曹亮宋愈通讯作者
南通市第一人民医院眼科江苏南通226000
【摘要】目的:观察人参皂甙Rg3对糖尿病大鼠视网膜厚度的影响。方法:60只Wister大鼠随机分为正常对照组、糖尿病对照组和人参皂甙Rg3治疗组（5mg/kg，02mg/ml），开始治疗8周后光学相干断层成像仪（Optic Coherence Tomograghy,OCT）检测视网膜厚度。结果:正常组大鼠视网膜厚度为（2013±107）μm，糖尿组较正常组增厚，为（2399±101）μm，人参皂甙Rg3治疗组视网膜厚度为（2153±103）μm，与糖尿病组比较有统计学意义（P＜005）。结论:人参皂甙Rg3可以明显减轻糖尿病所导致的视网膜增厚。
【关键词】视网膜厚度;人参皂甙Rg3;糖尿病大鼠
【中图分类号】R5871【文献标识码】B【文章编号】1674-8999(2013)08-0192-01
糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy，DR)是糖尿病的常见并发症，随着我国人民群众生活水平的提高，其发病率和致盲率也呈逐年上升趋势。糖尿病黄斑水肿是造成糖尿病患者失明的主要原因之一。血-视网膜屏障(blood-retinal barrier，BRB)的破坏是其重要病理变化。在糖尿病患者及链脲佐菌素(streptozotocin，STZ)诱导的糖尿病动物模型中都观察到视网膜血管渗透性增加及血管渗漏导致的BRB功能破坏［1］。发病机理可能与VEGF有关［2］。人参皂甙Rg3是从中药人参中提取的有效单体成分，最早用于肿瘤的治疗，近年来，它的抗VEGF活性也逐渐受到关注［1］。本研究拟将人参皂甙Rg3用于糖尿病大鼠模型，观测其对视网膜厚度的影响，以便对临床治疗糖尿病性黄斑水肿提供一定帮助。
1材料和方法
11实验材料
111实验动物：SPF级雄性Wistar大鼠，体重190~210g，由南通大学实验动物中心提供。实验动物在南通大学动物实验中心SPF级饲养区饲养。动物自由饮水进食，铁笼喂养，相对湿度40~70％，室湿保持在18~22℃，自然昼夜光线照明(光照12h，黑暗12h)，室内通风良好。适应性饲养1周后纳入实验。
112实验药物：人参皂甙Rg3，为成品药物参一胶囊，购自南通市肿瘤医院药房。胶囊内容物为白色粉末（吉林亚泰制药股份有限公司）。
主要试剂和仪器：链脲佐菌素(STZ)：美国Sigma公司，海德堡Spectralis-OCT
12实验方法
121动物分组与造模方法：Wistar大鼠60只适应性喂养l周后开始实验。随机抽取20只大鼠作为正常对照组。其余40只大鼠作为造模组，用于糖尿病造模。禁食12h后，腹腔注射链脲佐菌素（Streptozotocin，STZ）60mg/kg，STZ溶解于01mol/L的枸橼酸钠溶液中（Ph=45）。注射72h后取大鼠尾静脉血检测血糖，血糖值大于167mmol/L的大鼠可作为糖尿病大鼠。之后以普通饲料喂养，定期检测血糖。人参皂甙Rg3治疗组每日人参皂甙溶液灌肠（5mg/kg，02mg/ml）。
122OCT测量各组大鼠颞侧视网膜厚度：造模成功及药物治疗8周后，给大鼠腹腔注射戊巴比妥钠麻醉（30mg/kg，300mg/ml）。复方托吡卡胺眼药水散瞳，将大鼠头部固定于托架上，內眦及外眦置于同一水平位，OCT扫描线长度5mm，经视盘，测量自视盘边缘向颞侧一个视盘直径处的视网膜厚度，测量3次取平均值。
13统计学分析:采用SPSS 130统计学软件进行统计分析。所得数据资料经W检验呈正态分布，经Levene检验方差齐，以χ±s表示。行单因素方差分析。P＜001为差异有统计学意义。
2结果
正常组视网膜厚度为（2013±107）μm,糖尿病组视网膜厚度为（2399±101）μm,人参皂甙Rg3治疗组视网膜厚度（2153±103）μm。糖尿病组较正常组视网膜厚度明显增加，而人参皂甙Rg3治疗组视网膜厚度又较糖尿病组明显减少，P均<005。
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3讨论
近年来，糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy，DR)的发病率不断提高，目前已成为我国的主要致盲原因之一，其基本病理改变为血视网膜屏障功能破坏，引起血管内液体、脂类和白蛋白等大分子物质渗漏至视网膜间隙，引起视网膜水肿，进一步加剧局部缺血缺氧。DR的发病机理非常复杂，目前尚未完全明确。一般认为：高血糖通经典的多元醇途径、糖基化终末产物途径、蛋白激酶C途径和己糖胺途径来促进DR的进展，但近年来，多种细胞因子如VEGF、H1F-1、肿瘤坏死因子等在DR中的作用正越来越受到重视。其中的关键因子为VEGF［3-5］。VEGF的作用主要包括：促进血管内皮细胞的增生，抑制血管内皮细胞凋亡，诱导血管平滑肌细胞的迁移，促进血管平滑肌细胞合成和分泌基质金属蛋白酶以加速基质降解及趋发炎症细胞，增加血管尤其是微小血管的通透性，引起血管内大分子物质渗漏，为成纤维细胞和血管内皮细胞的迁移及血管形成提供营养。
人参是我国传统中草药中的滋补珍品，人参皂甙Rg3是从人参中提取的有效单体。20（R）-人参皂甙Rg3是1980年由红参中首先提取出，分子式为C42H72O13，分子量为78430，非水溶性，但可溶于二甲基亚砜。对于Rg3的研究虽然只有20余年，但其抗VEGF的作用正越来越受到人们的重视［6］。
人参皂甙Rg3可下调VEGF的表达，来减少内皮细胞增殖，抑制内皮细胞迁徙和成管，进而达到减少肿瘤新生血管的目的。此外人参皂甙Rg3还具有抗缺血再灌注损伤、清除氧自由基、抗氧化、阻滞钙离子通道等多种生物学效应。高勇等［7］运用鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）方法观察了Rg3对于体内新生血管模型的生长情况，并利用lewis肺癌模型探讨了Rg3在体内对于肿瘤生长和肿瘤新生血管形成的影响，结果表明：Rg3可明显抑制lewis肿瘤的生长，其抑瘤作用部分是因为抑制了肿瘤的新生血管形成。王吉等［8］研究发现：Rg3能抑制胃癌细胞条件培养液诱导的血管内皮细胞增殖，其机理可能是通过下调增殖期血管内皮细胞相关因子受体的表达，使血管内皮细胞对肿瘤细胞分泌的生长因子的敏感度降低，从而影响血管内皮细胞的增殖。潘子明等［9］和朱浩等［10］认为Rg3是通过下调肿瘤细胞VEGF mRNA及蛋白质的表达，从而抑制肿瘤新生血管的形成。
在本试验中，我们通过制作糖尿病大鼠模型，观测了人参皂甙Rg3对于糖尿病大鼠视网膜厚度的影响，结果发现，人参皂甙Rg3可以明显减轻糖尿病大鼠视网膜水肿，其机制可能与抑制VEGF有关。
参考文献
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［2］Arden GB.Sivaprasad S．The pathogenesis of early retinal changes of diabetic retinopathy.Doc Ophthalmol,2012,124(1):1526
［3］Campochiaro PA.Retinal and choroidal neovascularization［J］.J Cell Physiol.2000，184:301310
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［5］Folkman J.Role of angiogenesis in tumor growth and metastasis［J］.Semin Oncol,2002,29(6 Suppl 16):1518
［6］Chen MW,Yang L,Ni L,et al.The effect of 20(R)-ginsenoside Rg3 on the differential expression of cell signaling genes and other related genes in human lung adenocarcinoma cell line A549［J］.Zhonghua Jie He He Hu Xi Za Zhi.2005,28:3740
［7］高勇,王杰军,许青.等.人参皂甙Rg3抑制肿瘤新生血管形成的研究［J］.第二军医大学学报,2001,22(1):4042
［8］王吉,史桂英,袁耀宗,等.人参皂甙Rg3在体外对胃癌细胞生长和凋亡的影响［J］.上海交通大学学报(医学版).200929(11):13361340
［9］潘子明,叶大风,谢辛.等.人参皂甙Rg3对卵巢癌的严重联合免疫缺陷鼠的抗肿瘤血管生成作用的研究［J］.中华妇产科杂志,2002,37(4):202204
［10］朱浩,岳志健,周晓平,等.人参皂苷Rg3对大鼠脑胶质瘤VEGF表达的影响［J］.中国神经肿瘤杂志,2008,6(2):119122
论文作者:曹亮宋愈通讯作者
论文发表刊物:《中医学报》2013年8月第28卷供稿
论文发表时间:2014-3-21
标签：视网膜论文; 人参论文; 血管论文; 糖尿病论文; 大鼠论文; 皂甙论文; 厚度论文; 《中医学报》2013年8月第28卷供稿论文;