王爱华1 寻延滨1 杜霞2 白政忠1（1. 黑龙江省食品药品检验检测所 黑龙江哈尔滨150088；2. 哈尔滨理工大学 黑龙江哈尔滨 150080）
【摘要】目的 建立气相色谱法检测米力农原料药5 种有机残留溶剂乙酸乙酯、甲醇、二氯甲烷、N,N- 二甲基甲酰胺和醋酸的方法。方法 色谱柱为聚乙二醇（PEG-20M）为固定液的毛细管柱；程序升温，起始温度为40℃，保持8 分钟，以每分钟20℃升温至200℃，保持4 分钟；进样口温度为250℃，分流比为10:1；检测器为FID，温度为250℃；载气为氮气，流速2.0ml/min。结果：各被测残留溶剂均能良好分离，各溶剂峰面积与浓度呈良好的线性关系，回收率较好。结论： 本方法适用于米力农原料药残留溶剂的测定。
【关键词】米力农；残留溶剂；气相色谱法【中图分类号】 R2 【文献标号】 A 【文章编号】 2095-9753（2016）4-0095-01
米力农为磷酸二酯酶抑制剂，为氨力农的同类药物，作用机理与氨力农相同。口服和静注均有效，兼有正性肌力作用和血管扩张作用。但其作用较氨力农强10 ～ 30 倍，耐受性较好[1]。米力农原料药国内现有生产企业1 家，共涉及5 种有机溶剂其中，第二类溶剂有3 种，分别为：二氯甲烷、甲醇、N,N- 二甲基甲酰胺（DMF）；第三类溶剂有2 种，分别为：醋酸和乙酸乙酯。为确保临床用药安全，应对上述残留溶剂进行控制。
本文按照《中国药典》2015 版四部的要求[2]，制定了可同时测定上述5 种残留溶剂的气相色谱分析方法。
1 仪器与试药1.1 仪器 Aglient 7890A 气相色谱仪（Aglient 公司）；电子天平（梅特勒公司）。
1.2 试药 米力农（批号120103，110501）由国内某药业有限公司提供；乙酸乙酯、甲醇、二氯甲烷、N,N- 二甲基甲酰胺和醋酸均为分析纯。
2 方法与结果2.1 色谱条件以聚乙二醇（PEG-20M）为固定液的毛细管柱；程序升温，起始温度为40℃，保持8 分钟，以每分钟20℃升温至200℃，保持4 分钟；进样口温度为250℃，分流比为10:1；检测器为FID，温度为250℃；载气为氮气，流速2.0ml/min。各成分峰的分离度应符合规定。
2.2 溶液的配制2.2.1 对照品溶液的配制分别称取乙酸乙酯、甲醇、二氯甲烷、N,N- 二甲基甲酰胺、醋酸适量，用二甲亚砜溶解并制成每1ml 中含乙酸乙酯50μg， 甲醇30 μg， 二氯甲烷6μg，N,N- 二甲基甲酰胺8.8μg，醋酸50μg 的混合溶液，作为对照品溶液。
2.2.2 供试品溶液的配制取本品约0.1g，精密称定，置10ml 量瓶中，加二甲亚砜溶解并稀释至刻度，作为供试品溶液。
2.2.3 系统适用性试验按“2.2”项下方法制备混合对照品溶液和供试品溶液，按“2.1”项下的色谱条件分别进样分析，记录色谱图（见图1）
2.3 方法学部分2.3.1 标准曲线分别称取甲醇30.22mg， 二氯甲烷16.12mg， 乙酸乙酯49.90mg，DMF88.86mg， 醋酸49.53mg， 分置量瓶中， 加二甲亚砜溶解并稀释至刻度，再分别用二甲亚砜稀释至适当浓度， 作为系列线性标准溶液。分别精密量取1μl 进样。以峰面积（A）为纵坐标，浓度（C，mg/ml）为横坐标进行线性回归， 得线性方程分别为： 乙酸乙酯：A=0.5817×C － 0.5156，r=0.9972; 甲醇：A=0.5173×C － 0.3399，r=0.9981; 二氯甲烷：A=0.7203×C+0.0325，r=0.9981;DMF：A=0.4306×C － 0.5168，r=0.9966; 醋酸：A=0.4103×C － 1.3508，r=0.9984。
结果表明：乙酸乙酯浓度在19.96 μg/ml~149.7 μg/ml 范围呈现良好的线性关系；甲醇浓度在12.09 μg/ml~90.66 μg/ml 范围呈现良好的线性关系；二氯甲烷浓度在2.24 μg/ml~16.8 μg/ml 范围呈现良好的线性关系；DMF 浓度在3.55 μg/ml~26.66 μg/ml 范围呈现良好的线性关系；醋酸浓度在19.81 μg/ml~148.6 μg/ml 范围呈现良好的线性关系。
2.3.2、 回收率取已测得残留量的样品，按标准操作取样后，分别用含有浓度为对照品溶液50%，100% 和150% 的溶液定容至刻度，进样。结果测得乙酸乙酯的平均回收率为96.5%，甲醇为96.3%，二氯甲烷为97.0%，DMF 为96.0%，醋酸为96.8%。
2.3.3 精密度取限度值浓度的混合对照品溶液，按“2.1”项下的色谱条件进样，记录色谱图，计算精密度（n=6）结果表明乙酸乙酯的平精密度为4.0%，甲醇为3.4%，二氯甲烷为7.5%，DMF 为6.8%，醋酸为3.6%。
2.3.4 灵敏度精密量取对照品溶液适量，用二甲亚砜逐步稀释，按按“2.1”项下的色谱条件测定，结果测得乙酸乙酯、甲醇、二氯甲烷、N,N-二甲基甲酰胺、醋酸的最低检出浓度（S/N ≈ 3）分别为0.89、1.30、0.67、1.32 和2.14 μg/ml，定量浓度（S/N ≈ 10）分别为2.96、4.40、2.24、 4.44 和7.13 μg/ml。
2.4 样品测定结果将样品按“2.2”项下方法制备，按“2.1”项下的色谱条件进样，测得乙酸乙酯、甲醇、二氯甲烷、N,N- 二甲基甲酰胺、醋酸的量分别为0.002%、0.07%、0.002%.、0.003% 和0.02%。
3 讨论原检测方法使用的是溶液直接进样法和顶空进样法，但在检测时发现使用DB-624 色谱柱醋酸的出峰效果非常不理想，经查阅文献，以聚乙二醇为涂布液的毛细管柱更适合醋酸的检测，因此将色谱柱更换为涂布液为聚乙二醇的INNOWax 色谱柱。而如果采用顶空进样，醋酸在DMSO 中的挥发非常少，响应值极低，无法满足检查需要，经比较研究，在满足检测灵敏度的前提下，本品种使用溶液直接进样法更为便捷，并进行了方法学验证。
参考文献[1] 李艳，冉照芹. 米力农治疗扩张型心肌病重度心力衰竭的临床观察［J. 中国实用医药，2009,4(8): 181-182[2] 中国药典2015 年版四部：105-109
论文作者:王爱华1 寻延滨1 杜霞2 白政忠1
论文发表刊物:《中国医学人文》2016年第4期
论文发表时间:2016/6/29
标签：乙酸乙酯论文; 醋酸论文; 甲酰胺论文; 溶液论文; 甲烷论文; 色谱论文; 甲醇论文; 《中国医学人文》2016年第4期论文;