（乐山职业技术学院药学系 四川乐山 614000）
【摘要】目的:研究齐墩果酸联合5-Fu对人肝癌细胞Hep3B增殖的影响。方法:观察组细胞予以150μg/ml5-FU及不同浓度的齐墩果酸，对照组予等量培养液，以MTT法检测观察组细胞增殖的抑制情况。结果：齐墩果酸的给药浓度与细胞增殖抑制率大体呈正相关；在5～100μg/ml范围内，随着齐墩果酸的给药浓度的增加,对Hep3B细胞生长的抑制率也增加;而当药物浓度为100～400μg/ml时，细胞生长抑制率呈稳定状态(P<0.05)。结论：齐墩果酸联合5-Fu能够抑制肝癌Hep3B细胞株增殖。
【关键词】齐墩果酸；肝癌细胞Hep3B；5-Fu
【中图分类号】R73 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2015）08-0028-02
中医药在治疗肝癌方面有独特优势，是国内控制肝癌患者病情进展的重要手段之一。有研究者对治疗肝癌的常用中药的有效成分进行分析，发现多数含有齐墩果酸[1]。齐墩果酸可通过抑制肿瘤细胞增殖及诱导其凋亡从而达到抗癌效果[2],本研究拟选用肝癌细胞Hep3B为研究对象,探讨齐墩果酸联合5-Fu对Hep3B细胞增殖的影响。
1.材料与方法
1.1 材料
肝癌细胞株Hep3B由重庆医科大学生命科学研究院提供；
齐墩果酸由成都鑫光生物技术公司提供；
注射用5-Fu由上海旭东海普药业有限公司生产；
MTT、DMSO 为Sigma公司产品；
小牛血清为杭州四季青产品；
RPMI1640为GIBCOBRL公司产品；
酶标仪(SUNRISE,奥地利TECAN公司)。
1.2 方法
1.2.1细胞培养 在恒温37℃的5%CO2的培养箱中，采用PRMI1640及10%胎牛血清对复苏的肝癌细胞Hep3B进行培养。
1.2.2观察组 取对数生长期的Hep3B细胞,接种于96孔培养板,培养24h后弃培养液,分别加入150μg/ml5-FU及不同浓度的齐墩果酸(5、10、20、40、80、100、120、150、200、300、400μg/ml)，分别培养24、48h,每孔加入MTT(5mg/ml)20μl,继续培养4h,弃上清液,每孔加入DMSO 150μl,振摇10min,酶标仪490nm检测吸光度值[D(490)],按公式计算细胞增殖抑制率,抑制率=[1-实验组D(490)值/对照组D(490)值]×100%。
1.2.3对照组 取对数生长期的Hep3B细胞,接种于96孔培养板,培养方法同观察组，加入等体积培养液,并采用同样手段检测吸光度值[D(490)]。
1.3 统计学处理
用SPSS 17.0统计软件分析。计量资料采用t检验。
2.结果
齐墩果酸联合5-Fu对Hep3B细胞的增殖有一定的抑制作用，从结果看，在较低的浓度范围内（100μg/ml以下），齐墩果酸的给药浓度与细胞增殖的抑制作用大体呈正相关；而当药物浓度继续升高时，细胞生长抑制率呈平稳状态(P<0.05)。进一步的24h、48 h药物作用比较表明,作用时间的延长对细胞增殖的抑制作用不明显(P>0.05)。(见表)
3.讨论
5-Fu是临床常用的抗癌药物，但其在临床广泛应用的同时，也同时存在着耐药性越来越严重的隐患。化疗药物的诸多副作用促进了中医药在抗癌领域的兴起。随着对中医药抗癌机制的研究不断深入，越来越多的具有抗癌作用的中药提取物应用于临床。齐墩果酸广泛存在于多种中药材内，目前已有大量研究证实，本品具有护肝、降脂及抗肿瘤等多种功能。
本研究中，我们对齐墩果酸联合5-Fu对Hep3B细胞增殖的抑制作用进行研究，结果表明，齐墩果酸联合5-Fu对Hep3B细胞的增殖有一定的抑制作用，从结果看，在较低的浓度范围内（100μg/ml以下），齐墩果酸的给药浓度与细胞增殖的抑制作用大体呈正相关；而当药物浓度继续升高时，细胞生长抑制率呈平稳状态(P<0.05)。进一步的24h、48h药物作用比较表明,作用时间的延长对细胞增殖的抑制作用不明显(P>0.05)。究其原因，可能是随着给药浓度的增加或给药时间的延长会使细胞产生耐药性，从而影响其疗效。
综上,齐墩果酸可在一定程度上抑制Hep3B细胞的增殖,且在较低的浓度范围内（100μg/ml以下），其抑制作用呈浓度依赖性；较高的给药浓度及较长的药物作用时间对于抗癌效果无显著意义，考虑与肿瘤细胞的耐药性有关[6]。本药与5-Fu联合使用在抑制肿瘤增殖方面有一定效果，在传统化疗药物副作用及耐药性等弊端日益凸显的今天，尤具重要意义，值得推广。
【参考文献】
[1]黄开顺,朱链链,刘丹等.齐墩果酸对肝癌细胞Hep3B增殖和凋亡的作用研究[J].第三军医大学学报,2011,33(5):531-534.
[2]朱链链,徐娇,陈志琼等.齐墩果酸联合5－Fu对A549细胞抑制作用的影响[J].中国急救医学,2015,(z1):69-70.
[3]曹洁,唐金海,侯梅等.FOLFOX4方案治疗结直肠癌患者5-FU稳态血药浓度与不良反应的相关性研究[J].中华肿瘤防治杂志,2011,18(2):134-136.
基金项目：乐山职业技术学院课题
论文作者:朱链链（通讯作者）,李静华
论文发表刊物:《心理医生》2015年8期供稿
论文发表时间:2016/4/25
标签：果酸论文; 细胞论文; 抑制论文; 浓度论文; 肝癌论文; 作用论文; 药物论文; 《心理医生》2015年8期供稿论文;