaluated.RESULTS：The sensitivity，specificity and accuracy of gonococcal/chlamydia duplex reagent were 96.88% and 94.12% respectively，95.75% and 99.15% respectively，and 95.88% and 98.39% respectively.CONCLUSION：The gonococcus/chlamydia duplex detection reagent is simple，rapid，specific，sensitive and effective.It is suitable for prenatal detection in primary family planning stations and general survey in gynecological and health hospitals.
Keyword Immunochromatographic Culture of Chlamydia trachomatis from Neisseria gonorrhoeae
淋球菌，学名淋病奈瑟菌，是淋病的病原体；沙眼衣原体是一种细胞内寄生微生物。两种病原微生物引起的泌尿生殖道感染已成为常见的性传播疾病，可引起男性尿道炎、附睾炎、女性宫颈炎、盆腔炎等多种疾病，严重影响生殖健康与孕育，尤其是在病原体与微生物合并感染时可加重疾病的发展并引起其他并发症[1]。另有一些感染的患者还常表现为无临床症状，所以实验室诊断具有重要意义。本文试图通过回顾性采样检测结果统计分析与研究，评价基于彩色乳胶免疫层析技术开发生产的淋球菌/沙眼衣原体二联抗原快速试剂在临床检测男女生殖道分泌物中淋球菌/沙眼衣原体的效果。
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1资料与方法
1.1一般资料2017年12月-2019年3月收治疑似淋球菌/沙眼衣原体感染女性患者558例，年龄18～67岁，排除就诊前2周内有抗生素用药史者标本。
1.2试剂：①淋球菌/沙眼衣原体抗原二联检测试剂盒（乳胶免疫层析法）：由南京黎明生物制品有限公司生产。②淋球菌培养基：由上海科玛嘉微生物技术有限公司生产。③沙眼衣原体免疫层析试剂：由杭州艾康生物技术有限公司生产（衣原体对照试剂）。④沙眼衣原体荧光定量PCR试剂：由广州达安基因股份有限公司生产（衣原体复核试剂）。
1.3仪器：①隔水式电热恒温培养箱：由上海跃进医疗器械厂生产。②ABI7300荧光定量PCR仪。
1.4方法：每个疑似患者取4支拭子，第1支用于淋球菌/衣原体二联检测试剂检测；第2支用于艾康衣原体免疫层析试剂检测；第3支用于淋球菌培养；黎明和艾康衣原体检测结果不一致时取第4支拭子用沙眼衣原体荧光定量PCR试剂进行检测。以上检测均严格按相关产品使用说明书进行操作。
1.5结果判读及统计标准：①淋球菌部分：以淋球菌培养结果为金标准，统计黎明淋球菌免疫层析试剂灵敏度、特异性和准确性。②衣原体部分：若黎明和艾康的衣原体检测结果一致，即以该结果为准，若结果不一致，则以第4支拭子的荧光定量PCR结果为准；统计时，以对照试剂和复核试剂的结果为扩大金标准，统计黎明衣原体免疫层析试剂灵敏度、特异性和准确性。
2结 果
2.1淋球菌二联检测试剂检测淋球菌的敏感性为96.88%，特异性为95.75%，准确性为95.88%。
2.2沙眼衣原体二联检测试剂检测沙眼衣原体的敏感性为94.12%，特异性为99.15%，准确性为98.39%。
3讨 论
据我国目前法定报告，淋球菌和沙眼衣原体感染居性病发病率前列。淋球菌和沙眼衣原体感染可引起男性尿道炎、女性宫颈炎、盆腔炎甚至不孕不育症等，育龄夫妇在怀孕和生产期间若感染淋球菌/沙眼衣原体将严重影响父母和新生儿的健康[2]。因此在计划怀孕夫妇中筛查淋球菌和沙眼衣原体显得尤为重要，尤其在女性患者中，无症状患者比例>60%，仅凭个人感觉，很难及时发现并治疗。
2010年起国家计生委陆续在全国开展孕前优生健康免费检查项目，其中就包含淋球菌和沙眼衣原体的检测。因此项目的实施均在基层计生服务站，故选择适合基层使用的淋球菌/沙眼衣原体检测试剂非常关键。
淋球菌和沙眼衣原体的感染部位均为皮肤黏膜，并不能有效刺激机体产生抗体。因此，检测血清中的淋球菌和沙眼衣原体抗体并不能有效反应被检测者的真实情况[3]。
在基层实际检测中，淋球菌检测通常采用涂片法或氧化酶试条法。但因女性生殖道菌群复杂，世界卫生组织不推荐用该法。又因氧化酶并非是淋球菌所独有的酶，且在操作过程中易受空气中氧气等因素影响而产生假阳性，故氧化酶法只适用于淋球菌培养后菌落的鉴定。目前衣原体检测主要用衣原体免疫层析快速检测试剂，这就导致衣原体和淋球菌检测方法不一样，需要取两支标本分别进行检测，增加了被检测者和检验人员的负担。
在淋球菌/衣原体二联检测试剂中，纯化的淋球菌/沙眼衣原体抗体包被在彩色乳胶上，检测时，当标本中有相应的抗原时，先和包被有淋球菌/沙眼衣原体抗体的彩色乳胶结合，形成抗原抗体彩色乳胶复合物，因层析作用该复合物沿硝酸纤维素膜前移，被固定在该膜检测线上的另一个淋球菌/沙眼衣原体抗体所捕获，形成1条红色的条带。若标本中没有相应的抗原，则不能形成红色的条带[4]。淋球菌/沙眼衣原体二联检测试剂具有操作简单、快速，不需要仪器设备等优点，很适合在基层和门诊现场开展。
淋球菌和沙眼衣原体均侵犯人泌尿生殖道柱状上皮细胞，如男性前尿道，女性宫颈管，感染部位相同，故淋球菌/沙眼衣原体二联检测试剂在1次取样下可同时检测这两种病原微生物。与金标准相比，淋球菌试剂敏感性96.88%，特异性95.75%，准确性95.88%；沙眼衣原体试剂的敏感性94.12%，特异性99.15%，准确性98.39%。可见，该淋球菌/衣原体二联检测试剂具有较高的特异性、敏感性和准确性，对操作人员和设备均无特殊需求，尤其适合广大基层计生服务站和妇保院在普查中推广应用。
参考文献：
[1] Brunham RC，Maclean IW，Binns B，et al.Chlamydia trachomatis：Its rolein tubal infertility[J].Journal Infectious Disease，1985，152：1275-1282.
[2] Hook EW，Zenilman JM.Gonorrhea in Infectious Diseases[M].SecondEdition，Saunders WB，Philadelphia PA，969-974.
[3] Miller MJ，The laboratory diagnosis of Chlamydia trachomatis and genitalmycoplasmas[J].Journal Med Tech，1985，2（8）：507-512.
[4] Gerbase A，Rowley JT，Mertens TE.Global epidemiology of sexuallytransmitted diseases[J].Lancet，351（3）：2-4.
论文作者:刘运杰,王立秋,董皓,王龙龙,潘贺娜,孙海涛
论文发表刊物:《健康世界》2019年4期
论文发表时间:2019/6/6
标签：衣原体论文; 沙眼论文; 淋球菌论文; 试剂论文; 层析论文; 特异性论文; 抗原论文; 《健康世界》2019年4期论文;