（广西壮族自治区肿瘤防治研究所 广西南宁 530021）
【摘要】目的：通过研究水蛭素单药及联合顺铂对鼻咽癌CNE２细胞生长的影响，探讨其抑制作用。方法：以体外培养的鼻咽癌CNE２细胞为研究对象，采用MTT法检测水蛭素单药及联合顺铂对CNE２细胞的生长抑制率。结果：水蛭素对CNE2细胞有明显的生长抑制作用，抑制率随剂量、时间的增加而增强（P＜0.05）；水蛭素和顺铂联合应用，对CNE2细胞的抑制率高于两者单独应用（P＜0.05）。结论：水蛭素有抑制鼻咽癌CNE2细胞生长的作用，并可增强顺铂的抑癌效应。
【关键词】水蛭素；顺铂；CNE2细胞；鼻咽癌
【中图分类号】R739.6 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2018）23-0142-02
【Abstract】Objective To investigate the inhibitory action by studying the effect of hirudin monotherapy or combined with cisplatin on the growth of nasopharyngeal carcinoma cell (CNE2).Methods The cultured nasopharyngeal carcinoma of CNE2 cells were used as the research object. Methylthiazol tetrazolium (MTT) assay was adopted to detect the growth inhibition rate of CNE2 cells treated with hirudin monotherapy and combination cisplatin. Results Hirudin could significantly inhibit the growth of CNE2 cellsin a dose dependent and time dependent manner(P<0.05). The combination of hirudin and cisplatin showed higher inhibitory effect on CNE2 cells than both of them(P<0.05). Conclusion Hirudin could inhibit CNE2 cells in NPC and enhance the anti-cancer effect of cisplatin.
【Key words】 Hirudin; DDP; CNE2 cells; NPC
鼻咽癌是广东及广西高发肿瘤，治疗方式主要以放疗为主，大部分患者能取得较好疗效[1]，部分患者要辅以化疗，但化疗药物存有明显的毒副作用，而中医药在肿瘤治疗中具有增效减毒的作用，有研究发现水蛭素亦具有抗肿瘤的作用[2]，因此本课题通过水蛭素联合顺铂，对体外培养的鼻咽癌CNE2细胞的生长抑制研究，初步探讨其作用机制，为水蛭素的临床应用提供理论依据。
1.材料与方法
1.1 材料
CNE2细胞株，顺铂，天然水蛭素冻干粉（南宁市金海科康生物医药科技有限公司提供）。
1.2 方法
1.2.1细胞培养 CNE2细胞于RPMI1640培养基中，常规培养。
1.2.2 MTT法检测水蛭素、顺铂对CNE2细胞的生长抑制作用 设置水蛭素组（2，4，8，16ATU/ml），顺铂组（2umol/L），联合用药组（2umol/L+5 ATU/ml），每组5个复孔，分别于药物作用24，48，72h后，用酶标仪490nm波长的吸光度值测定OD值。重复3次实验。抑制率=（1-药物组平均OD/对照组平均OD）×100%。
2. 结果
2.1 水蛭素对CNE2细胞的生长抑制作用
在同一时间段，随着水蛭素浓度的增加，抑制率逐渐增强；在同一浓度下，随着水蛭素对CNE2细胞作用时间的延长，抑制率逐渐增强，差异具有统计学意义（P＜0.05），见表1。
3.讨论
水蛭素是从水蛭头部的唾液腺提取出来的一种活性成分 [3]，其抗凝血作用已经应用于临床，近年来有研究表明水蛭素对体外培养的TCA8113细胞有明显的抑制作用，联合阿霉素后有明显的增效减毒作用[4]。顺铂是非特异性抗肿瘤药物,也是一种有效的放疗增敏剂，是目前治疗鼻咽癌的常用化疗药物之一，但其毒副反应也较多， 且对肿瘤细胞的侵袭转移抑制作用较差[5]。
本研究选用水蛭素单药、水蛭素与顺铂的联合应用，分别观察其对CNE2细胞的体外生长抑制作用，结果显示水蛭素对体外培养的CNE2细胞生长有明显的抑制作用，与水蛭素的剂量及作用时间呈正相关性，随着作用剂量的增加及作用时间的延长，细胞的生长抑制作用明显增强，当水蛭素16ATU/mL，作用时间72h时，生长抑制率达到了93.3%，各组之间差异有统计学意义（P＜0.05）。在水蛭素、顺铂单药与两者联合用药48h的研究中发现，水蛭素单药体外抑制率高于顺铂，这可能与药物浓度有关，主要是观察联合用药，发现联合用药有增强效应，比单药应用有更强的细胞抑制作用。
综上所述，本研究提示水蛭素对体外培养的鼻咽癌CNE2细胞有生长抑制作用，为水蛭素应用于临床抗癌提供理论依据；水蛭素联合顺铂表现出的增强效应，提示可以减少顺铂的使用剂量，从而减轻顺铂的毒副作用。
【参考文献】
[1]卢其腾，曲颂，李龄，等.PARP-1对鼻咽癌CNE-2细胞迁移及侵袭能力的影响[J].中国癌症防治杂志:2018，10(1):10-14.
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[3]周维官，周维海，关建聪，等.菲牛蛭的研究进展[J].广西科学院学报，2010，26(1):74-77.
[4]贺彬，苏承武，蔡捷，等.水蛭素联合阿霉素对TCA8113细胞株作用机制的研究[J].现代中西医结合杂志，2011;20(12):1447-1450.
[5]崔亚萌，齐新，魏丽萍，等.顺铂心脏毒性的研究进展[J].现代药物与临床，2017，32(2):351-355.
论文作者:黄玲莎,陶义丰 方敏,张云,黄浩,陈艳华（通讯作者）
论文发表刊物:《心理医生》2018年8月23期
论文发表时间:2018/8/23
标签：水蛭论文; 作用论文; 抑制论文; 鼻咽癌论文; 细胞论文; 体外论文; 生长论文; 《心理医生》2018年8月23期论文;