（广西来宾市武宣县人民医院；广西来宾545900）
[ 中图分类号 ]R2[ 文献标号 ]A[ 文章编号 ]2095-7165（2019）02-0197-02
ABO 血型是临床上最重要的血型系统，在ABO 血型鉴定方法中，血型血清学方法占有重要的地位[1,2]，随着血型鉴定技术的发展，一些新的技术用于ABO 血型鉴定， 使ABO 血型鉴定方法不断取得新的进展[3-8]，目前，我们常规鉴定ABO血型的方法是血清学方法，使用的定型技术是采用单克隆或多克隆抗体与红细胞试验来检测血型中的抗原和抗体，疑难者再加用吸收放散试验[9]。、唾液定型和不规则抗体检测等方法进行检测。用血I清学技术检测ABO血型非常的简单快捷，但仍有一定的局限性。正确鉴定ABO血型是确保临床输血安全的基础[10,11]，本文就ABO血型鉴定实验室检测方法的现状综述如下。
1 ABO 血型鉴定的血型血清学方法
1.1血凝试验
血凝试验是指红细胞和血清中血型抗原和抗体在液体介质中发生肉眼可见的凝集反应，用血凝试验进行ABO 血型鉴定大致包括三种方法：玻片法、试管法及自动化法。玻片法和试管法的实验原理基本相同，二者的共同点是操作简便，但是，与玻片法只做正定型相比，用试管法进行ABO 血型鉴定的正定型和反定型，有了正反定型对照， 避免了因血型抗原或抗体的原因而出现的血型错误，又因为用试管法进行ABO 血型鉴定时，对待测的红细胞进行洗涤稀释（2~5％的浓度），减少了因红细胞浓度太浓而出现的假阳性，传统的血型鉴定玻片法和试管法虽然费时费力、敏感差、操作不易自动化、批量化、结果不易保存，但是，试管法ABO 血型的鉴定因其操作简便、结果准确可靠，目前仍广泛用于ABO 血型鉴定工作中。
1.2 自动化法
自动化法包括微孔板法、微柱凝胶法和全自动血液分析仪法，自动化法借助全自动加样系统进行自动加样，运用凝集试验的扫描酶标仪对实验结果进行自动判读， 试验结果经计算机分析和处理，结果准确、直观、敏感，与玻片法及试管法比较，自动化在工作上实现了标准化、自动化、批量化等优点，有利于实验室的质量控制，提高工作效率。
1.3微柱凝胶法
微柱凝胶法是一种改良的血凝试验， 实验时红细胞抗原与相应抗体的反应在微柱凝胶介质中进行，微柱凝胶具有凝胶分子筛的作用，如果红细胞抗原与相应抗体结合，形成的凝集块经离心后不能通过凝胶分子筛而留在凝胶介质的上层；如果红细胞与抗体没用结合，反应后没有形成凝集块，则离心后红细胞可以通过凝胶分子筛沉淀凝胶层底部，从而达到鉴定ABO血型的目的。微柱凝胶试验省略了洗涤红细胞等操作，工作程序和结果的判读易于标准化，自动化。该实验方法还具有所需标本少、结果准确、抗干扰能力强、溶血、脂血影响少、重复性好等优点，正是由于微柱凝胶试验的以上优点， 该方法已成为发达国家常规的ABO血型鉴定方法，国内也有越来越多的单位用其进行ABO 血型鉴定。
1.4 微孔板法和全自动血液分析仪法
微孔板法联合酶标仪来完成血型鉴定， 全自动血液分析仪采用了CC 图像分析技术和电脑数据处理进行自动分析、判读，做到血型鉴定标准化、批量化，又在同一微孔板内进行正反定型，有利于结果的核对，减少差错的发生。但对溶血，脂血的干扰比微柱凝胶法稍差[12]。
2 ABO 血型的基因分型技术
2.1 ABO 血型基因分型的方法
ABO 血型基因分型的方法有多种,包括PCR-SSP(PCR-序列特异性引物)技术、PCR-SSO(PCR-序列特异性寡核苷酶探针)技术、PCR-SSCP(PCR-单链构象多态性)技术、基因芯片等[13]。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆PCR-SSP 技术针对ABO基因突变位点的不同核苷酸分别设计一系列特异性引物,直接扩增ABO 等位基因片段，该方法具有操作简便、结果直观等优点，已经成为常用的ABO 血型基因分型技术.
2.2 ABO 血型基因分型技术的应用
ABO 血型基因分型技术在血型鉴定中具有广泛的应用,主要涉及以下方面①疑难血型鉴定：ABO血型亚型的鉴定、血型抗原减弱个体的血型鉴定、抗体消失的血型鉴定、获得性B 的鉴定、Cis-AB 的鉴定、孟买及类孟买型的鉴定、血型嵌合体等正反定型不符时的血型鉴定[3,7,8,14]；②直接抗人球蛋白试验阳性的患者血型鉴定；③寻找匹配血型的供者；④亲子鉴定及法医应用等。目前，ABO 血型基因分型技术虽然尚无法取代血型血清学方法,但是,ABO 血型基因分型技术已开辟了人类血型分型的新纪元,并将越来越多的应用于ABO血型鉴定工作[7,8,9,15]。
3 ABO血型鉴定的其他方法
3.1 ABO 血型的ELISA 法检测
利用ELISA 法进行ABO 血型鉴定是基于以下实验技术和原理:酶标单克隆抗体技术,酶联免疫吸附原理和酶与底物反应显色原理。将酶标单克隆抗-A、抗-B试剂与待测标本中的ABO 血型抗原物质反应,然后通过酶与底物作用显色从而鉴定ABO 血型。由于ELISA 法的放大作用,用ELISA 法进行ABO血型鉴定具有高度敏感性。但是,与传统血清学方法比较,ELISA 法用于ABO血型鉴定成本更高,操作更复杂,因而ELISA 法更多用于特殊情况下的血型鉴定。精液中抗血型物质P84是一种性质稳定的物质,仍可以用ELISA 法进行血型鉴定[6],这在法医学上具有重要意义.
3.2 ABO血型的流式细胞术检测
利用流式细胞术也可以进行ABO血型鉴定,其方法和原理是用荧光素标记人源抗-A、抗-B 单克隆抗体，与待测标本中的红细胞反应，然后用流式细胞术检测等侧标本中细胞与抗-A、抗-B 单克隆抗体的结合情况， 从而确定待测标本的ABO 血型.与传统的凝集试验方法比较，用流式细胞术进行ABO 血型鉴定同样是一项成本高、操作复杂的试验。但是，在特殊情况下用流式细胞术进行ABO 血型鉴定显得更为方便,例如用血清学方法进行ABO血型亚型鉴定需作吸收放散试验，实验操作比较繁杂，用流式细胞术进行ABO血型亚型的鉴定就显得快速而简便[4]。另外，利用流式细胞术对孕妇血流中微量的胎儿红细胞进行检测可以实现非侵入性胎儿血型鉴定,同样具有重要的临床意义。
综述参考文献：
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论文作者:陈泽安
论文发表刊物:《医师在线》2019年1月2期
论文发表时间:2019/4/1
标签：血型论文; 鉴定论文; 红细胞论文; 凝胶论文; 方法论文; 技术论文; 抗体论文; 《医师在线》2019年1月2期论文;