高圆[1]2004年在《Sa抗原的提纯及其抗体在类风湿关节炎中的意义》文中进行了进一步梳理目的:通过大样本研究,进一步验证Sa系统在RA诊断中的意义,同时摸索更稳定的抗Sa抗体的检测条件;纯化抗原,以深入研究该抗原的性质及建立高效率的检测方法。方法:从人胎盘组织中提取Sa抗原,对1088例1999年-2003年山西医科大学第二医院风湿科门诊及住院患者,用免疫印迹法进行抗Sa抗体检测,结合临床资料进行分析;分别用离子交换柱层析法和亲和层析法进一步纯化Sa抗原。
高圆[2]2004年在《Sa抗原的提纯及其抗体在类风湿关节炎中的意义》文中提出目的 通过大样本研究，进一步验证Sa系统在RA诊断中的意义,同时摸索更稳定的抗Sa抗体的检测条件；纯化抗原，以深入研究该抗原的性质及建立高效率的检测方法。方法 从人胎盘组织中提取Sa抗原，对1088例1999年-2003年山西医科大学第二医院风湿科门诊及住院患者，用免疫印迹法进行抗Sa抗体检测，结合临床资料进行分析；分别用离子交换柱层析法和亲和层析法进一步纯化Sa抗原。结果 抗Sa抗体可在37.9﹪RA患者中出现，对RA诊断的特异性为94.7﹪。与小样本相比，灵敏度和特异性均有所提高；抗Sa在其它风湿性疾病中很少出现，在正常人中几乎不出现；抗Sa在早期RA患者的检出率为40.7﹪，阳性和阴性预测值均在80﹪左右。抗Sa阳性组RA患者的平均晨僵时间、受累关节数均大于阴性组；RF阳性率在抗Sa阴性组高于阳性组；在RF阴性组中抗Sa阳性率为38.7﹪。抗CCP与RF、APF、AKA之间有显着相关性；抗Sa与抗CCP及其它自身抗体间相关性不显着。抗Sa与其它几种RA相关自身抗体相比：抗Sa的特异性最高， RF特异性最低；抗Sa与其它抗体采用并联形式（即抗Sa与其它抗体同时阳性，结果判为阳性），特异性有很大程度的提高，接近100﹪；采用串联形式（即抗Sa与其它5种抗体中的1种抗体有1个检测阳性，结果就判为阳性），敏感性从37.9﹪提高到88.6﹪（抗Sa或抗CCP组合），ROC曲线下面积增加（0.692增加到0.901），而特异性下降不明显（95﹪下降到92﹪）。与粗抗原相比，纯化后蛋白条带数减少，Sa抗原所在位置蛋白浓集，提高了结果判读的准确性。结论 抗Sa对RA诊断特异性最高，对RA早期诊断很有帮助，对RF阴性的RA有较高的补充诊断价值，可用于RA的临床诊断；抗Sa与病情严重程度有关；抗Sa与其它RA相关自身抗体不相关；抗Sa与其它RA相关自身抗体联合检测可提高对RA的诊断价值；完善检测方法，可提高实验的敏感性；纯化的Sa抗原可提高诊断效率。
陈华[3]2006年在《Sa抗原相关蛋白质的研究》文中提出Sa抗原／抗Sa抗体系统是近十余年来发现的类风湿关节炎(Rheumatoid Arthritis，RA)的血清学指标，对RA高度特异，并且和病情严重程度相关。对Sa抗原／抗Sa抗体系统的研究有助于推对其在临床的应用和阐明RA的发病机制。本研究以阴离子交换层析法从新鲜人胎盘组织提取含有Sa抗原的人胎盘提取物(Human Placenta Extracts，HPE)，用Sa阳性病人血清进行免疫印迹法检测抗Sa抗体为相对分子量50000(和)55000印迹阳性条带。对30例健康对照血清和6例各种风湿病标准血清的抗Sa抗体检测均阴性。检测155例各种风湿病患者血清(RA71例、强直性脊柱炎11例、银屑病关节炎7例、反应性关节炎7例、幼年特发性关节炎4例、骨性关节炎5例、风湿性多肌痛6例、痛风6例、系统性红斑狼疮7例、干燥综合征10例、炎性肌病8例、混合性结缔组织病4例、白塞病6例、成人Still病3例)，抗Sa抗体对RA的诊断敏感性和特异性分别为47.9％和95.2％，阳性预测值和阴性预测值分别为89.5％和68.4％。本研究以质谱研究Sa抗原的生化本质。切取抗Sa抗体阳性印迹条带对应的胶上条带，胰蛋白酶胶内酶解，高效液相色谱-电喷雾-离子阱串联质谱鉴定，SEQUEST程序检索NCBI NR数据库，鉴定出目标蛋白质为波形蛋白(Vimentin)。为进一步确认目标蛋白质，本研究对人胎盘提取物进行双向电泳，免疫印迹法检测抗Sa抗体，得到Sa抗原的相对分子量(约50000)和等电点(约5.0)信息，与波形蛋白相符合。本研究在大肠杆菌重组表达人波形蛋白，但免疫印迹法检测其抗体对RA的诊断敏感度低(36.6％)，特异性差(83.3％)，与抗Sa抗体的符合率低(Kappa=0.316)，说明两者抗原性存在较大差异。本研究继而对重组人波形蛋白进行了瓜氨酸化修饰，检测抗体发现其抗原性显着改变。抗瓜氨酸化波形蛋白抗体对诊断RA的敏感性和特异性分别为49.3％和86.9％，与抗Sa抗体的一致性较高(Kappa=0.746)，提示人波形蛋白瓜氨酸化后形成新的抗原决定簇，与Sa抗原密切相关。但是抗瓜氨酸化波形蛋白抗体的假阳性率较高，特异性比抗Sa抗体差，对人波形蛋白与Sa抗原的关系仍有待进一步认识。本研究也说明，质谱等蛋白质组学新技术应用于自身免疫病相关抗原的研究，必将推动对此领域的深入认识。
参考文献：
[1]. Sa抗原的提纯及其抗体在类风湿关节炎中的意义[C]. 高圆. 首届全国中青年风湿病学学术大会论文汇编. 2004
[2]. Sa抗原的提纯及其抗体在类风湿关节炎中的意义[D]. 高圆. 山西医科大学. 2004
[3]. Sa抗原相关蛋白质的研究[D]. 陈华. 中国协和医科大学. 2006
标签：内分泌腺及全身性疾病论文; 抗体论文; 特异性论文; 类风湿论文; 风湿类风湿论文; 抗原决定簇论文; 健康论文; 人胎盘论文;