（黑龙江农垦职业学院 黑龙江省哈尔滨市 150025）
摘要：本文章主要的目的就是分析与研究护肝片中五味子膏提取工艺。根据多年的提取工艺研究显示，提取效果最好的工艺就是采用6倍的95.0%乙醇（30℃）进行渗漉，将渗漉的速度控制在5ml/min，混入渗漉液，并将其进行减压与浓缩至1.28（80摄氏度测）。经过研究该种方法操作更为简单可靠，可广泛的应用于药物提取。
关键词：护肝片；五味子；提取工艺
护肝片不仅可以健脾养肝、疏肝理气，同时也能够在一定程度上抑制血清谷丙转氨酶的转化与分泌。该种药物在治疗慢性肝炎、病毒性肝炎以及早期肝硬化的过程中具有十分显著的疗效。虽然护肝片已经被95版中国药典收载，其添加五味子乙素含量的检测项目，但是对于五味子膏的提取工艺仍旧没有作出统一的规定，传统的五味子膏提取工艺水平较低，并不能完全将五味子乙素提取出来。五味子又被称为山花椒与五梅子，五味子具有润肺生津、敛肺收汗等功效，是治疗肝病的主要药物成分。因此，本次研究进一步对护肝片中五味子膏提取工艺进行了探讨与研究，并把研究结果做以下报告。
1仪器与试药
GC6891N全新一代实验室高端气相色谱仪（南京科捷分析仪器有限公司）；EYG-FB36KW超声波清洗器（北京宇翔超声工业设备有限公司）；50L旋转蒸发器（南通普瑞科技仪器有限公司）化工行业用超纯水设备（深圳市宏森环保科技有限公司）；Master-D超纯水机（无锡碧丽环保节能科技有限公司）；ZL22-500A加热型超声波清洗器（上海左乐仪器有限公司）；FA1204B精密天平（上海精密科学仪器有限公司）；S21-1双向磁力搅拌器（上海丙林电子科技有限公司）；乙腈（山东旭晨化工科技有限公司）；甲醚（武汉有机新融化工有限公司）；磷酸（天津市荣宏化工有限责任公司）；三乙胺（常州亚宏化工有限公司）；乙醚（广州钱盛化工有限公司）。
2 方法与结果
2.1 醇提。醇提要根据处方称取适量的五味子，并通过粉碎将其变成粗粉放置到回流提取器中，分别采用6倍的浓度为95%、85%、75%的乙醇进行浸泡，浸泡时间为30分钟。然后对其提取两次，第一次2h，第二次1h，过滤后，混合滤液进行减压与压缩，直至其密度为1.28（80摄氏度测）并应用高效液相测定浓缩五味子膏的含量。
2.2 渗漉。渗派同样要根据处方称取适量的五味子，将其粉碎成粗粉状，将其放置于渗滤罐内分别采用6倍的浓度为95%、85%、75%的乙醇实施渗漉，渗漉的速度要控制在每分钟1升，将漉液混合后进行减压与压缩，直至其密度为1.28（80摄氏度测），利用高效液相对五味子浓缩膏的含量进行测定[2]。
2.3 正交试验设计。根据本次研究的数据结果显示，利用浓度为95%的乙醇通过回流的方式提出五味子乙素，其含量为3.12%；利用浓度为85%的乙醇通过回流的形式来提出五味子乙素，其实际含量为2.82%；利用浓度为75%的乙醇通过回流的方式提取五味子乙素，其含量为2.41%；通过浓度为95% 的乙醇渗漉提取出的五味子乙素，其含量为3.32%；利用浓度为85%的乙醇渗漉可以提取出含量为2.95% 的五味子乙素，利用浓度为75%的乙醇渗漉可以提取出2.56%的五味子乙素。根据本次研究中的试验数据可知，利用渗漉来提取五味子乙素的含量显著高于通过回流的方式提取出的五味子乙素含量，且当乙醇的浓度为95%时，提取出的五味子乙素的含量最高[3]。因此，在护肝片中五味子膏提取的过程中，其首先要考虑的三大因素就是渗漉的速度、加醇量以及乙醇的温度。利用正交试验法可以对影响提取效率的其它工艺条件进行优选。并通过3个考察水平，用L9（34）以正交表进行试验分析，具体的数据见表见表1。
表1 五味子提取工艺因素水平表
3含量测定
3.1 色谱条件 色谱柱为Waters SunFire C18液相色谱柱（规格为250×4.6mm5um）；加醇与水（60：40）为流动相，254nm为检测的波长，1.0mL×min.1。
3.2 供试品溶液的制备 取适量的五味子浓缩膏，采用精密天平进行称量，并将其放置到具塞锥形瓶中，加入流动相100mL，密塞后进行精密称定，并在超声三十分钟后放冷，利用精密天平称定，再采用流动相补足重量，充分摇匀，利用微孔滤膜（0.45μm）过滤，最后取液、滤液即可[4]。
3.3 对照品溶液的制备 利用精密天平称取适量的五味子乙素对照品，利用流动相溶解进行稀释，并将其配制成1mL的对照品溶液，其中含有5μm五味子乙素[5]。
3.4 标准曲线的制备 把浓度为0.1μm/ml、0.4μm/ml、0.8μm/ml、1.6μm/ml、3.2μm/ml、6.4μm/ml、12.8μm/ml的对照液分别吸取20μL注入到HPLC中，进样量为μg为横坐标，峰面积分值A作为纵坐标，以此来绘制准确的曲线。曲线证明在0.1/12.8μm/ml的范围内，五味子乙素对照品的内线性关系良好[6]。
3.5 回收率试验 选取已知五味子乙素含量的同一批次供试品，分别精密添加适量的五味子乙素对照品，对其含量进行科学、准确的计算，求出回收率。平均回收率为99.56%，RSD为0.56%[7]。
4 实验结果
根据L9（34）正交设计表的具体条件来实施本次试验，通过试验数据得出，提取工艺为6倍浓度为95.0%的乙醇（30℃）进行渗漉，渗漉的速度控制在5ml/min，混入渗漉液，并将其进行减压与浓缩至1.28（80摄氏度测），在这种条件下提取出的五味子含量最好，在2010年的中国药典中对五味子膏的含量进行测定，采取的方法为浓度75%乙醇回流提取法[8]。但根据试验数据证明，提取出五味子膏中五味子乙素含量最高的方法是95%乙醇渗漉。由于五味子乙素属于一种脂溶性成份，其长期的加热回流提取会直接破坏其有效成份，因此，采用浓度为95%乙醇进行渗漉提取出的五味子含量最高[9]。
参考文献
[1]王立成，蒋志艳.护肝片中五味子膏提取工艺探讨[J].黑龙江科技信息，2014，（5）：8-8.D
[2]孙佩霞，钟监明，荆棘.护肝片中五味子膏提取工艺探讨[J].广东药学院学报，1998，（3）：57.
[3]李姗姗，赵权，罗成禹，等.五味子复方安神颗粒剂的提取工艺研究[J].科学技术创新，2018，（2）：72-73.
论文作者:刘晓燕
论文发表刊物:《航空军医》2018年10期
论文发表时间:2018/8/17
标签：乙醇论文; 浓度论文; 工艺论文; 精密论文; 含量论文; 正交论文; 量为论文; 《航空军医》2018年10期论文;