（固原市中心血站 宁夏固原 756000）
【摘要】目的：冰冻红细胞解冻去甘油过程中发生溶血原因分析，探讨预防溶血措施，降低血液报废率，珍惜稀有血液资源。方法：查阅和整理分析冰冻红细胞解冻、离心和去甘油全过程记录资料，比对发生溶血与正常的操作人制备记录。结果：本站2007年1月～2015年12月，共制备冰冻红细胞407u，为临床提供333u,库存余70u。在制备过程中发生溶血报废2例（4u），报废率为1.19%，溶血原因可能系操作过程不严谨所致。结论：强化工作人员责任意识，严格遵守操作规程，是防止溶血的关键。
【关键词】冰冻红细胞；去甘油；溶血
【中图分类号】R3 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2016）13-0241-02
近年来，固原市临床RhD(-)患者用血需求量不断增加，RhD(-)红细胞由于库存储备较少，且此类献血者人群在我市只有5‰[1]。加之血液保存期一般仅有35天，所以RhD(-)血液倍显宝贵。为了提高稀有血液使用效率，我们自2007年开始采用国内同行业先进技术，对Rh(-)血液进行冰冻保存，有效期可达10年。开展此项业务以来，在为临床提供和制备过程中先后发生溶血2例，造成4u血液报废，现分析原因如下。
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1.材料与方法
1.1 设备、原辅材料
DH4融浆机、BBS926全自动低速离心机（四川南格尔）、UPS(不间断电源)、P-1000B一次性单采血浆分离器（四川南格尔）、0.9%的生理盐水（1000ml3袋、500ml 2袋）、9%的浓盐水3袋每袋80ml（上述不同浓度的盐水均由四川南格尔生产）、2袋(2u/袋)含40%甘油的冰冻红细胞经40℃水浴融化。
1.2 方法
将深低温（-80℃）保存的冰冻红细胞，置于 40℃融浆机内，轻轻振动使其快速融化，直到冰冻红细胞完全解冻。采用渗透压梯度递减方法洗涤，洗涤液依次为高渗盐水（9%）、混合盐水（0.9%的等渗盐水500ml加9%的高渗盐水80ml）、0.9%的等渗盐水。通过BBS926全自动医用低速离心机程序控制，设备自动完成稀释I→离心→转移→稀释Ⅱ →稀释Ⅲ →离心→转移→二次稀释→离心→洗涤各阶段流程，成品为悬浮红细胞供临床应用 。
2.结果
制备人操作记录显示，此2袋冰冻红细胞均采用渗透压梯度递减洗涤方式，按标准操作规程操作进行洗涤，在洗涤过程排出的废液色泽异常，呈酱油红色，废液袋内充满大量气泡，明显溶血迹象，待成品收集完成后留样离心，外观无红细胞分层，确认细胞完全溶血。
3.讨论
冰冻解冻红细胞在去甘油过程中发生溶血的原因，涉及几个重要环节，如甘油化、冰冻保存、解冻融化、洗涤去甘油过程等。
首先在红细胞甘油化过程中，加甘油的速度、时间及红细胞与甘油是否充分结合均可对细胞膜造成损害而发生不同程度的溶血。甘油化红细胞深低温（-80℃）冰冻保存，是目前能够长期保存红细胞的最好方法，但冰冻红细胞在甘油化处理的整个过程中可导致溶血[2]。红细胞在快速而均匀的进入甘油时基本不出现溶血，但甘油浓度应为35%～40%，而红细胞在45%以上或20%以下的甘油中都会产生不同程度的溶血，因此红细胞在一定的最佳速度下达到最佳甘油浓度并迅速处于细胞内外浓度平衡才不会引起细胞溶血，据实验证实，机制冰冻红细胞加入甘油的速度以100ml红细胞加入57%甘油160ml，3～5min为最好[3]，并配合适当的震荡，以使甘油充分扩散、渗透入红细胞。而我们在制备中甘油化过程是手工操作，加入执行先慢后快，30min之内加完，遇2u红细胞时适当延长时间，由操作者自行掌握。本次发生溶血2例红细胞制备记录中，没有异常操作的登记和叙述，所以很难认为是在甘油化过程中发生溶血，但笔者考虑如果工作人员在冰冻前操作不规范，甘油化后未平衡或缩短平衡时间直接冰冻、冰冻时血袋放置不妥等均可能影响冰冻效果或造成后续过程中发生溶血的因素，应当在冰冻前室温下平衡30min，有利于甘油能更彻底地进入红细胞内，与红细胞更充分地结合，冰冻时血袋应平整摆放，从而在-80℃更好地保护红细胞。避免人为因素造成细胞溶血。
其次，按照血站技术操作规程要求，解冻红细胞时温度应控制在37～40℃为好，温度过高或过低均会造成红细胞破坏，而且在融化时加以轻轻震动血袋使其快速融解。然后在离心过程中离心杯安放不正确，在旋转时可能会损坏离心杯密封环造成旋转不稳发生溶血，如果离心机轴承有缺陷、密封环或润滑剂失效，则可能引起离心杯座发热，也会对细胞造成损害。
通过对冰冻红细胞解冻去甘油过程中发生溶血的原因分析，提示我们应该加强制备过程各环节的质量管理，控制好关键点操作，严格遵守操作规程，强化责任意识，对仪器设备进行日常维护与保养，确保使用效果满意，避免人为因素，造成冰冻红细胞去甘油过程中发生溶血，减少浪费，节约宝贵血液资源。
【参考文献】
[1]董宁.深低温保存RhD(-)血的开展及临床应用[J].心理医生，2015,21（13）：232.
[2]沈武，陆瑶，徐雪瑾等.温度对冰冻红细胞保存的影响[J].临床输血与检验，2005，7（2）：105.
[3]徐树良，王春宁等.冰冻红细胞甘油化适宜速率的研究[J].临床输血与检验，2007，4（2）：9.
论文作者:董宁,郑宏
论文发表刊物:《心理医生》2016年13期
论文发表时间:2016/9/27
标签：红细胞论文; 甘油论文; 冰冻论文; 过程中论文; 发生论文; 盐水论文; 血液论文; 《心理医生》2016年13期论文;