东南大学医学院附属江阴医院药剂科,214400
[摘要]目的：建立地西他滨中有机溶剂残留量的气相色谱分析方法。方法：采用非极性的高效毛细管色谱柱为分离柱，FID检测器，外标法进行定量，并对分离条件进行了研究。结果：甲醇、乙醇、乙醚、二氯甲烷、正己烷和甲苯的线性范围分别为32.08～802.11 ng（r=0.999 9）、50.70～1267.6 ng（r=0.999 9）、50.23～1255.7 ng（r=0.999 9）、6.064～151.6 ng（r=0.999 9）、3.03～75.64 ng（r=0.999 7）、9.07～226.73 ng（r=0.999 9），平均回收率分别为98.87%、99.48%、100.2%、99.59%、99.89%、99.94%。结论：该方法快速、灵敏、准确，可作为地西他滨中有机溶剂残留量的测定方法。
[关键词]气相色谱法；地西他滨；有机溶剂残留量
骨髓增生异常综合症(MDS)是一种罕见的造血细胞功能异常的血液疾病。包括所有法、美、英型(FAB型)的已接受治疗和未接受治疗的、新发病的和继发性的MDS患者，以及按IPSS系统分为高危险、中度2级危险、中度1级危险的MDS患者。地西他滨(decitabine)是由美国SuperGen公司研发的一种去甲基化药物，具有独特的甲基化转移酶抑制剂的治疗机制。2006年，美国FDA批准了地西他滨注射剂的上市申请，商品名为Dacogen?，用于治疗骨髓异常综合症(MDS) [1-4]。本品合成工艺中使用了甲醇、乙醇、乙醚、二氯甲烷、正己烷、甲苯等有机溶剂，均属第二类或三类溶剂，为保证药品质量和用药安全，笔者参考相关文献[5-8]建立了上述有机溶剂残留量测定的气相色谱方法。该方法快速、灵敏、准确，可用于实际生产中的质量控制。
1仪器与试药
1.1 仪器
岛津GC-14C型气相色谱仪，Sartorius BP211D型电子天平。
1.2 试药
甲醇、乙醇、乙醚、二氯甲烷和甲苯均为分析纯（南京化学试剂有限公司），正己烷为色谱纯（天津市科密欧化学试剂有限公司），N,N-二甲基甲酰胺（DMF）为色谱纯（美国TEDIA公司）；地西他滨（批号：101201、101202、101203，自制）。
2 方法与结果
2.1色谱条件
色谱柱：SE-54高效毛细管色谱柱（30 m×0.53 mm，1 μm），内涂5%二苯基-1%乙烯基-94%二甲基聚硅氧烷；柱温：30 ℃保持7 min后，以8 ℃?min-1升至120 ℃，保持5 min；进样口温度：200 ℃；检测器（FID）温度：230 ℃；载气：N2；分流比：1:50；进样量：1 μL。
2.2 溶液的制备
2.2.1 混合对照品溶液的制备 精密称取甲醇、乙醇、乙醚、二氯甲烷、正己烷、甲苯各适量，加DMF溶解并稀释制成每1 mL中含0.15 mg、0.25 mg、0.25 mg、0.03 mg、0.0145 mg、0.0445 mg的混合溶液，即得。
2.2.2 供试品溶液的制备 取地西他滨适量，精密称定，加DMF溶解并稀释制成每1 mL中含50 mg的溶液，即得。
2.3色谱峰定性试验
分别精密吸取甲醇、乙醇、乙醚、二氯甲烷、正己烷、甲苯各1 μL，按“2.1”项下的色谱条件进样，记录色谱图。甲醇的保留时间为1.288 min、乙醇的保留时间为1.652 min、乙醚的保留时间为2.120 min、二氯甲烷的保留时间为2.508 min、正己烷的保留时间为3.854 min、甲苯的保留时间为11.336 min。结果见图1。
图1 气相色谱图
（A-甲醇、B-乙醇、C-乙醚、D-二氯甲烷、E-正己烷、F-甲苯和G-混合溶剂的色谱图）
2.4 线性关系考察
精密称取甲醇802.11 mg、乙醇1267.60 mg、乙醚1255.66 mg、二氯甲烷151.60 mg、正己烷75.64 mg和甲苯226.73 mg置于同一50 mL量瓶中，用DMF溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取该溶液0.2、0.5、1、2和5 mL分别置100 mL量瓶中，加DMF稀释至刻度，摇匀。分别精密量取1 μL注入气相色谱仪，记录峰面积。以进样量（ng）为横坐标，峰面积（A）为纵坐标绘制标准曲线，并计算回归方程，结果见表1。
2.5精密度试验
取“2.4”项下的中间浓度溶液，连续进样5次，以各溶剂的峰面积计算，甲醇、乙醇、乙醚、二氯甲烷、正己烷和甲苯的RSD分别为2.15%、2.09%、2.05%、2.02%、2.06%、2.06%，结果表明该法精密度良好。
2.6 重复性试验
取各有机溶剂和地西他滨(批号：101201)适量，按“2.2”项下方法制备混合对照品溶液和6份供试品溶液，分别进样分析。甲醇的残留量为0.034%，RSD值为2.42%；其他溶剂均未检出。结果表明该法重复性良好。
2.7 检测限测定
精密称取各溶剂适量，用DMF溶解后逐级稀释并测定，以信噪比3:1计算，甲醇、乙醇、乙醚、二氯甲烷、正己烷和甲苯的检测限分别为0.44 ng、0.75 ng、0.64 ng、0.89 ng、0.62 ng、0.91 ng。
2.8 回收率实验
取各溶剂适量，用DMF制成每1 mL中含甲醇、乙醇、乙醚、二氯甲烷、正己烷和甲苯分别为1.5 mg、2.5 mg、2.5 mg、0.3 mg、0.145 mg和0.445 mg的贮备液。取本品0.5 g，9份，置于10 mL量瓶中，分别加贮备液0.8 mL、1.0 mL、1.2 mL，每个浓度平行三份，再加DMF稀释至刻度，摇匀，进样分析，计算，甲醇、乙醇、乙醚、二氯甲烷、正己烷和甲苯的回收率分别为98.87%（RSD=2.12%）、99.48%（RSD=1.27%）、100.2%（RSD=1.33%）、99.59%（RSD=1.83%）、99.89%（RSD=1.35%）、99.94%（RSD=1.39%），结果表明该法准确性良好。
2.9样品测定
取对照品溶液和供试品溶液进样测定．按外标法以峰面积定量计算。3批地西他滨样品(批号：101201、101202、101203)中甲醇的残留量分别为0.034%、0.036%、0.037%，其他溶剂均未检出。
3 讨论
地西他滨为脂溶性药物，因此选择DMF作溶剂。另外采用梯度程序升温，既可以保证各溶剂峰之间分离度良好，又可以避免DMF溶剂的干扰。
采用该法实验，各溶剂的峰面积与进样量之间呈良好的线性关系，精密度、重现性均符合规定（RSD≤10%），回收率亦符合规定（80%～120%），因此该法快速、灵敏、准确，可用于本品的质量控制。
参考文献
[1] 陈玲.世界上市新药[J]. 中国药科大学学报，2007，38(5)：A1-A2.
[2] 曹蕾，梁可，张浩，等.治疗骨髓增生异常综合征的新药——地西他滨(decita bine)注射液[J]. 中国处方药，2007，11(68)：82-83.
[3] 毛联岗，段全晓，季锡平.地西他滨（DECITABINE）合成研究进展[J].中国中医药咨讯，2010，2（13）：182-183.
[4] 张红梅.病态造血在骨髓增生异常综合征中的特点及诊断价值[J].中国当代医药，2010，17（34）：86-87.
[5] 李谢，陈林，孙强，等.地西他滨的合成研究[J].化工时刊，2010，24（11）：42-44.
[6] 张春青，王冕，杨小勇，等. 毛细管气相色谱法测定盐酸吉西他滨中有机溶剂残留量[J].中国药业，2010，19（20）：35-36.
[7] 赵玉新，刘丹，任吉秋. 气相色谱法测定头孢孟多酯钠的残留溶剂[J].中国医药导报，2010，7（13）：49-50.
[8] Kun-Tsan LIN，Richard，Georges E.Rivard.High-Performance Liquid Chromatographic Analysis of Chemical Stability of 5 - Aza- 2’- deoxycytidine[J].Journal of Pharmaceutical Sciences，1981，70(11)：1228-1232.
论文作者:张静霞
论文发表刊物:《医师在线》2017年5月上第9期
论文发表时间:2017/7/4
标签：色谱论文; 甲醇论文; 乙醚论文; 甲烷论文; 甲苯论文; 溶剂论文; 乙醇论文; 《医师在线》2017年5月上第9期论文;