（晋中市第一人民医院输血科 山西晋中 030600）
【摘要】新生儿溶血病一般特指母婴血型不合而引起的胎儿或新生儿免疫性溶血性疾病（haemolytic disease of the newborn），简称HDN。临床上造成胎儿、新生儿溶血性贫血疾病的原因有很多种，如G6PD缺乏，a-地中贫血，遗传性球形红细胞增多症，病毒感染等，但这些病因只占新生儿溶血的少数，大多是由于母婴之间的血型不合造成的，所以“新生儿溶血病”这一病名就特指由母婴之间的血型不合造成的胎儿、新生儿溶血。
【关键词】晋中市；新生儿；溶血病；微柱凝胶血清学
【中图分类号】R446.11 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2016）30-0134-02
1.发病机理
1.1 新生儿溶血病又称母子血型不合溶血病，是母亲对胎儿红细胞发生同种免疫反应引起的溶血性疾病，Rh血型和ABO血型不符都能引起这种疾病，但前者引起的比较严重，是新生儿病理性黄疸最常见的原因，也是引起新生儿胆红素的最重疾病，目前已发现26个血型系统，160种血型抗原，在我国以ABO血型不合溶血病发生率最高，Rh血型不合溶血病发生较少，MN溶血最为罕见。
1.2 Rh新生儿溶血病因孕妇和胎儿的Rh血型不符而引起的疾病。若孕妇为Rh-，胎儿为Rh+（有D抗原），当孕妇第一胎分娩胎盘剥离时，胎儿的红细胞进入母体会刺激母体产生抗D抗体（IgG）。
1.3 ABO新生儿溶血病因孕妇与胎儿ABO血型不符而引起的疾病。多见于O型孕妇，尤其多见于O型孕妇和A型胎儿。
1.4 A或B抗原也与部分抗A或抗B抗体发生作用，而且抗A的量高于抗B。但这类病例不多，病情也比较轻，加以胎儿血管内皮和组织细胞上有血型抗原，可部分吸收对应抗体，以减少抗体对红细胞的破坏。在我国，因ABO血型不合引起的新生儿溶血病较为常见，Rh血型不合引起的新生儿溶血病次之。其设计理论先进，具有操作简单迅速、标本用量少、结果易判断、敏感性高和特异性强的优点。
2.材料与方法
2.1 试剂与仪器
试剂：DianaGeL coombs卡（每卡含8个微柱孔管），每个微柱孔管含低离子强度缓冲液（LISS）浸泡中的微粒筛，加上多价抗人球蛋白（兔多克隆抗IG和单克隆抗C3d克隆12011.D10）。
仪器：专用的Baso 、LC-10C离心机和Diana孵育器。
2.2 样本来源
2014年11月-2016年11月住在我院及市妇幼医院、区妇幼医院、区医院等其他医疗机构的新生儿科患儿（母亲是O型，患儿是A型或B型）出生后1～3天皮肤巩膜黄染，血红蛋白降低，血清胆红素高于正常值，对患儿采集EDTA抗凝血3毫升共589份标本，实验室对所送标本必须在接到后24小内检查完毕。
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2.3 实验方法及步骤
2.3.1血型和直接抗人球蛋白试验：
（1）取新生儿溶血卡，标记姓名，编号，日期，轻轻撕掉锡箔纸，每孔加患儿1%的压积红细胞悬液各50ul。
注意：①患儿血型为O型，直抗试验阴性（-），就不做游离放散试验；患儿血型为O型，直抗试验阳性（+），做游离O、放散O。②新生儿溶血卡DVI-：单克隆IgM抗体，DVI+：单克隆IgM混合抗体，两者结果出现差异，解释为弱D或部分D。③新生儿溶血卡最后两孔IgG和AHG结果必须一致。
（2）置专用离心机离心9分钟。
（3）读卡：IgG和AHG孔结果有凝集，即直接抗人球蛋白试验阳性。
2.3.2血浆中游离抗体试验，红细胞放散试验：
（1）取微柱凝胶Coombs卡标记患儿编号、姓名、检测日期等，第一、二孔做游离试验，第三、四孔做红细胞放散试验。
（2）第一、三孔加1%O型标准红细胞悬液各50ul，第二、四孔加1%与患儿相同血型标准红细胞悬液各50ul；再在第一、二孔分别加患儿血浆各50ul，第三、四孔分别加患儿红细胞放散液（樱红色）各50ul。
（3）将微柱凝胶Coombs卡置37℃孵育器内孵育15分钟
（4）置专用离心机离心9分钟，看结果。
2.4 hemo溶血
2.4.1当母血清中存在ABO系统的IgG抗体，且抗体效价达到或高于64时有可能造成新生儿溶血病，达到或高于256时新生儿患病的可能性就变得比较高。
2.4.2当母或子血清中存在ABO以外的IgG抗体时，须将标本送当地血液中心进行抗体特异性鉴定，证实胎儿红细胞具有相应抗原，即确诊是HDN。
2.4.3实验室新生儿溶血病诊断标准 三项试验同时阳性或放散试验阳性可确诊为新生儿溶血病。若直抗试验和游离试验1项或2项阳性者，可判断为疑似新生儿溶血病。
3.结果
ABO母婴血型不合新生儿溶血病（HDN）171例，其中OA115例，OB56例。ABO溶血病因红细胞的抗体结合较少，直接抗球蛋白试验常为阴性或弱阳性，血清游离抗体阳性，抗体释放试验阳性。Rh溶血病直接抗球蛋白试验强阳性，游离抗体强阳性，抗体释放试验强阳性
4.讨论
目前，在我国诊断新生儿溶血病的实验室检查主要是三项试验（直接抗球蛋白试验、游离抗体试验、放散试验），直接抗球蛋白试验主要检测新生儿红细胞是否被来自母亲IgG抗A（B）所致敏；游离抗体试验是患儿血清的IgG抗A（B）来自母亲，如果新生儿血清中发现与其红细胞不配合的IgG抗A(B)时，表明婴儿体内有抗体，可能受害；放散试验采用的是试管抗球蛋白技术和微柱凝胶技术，用放散液与标准ABO型红细胞反应，（与O型红细胞反应视做阴性对照）均无凝集者。我们采用微柱凝胶技术对我院589例母婴血型不合且有严重的新生儿黄疸或高胆红素血症患儿的血标本进行了三项试验。
我院新生儿科对溶血严重的患儿及时进行了换血治疗（ABO溶血采用O型洗涤红细胞+AB血浆的血液，Rh溶血采用ABO血型同患儿，Rh血型同母亲的血液）微柱凝胶技术用于新生儿溶血病的检测，方法简便、快速、判断结果标准，可成为医院实验室常规检测方法。实验室能为临床快速准确提供试验报告，有利于患儿的早期诊断、早期治疗，对提高新生儿健康水平有很重要的意义。
【参考文献】
[1]胡丽华.临床输血与检验[J].全国高等医药院校规划教材.
[2]微柱凝胶卡式法和传统试管法检测新生儿溶血病3项结果比较[J].中国输血杂志,2009,22（11）:913-914.
论文作者:孙志毅
论文发表刊物:《心理医生》2016年30期
论文发表时间:2017/1/12
标签：新生儿论文; 抗体论文; 红细胞论文; 血型论文; 患儿论文; 胎儿论文; 球蛋白论文; 《心理医生》2016年30期论文;