湖南省岳阳市屈原管理区食品药品监督稽查大队 414418
【摘 要】目的：探讨食品中沙门氏菌的快速检验方法的效果。方法：择沙门氏菌标准菌株人工污染的食品样本，参照GB 4789.4-2010标准，使用沙门氏菌快速检验板实施检测，分析总结沙门氏菌快速检验板的检测效果。结果：沙门氏菌快速检验板对样本中浓度＜10CFU/ml的沙门氏菌也可进行检测。沙门氏菌菌落在检验板上表现为紫红色，菌落显现明显。阳性干扰试验显示沙门氏菌培养效果良好，数量上优势明显。实施沙门氏菌快速检验板检测沙门氏菌敏感性为100.0%（32/32），特异性为94.4%（17/18），准确率为98.0%（49/50）。结论：食品中实施沙门氏菌快速检验板检测过程操作简单、检验时间短，且检验效果显著。
【关键词】食品；沙门氏菌；快速检验方法
沙门氏菌感染是当前食品感染的重要致病菌，也是当前引起细菌性食品中毒的重要因素。沙门氏菌属于肠杆菌科，为革兰氏阴性肠道杆菌，其建筑类型较多，在蛋类制品、畜禽肉类制品中较为多见，人畜可共患。当前报道显示因沙门氏菌感染引起的食物中毒事件发生率可达70%-80%，国内外对于沙门氏菌感染高度重视，不断提升食品中沙门氏菌感染的早期检验在防治食品中毒中具有重要意义[1]。由于沙门氏菌血清型可达几千个，采取传统培养法鉴定过程操作繁复，检测时间较长，检测难度较大，实际运用受限[2]。探索出新的快速检测技术是当前检测技术发展的主要趋势。沙门氏菌快速检验板是当前沙门氏菌快速检验的新型方式，本研究对沙门氏菌快速检验板的检验效果进行了分析，现进行总结：
1 材料与方法
1.1 材料与仪器
美国施都凯生化培养箱，OLYMPUS全自动生化鉴定仪，美国NUAIRE生物安全柜，山东浩中化工科技有限公司提供的BPW缓冲蛋白胨水，上海童耀生物科技有限公司提供的A-F多价血清及沙门氏菌快速检验板，美国3M沙门氏菌肉补充货、沙门氏菌显色培养基，梅里埃VITEK2阴性鉴定卡，上海远慕生物科技有限公司提供的平板计数琼脂等。
1.2 国家标准
取不同类型50份样品，实施部分污染，按GB 4789.4-2010标准，在无菌操作下取样本25g，置于225ml缓冲蛋白胨水，36℃±1℃培养8-18h，轻晃混匀，移取1ml，接种在10mlTT增菌液中，42℃±1℃，培养18-24h，另取1ml在10mlSC增菌液中同状态下培养。取增菌液接种在平板上，36℃±1℃，培养18-24h后观测平板菌落状况。
1.3 沙门氏菌快速检验板检验
取上述样本25g置于225ml生理盐水，1：10混匀，根据实际污染程度及检测需求对样本进行进一步10倍递增稀释，将沙门氏菌快速检验板置于实验台，揭开盖膜，采取无菌吸管吸取1ml样本滴于检验板上，迅速贴上上层膜，水平晃动，保证样品均匀吸附在滤纸上，静置10s，将检验板倒置，放入培养箱36℃±1℃培养15-24h，随后观测检验板状况，以出现紫红色菌落表示为沙门氏菌、
1.4 观察指标
根据检测板上菌落状况及数量评价沙门氏菌快速检验板检验敏感性、特异性及准确率状况。
2 结果
实施沙门氏菌快速检验板检测时同浓度菌液在平板计数琼脂生长，数量＜10CFU时，也存在菌落生长。因此，定量菌液浓度，沙门氏菌快速检验板对样本中浓度＜10CFU/ml的沙门氏菌也可进行检测。
选择具有代表性标准菌株试验，沙门氏菌菌落在检验板上表现为紫红色，菌落显现明显。奇异变形杆菌结晶为黄色，大肠埃希氏菌显现为蓝色，与沙门氏菌鉴别较为简单。进行阳性干扰试验显示沙门氏菌培养效果良好，数量上优势明显。进行阴性干扰试验，在沙门氏菌无竞争状态下，奇异变形杆菌正常生长。
实施沙门氏菌快速检验板检测沙门氏菌敏感性为100.0%（32/32），特异性为94.4%（17/18），准确率为98.0%（49/50）。具体检测结果详见下表1。
表1 样本检测结果对比
3 讨论
沙门氏菌感染是食品细菌感染的主要原因之一。不断提升沙门氏菌感染的早期检验及检验效果在食品安全防控中具有重要价值。以往传统检验过程操作繁琐、检验时间长，检测时易出现漏诊和误诊状况，实际运用受到限制。
沙门氏菌快速检验板以快速检验技术为基础，在酶促反应技术支撑下形成。其检验过程无需专业高昂设备，且检验时间较短，更利于实践运用。根据本次研究结果显示沙门氏菌快速检验板对样本中浓度＜10CFU/ml的沙门氏菌也可进行检测，说明其检验范围广。实施沙门氏菌快速检验板检测沙门氏菌敏感性为100.0%，特异性为94.4%，准确率为98.0%，检测效果显著，与国家标准较为相似。但在实际检测过程中，对于存在较为复杂的微生物感染状况能存在一定限制，如对多菌种感染的肉制品检测时，干扰因素较多，易出现假阳性状况，对于长期冷冻食品，微生物在低温状态可能出现细胞损伤或休眠状况，导致微生物含量较低，检测过程未经增菌操作时，极易导致假阴性，引起漏诊出现，影响检测结果。因此，对于冷冻或低温食品需实施增菌操作，以提升检测结果[3-4]。
沙门氏菌快速检验板与国家标准方法相比，存在以下特点：①沙门氏菌快速检验板增菌步骤减少，多为1-2次增菌，使用1-2种增菌液，而国家标准中实施2次增菌，使用3种增菌液；②检验周期：实施沙门氏菌快速检验板周期明显缩短，约为3-4d，而国家标准中检测周期为6-7d；③可疑菌落判读时间上，沙门氏菌快速检验板上菌落显现更快，约为24h可显现出可疑菌落，而国家标准中菌落判读时间较长，约为24-48h；④在菌落确定过程中，沙门氏菌快速检验板上鉴别过程更为简单，沙门氏菌显示为紫红色，菌落性状、大小等显现明显，奇异变形杆菌结晶为黄色，大肠埃希氏菌显现为蓝色，鉴别过程较为简单、快捷，使用时间约为4-5h，而在国家标准中菌种鉴定过程时间长，可达2-3d；⑤在操作步骤方面，实施沙门氏菌快速检验板检测过程操作简单、快捷，而按国家标准实施时较为繁琐，极易出现失误，影响检验结果；⑥在人员要求方面，由于沙门氏菌快速检验板检测操作简单，且可根据相关手册进行结果判读，对检验人员要求一般，仅需拥有一定的实践经验，而在国家标准检测中对检验人员技术操作及判读能力要求较高，需检验人员具备丰富的实践经验[5-7]。
综上所述，采取沙门氏菌快速检验板检验沙门氏菌效果显著，且操作过程简单快捷，运用价值高。
参考文献：
[1]张康.食品中沙门氏菌的几种快速检验方法分析[J].中国保健营养，2016，26（26）：337.
[2]段鹏，祖新，杨晓楠，等.VIDAS与经典法在沙门氏菌盲样检验能力验证中的应用与分析[J].甘肃科技纵横，2017，46（2）：38-42.
[3]王似锦，高春.VIDAS在保健食品沙门氏菌快速检测中的应用[J].食品安全质量检测学报，2015，6（2）：677-681.
[4]雷杰.Veriflow与FDA和USDA方法 对食品样品中沙门氏菌检测的比较[J].食品安全导刊，2017，（25）：61-63.D
[5]江志杰，王似锦，高春，等.食品中沙门氏菌检出能力验证结果与分析[J].食品安全质量检测学报，2015，6（5）：1929-1935.
[6]陈文财.食品中沙门氏菌的快速检验方法[J].食品界，2017，4（7）：86.
[7]陈玲.食品中沙门氏菌检验方法的研究[J].科技与创新，2015，27（8）：102-103.
论文作者:陈伟
论文发表刊物:《中国蒙医药》2018年第7期
论文发表时间:2018/8/28
标签：沙门氏菌论文; 快速论文; 菌落论文; 食品论文; 样本论文; 国家标准论文; 过程论文; 《中国蒙医药》2018年第7期论文;