勃利县中医院 154500
摘要:目的 分析检验腹泻患者粪便中小肠结肠炎耶尔森菌的作用。方法 以2016.8-2017.5期间经检查确诊为腹泻的194例患者为本次观察对象,所有患者入院后取其新鲜粪便,分别行培养法、PT-PCR法对小肠结肠炎耶尔森菌进行检验,并根据检验方法的不同范围分为观察组(PT-PCR法)、对照组(培养法),观察不同检验方式患者小肠结肠炎耶尔森菌检出情况。结果 观察组病菌检出阳性率为19.6%高于对照组阳性率10.3%,观察组用于病菌检验价值高,P<0.05。结论 临床对腹泻患者粪便中小肠结肠炎耶尔森菌检验使用PT-PCR法,具有较高的检出率。
关键词:检验;耶尔森菌;粪便;腹泻
[Abstract] Objective To analyze and test the effect of Yersinia enterocolitica in feces of diarrhea patients.Methods 194 patients with diarrhea diagnosed by examination during the period from August 2016 to May 2017 were selected as the objects of this observation.After admission,fresh feces of all patients were collected and tested for Yersinia enterocolitica by culture method and PT-PCR method respectively.According to the different scope of test methods,the patients were divided into observation group(PT-PCR method)and control group(culture method).The patients with different test methods were observed for small intestine and colon.Detection of Yersinia Inflammatis.Results The positive rate of bacteria detection in the observation group was 19.6% higher than that in the control group(10.3%).The value of bacteria detection in the observation group was higher than that in the control group(P < 0.05).Conclusion PT-PCR has a high detection rate for Yersinia enterocolitica in feces of diarrhea patients.
[Key words] test;Yersinia;feces;diarrhea
腹泻是临床最为常见的肠道疾病,病因较多如着凉、病菌感染、食物中毒等,患者主要表现为排便次数增加、粪便形态改变,但对于病菌感染致腹泻者,通常伴有恶心呕吐、腹痛、发热等症状。目前已知的腹泻致病菌大概上百种,小肠结肠炎耶尔森氏菌是临床常见感染性疾病,病菌可在肉类、蔬菜、乳制品等多种食物、环境、动物粪便中存在,传播途径多,可造成急性胃肠炎[1]。感染者临床除了常见的胃肠炎症状、发热等,部分患者还会出现败血症、阑尾炎、反应性关节炎,由于疾病多发于婴幼儿,若不及时治疗严重者可致患者死亡,因此如何提高临床对粪便中病菌检出率得到相关学者关注[2]。本文观察2016.8-2017.5期间194例腹泻患者分别以培养法、PT-PCR法进行检验粪便中病菌情况,旨在为今后病菌临床检测提供依据。
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1 资料与方法
1.1 一般资料
以2016.8-2017.5期间经检查确诊为腹泻的194例患者为本次观察对象,所有患者入院时均出现不同程度每日排便次数增加(大于3次)及粪便形状改变情况,经检查确诊为腹泻,患者自愿参与。本次入院的194例患者,年龄区间8个月-75岁,平均(39.5±4.6)岁,男104例、女90例;病程1-6天,平均(3.7±0.5)天,排便次数3-7次,平均(4.8±0.3)次。
1.2 方法
患者于入院后24小时内取大便标本,置于洁净、干燥的容器内保存,注意避免标本中混有水、尿等杂质,后取0.5g粪便标本置入增菌液44.5ml0.9%氯化钠溶液中进行培养,培养环境设置温度16℃,培养时间18小时。
对照组:取培养后的标本5μg 接种于 CIN 平板上,并再次进行培养,条件温度25℃、时间24小时,后将标本菌株与标准菌株进行比较。
观察组:取培养后容器内混合物200 μg,行DNA 提取,PCR扩增,长度大约为 150 bp,反应体系包括:预混合液、探针、引物、模板、BSA,反应发生条件温度95℃,注意检验中设对照组。
1.3 观察指标
观察不同检验方式患者小肠结肠炎耶尔森菌检出情况。本次培养法阴性、阳性判断标准:以标准菌株作为阳性对照,若培养的菌株不具备标准菌的生化反应则为阴性,若出现与标准菌相同的反应则为阳性;PT-PCR法阴性、阳性判断标准:根据反应前后荧光差值进行判断,若样品经PCR扩增后未出现与预期相同大小的条带,则判定为阴性,若扩增后显现与预期相同大小条带则为阳性。
1.4 统计学分析
以SPSS19.0系统行数据统计学分析,计数、计量资料分别以n(%)、()表示,采用χ2或t检验,结果以P<0.05为有显著差异。
2 结果
不同检验方式病菌检出情况比较,观察组病菌检出阳性率为19.6%高于对照组阳性率10.3%,观察组用于病菌检验价值高,P<0.05。
3 讨论
小肠结肠炎耶尔森菌是临床病情较重的传染性疾病,多发于秋冬季、婴幼儿,其症状与其他腹泻症状相似,难以鉴别易造成忽视,导致治疗时临床使用非敏感性抗菌药治疗,不仅使病情延误,还致使患者肠道外并发症(肝脾疾病、关节炎等)严重,引发不良预后情况[3]。因此如何有效诊断疾病得到临床关注,目前临床主要通过实验室方法(如培养法)对患者粪便进行检查来判断。
本次研究中對照组检验阳性率为10.3%,结果表明对粪便中耶尔森菌以培养法检验具有一定积极性意义。其采用人工方法使细菌生长繁殖,操作简便、流程少,可用肉眼观察结果进行判断。但观察组本次检验阳性率为19.6%高于对照组,提示PT-PCR法用于病菌检查检出率较高。分析原因培养法检测中需要严格执行无菌操作,一旦受外界污染便会导致错误结果,同时其检验耗时较长,可能会延误疾病治疗,引发不良后果,而PT-PCR法利用生化技术,通过提取RNA,以mRNA为模板、反转录为cDNA,并对其行PCR扩增,从而检测病菌基因表达[4]。此种检查方法能对样品进行定性、定量分析,临床检测特异性强、灵敏性高,且得到结果快速,用于耶尔森菌检查检出率高,便于临床准确掌握患者感染情况,从而及时给予合理治疗,促患者康复[5]。但PT-PCR法也存在一定缺点,其对操作者技术、检测仪器设备要求较高,且有可能得到非目的片段,导致检测中出现假阳性、假阴性,影响疾病诊断的准确度。
综上所述,临床对腹泻患者粪便中小肠结肠炎耶尔森菌检验使用PT-PCR法,具有较高的检出率。
参考文献:
[1]周旭.腹泻粪便中小肠结肠炎耶尔森菌检验的价值结果分析[J].中国医药指南,2014,12(14):102-103.
[2]张景艳,荣幸,张永旭等.腹泻粪便中小肠结肠炎耶尔森菌检验的价值分析[J].中国卫生标准管理,2016,7(7):161-162.
[3]符倚川,赵艳,高运安等.两种方法检验腹泻粪便中小肠结肠炎耶尔森菌的结果比较[J].医学临床研究,2016,33(9):1823-1824.
[4]姜晓梅,李刚山,王意银等.小肠结肠炎耶尔森菌的分离鉴定及毒力基因检测[J].西南国防医药,2015,25(8):844-846.
[5]张爱华,刘瑜.腹泻粪便中小肠结肠炎耶尔森氏菌检验的价值分析[J].中外医学研究,2013,11(4):72.
论文作者:杨胜宝
论文发表刊物:《健康世界》2019年6期
论文发表时间:2019/7/23
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