摘要：口腔疾病是一种常见疾病，各种类型的口腔疾病给患者带来了很大的痛苦，它的治疗方法比较多。随着口腔疾病的临床治疗技术不断地发展，医学研究中发现，牙周膜具有再生治疗价值，牙周膜细胞组织的再生修复功能，在口腔疾病的治疗中被广泛应用。本文针对临床中牙周膜的再生治疗相关内容，进行了分析，希望给大家提供一个参考。
关键词：牙周膜；再生治疗：牙周膜临床治疗
最近几年，口腔医学对成体干细胞的研究逐渐深入，在口腔组织中运用成体干细胞的实验已经开始。这种牙周膜的干细胞，也需要对其进行认证与分离，进一步研究其特性。那么，从牙周膜本身来看，牙周膜细胞是由异性细胞群组成，细胞之间是不同差异的亚型，细胞亚型的分化阶段与分化趋势也不相同，所以在功能和状态上也存在差异，这些细胞具有生成牙骨质细胞和成骨细胞的功能，这样就为牙周组织的再生修复提供了条件。下面我们看下牙周膜再生技术，具体的研究方法与结果表现。
1牙周膜再生研究运用的材料以及具体方法
研究和实验任何一项新的科学技术，我们都要从实验运用的材料、具体方法开始。那么牙周膜再生技术的研究中都用到哪些材料和方法呢？首先，这个试验中用到很多的材料试剂和仪器，比如一些培养液、还有显微镜、离心机以及国外进口的工作台等设备，这其中很多高端的设备都价格很高，而且这些先进精密的仪器在实验中也发挥了重要的作用。同时实验研究也离不开合适的研究方法，比如这次实验中我们用到的，组织块法细胞原代培养方法，免疫细胞化学染色及hPDLP的表面抗体等，都是研究细胞再生中要用到的方法，下面我们就来具体看一看吧。
1.1主要试剂和仪器介绍。DMEM培养液、FBS（Gibco公司，美国），胰蛋白酶、二甲基亚砜、地塞米松、L-抗坏血酸、beta；-甘油磷酸钠、消炎痛、3-异丁基-1-甲基-黄嘌呤、胰岛素、beta；-巯基乙醇（beta；-mercap-toethanol，beta；-ME）（Sigma公司，美国），鼠抗人多抗、鼠抗人CD146多抗（RDSystems公司，美国），CO2细胞培养孵箱（Heraeus公司，德国），超净工作台，低温高速离心机（Heraeus公司，德国），倒置显微镜及照像系统。
1.2免疫细胞化学染色hPDLP的表面抗体。取生长良好的第1代细胞制备细胞爬片，用SABC法染色进行波形丝蛋白Vimentin、角蛋白Keratin、STRO-1、CD146免疫组化染色，阴性对照用PBS代替一抗，其余步骤不变，进行细胞来源及表达检测，光镜观察。
1.3组织块法细胞原代培养。收集临床上12～18岁因正畸需要拔除的牙周健康、无龋的新鲜前磨牙，拔除后立即在双抗PBS液和DMEM液中反复清洗牙齿，刮下根中1/3牙周膜组织，剪成mmtimes；0.5mmtimes；0.5mm左右的小块。
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2牙周膜再生研究的结果以及具体分析
采用上面的方法来进行研究显示：人牙周膜的细胞群可以进行培养，可以直接用组织块法进行培养，培养后生成的细胞就是我们需要的牙周膜细胞。国内外对hPDLP细胞，具有多向分化潜能特性研究很多，但对其具有多向诱导分化的潜能研究比较少。这个实验通过研究hPDLP的特性，对其是否具有干细胞群的潜能作进一步的探索。在研究实验中可以看到，PDLSC的获得靠有限稀释法克隆化培养纯化，PDLSC的特性与hPDLP的特性有一定差异，细胞在状态上不同，PDLSC是圆形或者不规则形，其周围细胞体积比较小，一部分呈现梭形和多角形状，还有一部分是纤维细胞形状。hPDLP细胞主要是成纤维样细胞，细胞体比较大，还有一小部分是不太规则的形状。通过对比很明显看到二者在形状上的差异。下面我们来具体分析一下。
2.1成脂诱导结果相关情况的分析。把hPDLP细胞放在显微镜下进行观察，hPDLP在成脂诱导剂的诱导下，一部分细胞质里，出现脂肪滴，脂肪滴大小不一致，均被染色。牙周膜细胞经过脂肪的诱导，在显微镜下观察到，细胞质里有脂滴形成，但这种脂滴比hPDLP最后形成的要少。
2.2细胞生长情况的相关分析。把牙周膜细胞用组织块法进行原代培养，一段时间后就可以看到，在组织的边上游出了细胞，这些细胞形状上差不多，多数为纤维状呈现梭形。也有一小部分形态各异，比如椭圆形和纺锤形，以及多角形等。细胞体积都很小，但是细胞体整体很丰满，有一两个地方突起，由组织中心向两边扩散状，生长速度都很快，传代比例为1∶2，细胞生长状态特别稳定和活跃。
2.3成骨诱导结果相关情况分析。用矿化液培养细胞，在一段时间之后，细胞的复层开始生长，而且开始逐渐增厚，呈现局灶状，中间的部分呈现许多颗粒化的改变，并一点点的连成片状，密度也一跟着一点一点的增厚。慢慢的，在左右两侧的孔板底部会出现一些小结节，这些小结节用肉眼都可以很清晰地看到，都是灰白颜色的，一点点增大的同时会变色，一段时间后可以看见呈棕色或红色。
3结束语：
前面对口腔临床中牙周膜的再生治疗进行了分析，包括具体的实验过程和结果比较等方面，使我们对牙周膜的再生研究有了初步的认识。科学在进步，医学在向前不断发展，在治疗口腔疾病的领域，也不断进行着探索，牙周膜的治疗方面不断在开展研究，牙周膜的再生治疗技术受到医学界各方面的关注。牙周膜的再生研究，也在实验中逐渐的走向明朗。牙周膜的再生研究从hPDLP细胞的分化能力上，进行了进一步的深入探索，包括细胞的成脂方向以及矿化。从研究的结果来观察，hPDLP细胞具有诱导分化的能力，可以对细胞群进行分化，这个重要的鉴定结果，可以为牙周膜的再生治疗提供重要条件和依据，也为牙周膜再生技术在口腔是临床中的应用，提供宝贵的理论基础，为口腔临床治疗领域的发展前进了一大步。
参考文献
[1]孙蕾，朱慧勇.间充质干细胞非分化性增殖的研究进展[J].国际口腔医学杂志，2009，36（2）：235-238.
[2]金岩.组织工程学原理与技术[M].西安：第四军医大学出版社，2004：36-50.
论文作者:徐朝勋
论文发表刊物:《健康世界》
论文发表时间:2015/9/9