蒋定文, 郭明秋, 陈立茵, 沈先荣, 陈伟[1]2010年在《胸腺基质细胞对热应激小鼠胸腺细胞亚群变化及HSP70表达的影响》文中研究指明目的探讨胸腺基质细胞(TSC)对热应激小鼠胸腺细胞的调节作用。方法应用光镜、电镜、流式细胞术等观察初代培养的TSC对热应激胸腺细胞发育的调节作用。结果 TSC可大量粘附和吞噬胸腺细胞,使热应激胸腺细胞数量明显减少,但尚存的胸腺细胞中活细胞比例却明显增加,凋亡率明显减少。TSC可促进热应激胸腺细胞HSP70表达增加,使热应激胸腺细胞的DP及SP细胞,尤其是DP细胞数量明显减少。结论 TSC可清除大量的热应激胸腺细胞,TSC促进热应激胸腺细胞HSP表达增高可能具有双重意义:既可保护胸腺细胞,又可促进TSC识别和吞噬已受损的或凋亡的胸腺细胞。
蒋定文[2]2000年在《胸腺基质细胞对热应激小鼠胸腺细胞调节作用的研究》文中研究表明目的 探讨胸腺基质细胞对正常及热应激损伤小鼠胸腺细胞的调节作用及其机制。 方法 取5周龄BALB/c雄性小鼠胸腺，制成小鼠胸腺细胞悬液，43℃热应激1h后，与初代培养的小鼠胸腺基质细胞（TSC）及50％初代胸腺基质细胞培养上清（TSC-SN）共同培养，在培养的第0、6、12、24、48h收集胸腺细胞，计数胸腺细胞总数及存活率，用流式细胞仪分析胸腺细胞的凋亡率、表达Fas、Fas-L和HSP70的阳性率及CD4CD8细胞亚群变化情况，并用光镜和电镜观察TSC与胸腺细胞的相互作用。 结果（1）热应激使胸腺细胞凋亡率、Fas、Fas-L及HSP70表达增高，胸腺细胞凋亡与Fas、Fas-L的表达密切相关。（2）非应激的胸腺细胞与TSC共培养后，存活率增高，凋亡率及Fas、Fas-L表达降低，但细胞总数及CD4~+CD8~+（DP）细胞均显著减少，CD4~+CD8~-和CD4~-CD8~+（SP）的细胞比例明显增加。（3）与TSC共培养的热应激胸腺细胞，细胞总数显著减少，DP细胞与SP细胞均减少，HSP70的表达比热应激对照组增加，凋亡率及Fas、Fas-L的表达均低于单独培养的热应激对照组，但明显高于与TSC共培养的非应激的胸腺细胞组。（4）光镜和电镜可观察到TSC大量粘附和吞噬正常及热应激胸腺细胞，其中被TSC吞入的胸腺细胞和一些被粘附的胸腺细胞已凋亡。（5）TSC-SN可使体外培养的热应激胸腺细胞凋亡率和Fas、Fas-L表达阳性率下降，使正常胸腺细胞凋亡率和Fas表达阳性率下降，但对正常及热应激胸腺细胞HSP70的表达无明显影响。 结论（1）Fas/Fas-L介导的凋亡是体外培养胸腺细胞自发的及热应激诱导的主要死亡形式，热应激主要诱导DP胸腺细胞凋亡，HSP70表达增高是热应激胸腺细胞损伤的标志；（2）TSC与正常胸腺细胞的直接接触具有两种生物作用，①吞噬清除DP细胞；②可能促进部分DP细胞分化为成熟的SP细胞，使DP细胞减少，SP胸腺细胞增加；（3）热应激胸腺细胞中的DP细胞和SP细胞均可被TSC吞噬，TSC促进热应激胸腺细胞HSP70表达增高可能具有双重意义，既可保护胸腺细胞，又l 可促进TSC识别和吞噬己受损或凋亡的胸腺细胞，发挥免疫监视作用，lIHSP70在抗原提呈中的作用，可能是热应激损伤胸腺细胞中刃细胞也 lD 可被HC识别和吞噬的分子基础；N）TSC对非应激胸腺细胞保护作用Dl 明显强于对热应激胸腺细胞，胸腺细胞表达Fas、Fas千与凋亡的密切ll 关系提示一种胸腺细胞排除的机制；门）在体外，T％｛N对正常和热 lD 应激损伤的胸腺细胞有一定的保护作用。
肖珂[3]2016年在《基于RNA-Seq技术的雏鸵鸟胸腺应答硼刺激分子机制研究》文中认为非洲鸵鸟具有很大的经济价值和科学价值。鸵鸟育雏期长达3个月,人工养殖的鸵鸟容易受到应激、感染和疾病的影响,使得育雏期鸵鸟的发病率和死亡率高达10%-50%。此外,鸵鸟是快速生长的鸟类,育雏期鸵鸟个体发育差别较大,免疫机能的强弱直接反应了育雏期鸵鸟生长发育状况。胸腺是机体内重要的中枢免疫器官和淋巴器官,也是机体抵抗外界抗原刺激,参与机体T淋巴细胞分化的重要免疫器官。硼是动物体必需的微量元素,具有多种生物学功能。硼在免疫系统中发挥重要的调节作用,适量的硼有利于免疫器官的生长发育。本试验选取1日龄的雏鸵鸟作为研究对象,饮水中添加梯度剂量的硼酸,饲喂至90日龄,宰杀取胸腺。研究硼对鸵鸟中枢免疫器官胸腺的调节作用,阐释硼参与鸵鸟机体免疫应答的作用机制。1.硼对雏鸵鸟胸腺生长发育相关基因的影响Foxn1参与胸腺上皮细胞的分化发育过程,并发挥关键调控作用,BMP2和BMP4参与调控胸腺T细胞的发育,Foxn1,BMP2和BMP4基因与胸腺内环境稳态密切相关。研究不同水平的硼对鸵鸟胸腺细胞凋亡的影响及对鸵鸟胸腺发育相关基因Foxn1,BMP2和BMP4的表达调控,为揭示硼对鸵鸟胸腺发育影响的相关机制提供参考。HE染色技术观察硼对雏鸵鸟胸腺组织学结构的影响,RACE PCR克隆鸵鸟Foxn1基因的序列,免疫组织化学技术和western blot技术检测Foxn1蛋白在鸵鸟胸腺内的定位表达。免疫荧光技术检测BMP2和BMP4蛋白在鸵鸟胸腺内的表达。荧光定量PCR技术检测Foxn1基因,BMP2基因和BMP4基因的mRNA表达水平。TUNEL技术检测鸵鸟胸腺内细胞凋亡情况,免疫组织化学检测活化体caspase-3在鸵鸟胸腺内的定位表达。实验结果如下:(1)HE染色观察硼对雏鸵鸟胸腺组织学结构的影响,高剂量硼组(B320组和B640组)胸腺的形态结构不完整,皮髓交界分界不清楚,胸腺皮质内出现“星空状”外观,胸腺细胞急剧减少和空竭,胸腺髓质内淋巴细胞增多,胞核固缩深染,B640组胸腺胸腺结构破坏最严重,胸腺上皮细胞空泡化,髓质部最明显。低剂量硼组(B40和B80)胸腺形态结构与对照组基本一致。(2)TUNEL技术检测雏鸵鸟胸腺内细胞凋亡,与对照组相比,B80组和B160组胸腺内凋亡细胞数量较少,B320组和B640组胸腺内凋亡细胞数量增多,凋亡细胞成群分布。(3)Caspase-3活化体检测发现,B320组和B640组胸腺内活化体caspase-3阳性信号显著增强,高剂量的硼诱导caspase-3的活化,诱发鸵鸟胸腺细胞凋亡。(4)racepcr克隆扩增鸵鸟foxn1基因,随机引物扩增鸵鸟foxn1基因中间保守片段,长为1477bp,5’race和3’race的长度分别为384bp和1050bp,全长为2736bp,编码654个氨基酸。鸵鸟foxn1基因是高度保守的基因,与猎隼、虎皮鹦鹉、游隼、石鸽、野鸭和鸡的foxn1基因同源性分别为92.1%,91.1%,90.8%,89.6%,88.1%和83.5%。(5)foxn1阳性信号主要分布在鸵鸟胸腺髓质部,胸腺皮质部有少量分布,主要标记胸腺上皮细胞。80mg/l的硼酸剂量组能够显著提高foxn1蛋白在鸵鸟胸腺中的表达,而640mg/l的硼酸剂量能够显著降低foxn1蛋白在胸腺中的表达。(6)bmp2和bmp4的mrna表达水平呈硼剂量依赖性,表达趋势先上升后下降,在80mg/l的硼处理组中,bmp2和bmp4在鸵鸟胸腺内显著高表达,在640mg/l的硼处理组中,bmp2和bmp4的表达水平被显著抑制。饮水中添加适量的硼促进雏鸵鸟胸腺的发育,鸵鸟胸腺正常发育;过量的硼导致雏鸵鸟胸腺组织学结构破坏,诱发雏鸵鸟胸腺内细胞凋亡,活化体caspase-3表达增强,抑制雏鸵鸟胸腺的正常发育。80mg/l硼促进bmp2,bmp4,foxn1蛋白的表达,bmp2,bmp4,foxn1蛋白表达适度增加会促进胸腺上皮细胞的分化发育,从而促进t细胞的分化发育,增强鸵鸟机体免疫抵抗力。高剂量的硼(640mg/l)显著抑制bmp2,bmp4,foxn1蛋白在鸵鸟胸腺内的表达,导致鸵鸟胸腺结构的破坏和退化,胸腺的皮髓交界处损坏严重,胸腺上皮细胞分化发育受阻,抑制t细胞的正常生长发育,降低鸵鸟机体免疫机能。2.雏鸵鸟胸腺应答硼刺激的rna-seq分析为了深入研究硼参与鸵鸟免疫应答的作用机制,本研究采用rna-seq技术,首次对微量元素硼在鸵鸟胸腺免疫应答反应中的作用进行了高通量测序分析。本试验共选取3个样本进行rna-seq分析,分别是对照组鸵鸟胸腺,b80组鸵鸟胸腺,b640组鸵鸟胸腺。rna-seq分析结果显示:(1)3个鸵鸟胸腺测序文库(control组样本文库,b80组样本文库和b640组样本文库),分别包含3220173000,3427886800和3199872000条rawdata。control组样品,b80组样品和b640组样品的cleanreads数分别为3175394800,3379919000和3157669200,cleandata占reads总数的比例分别为98.61%,98.60%和98.68%。(2)control组样品,b80组样品和b640组样品单一比对上鸵鸟参考基因组的reads数分别为11929989,12851275和11411617,占总reads的比例分别为75.14%,76.04%和72.28%。(3)基因覆盖度统计分析显示,三个文库中测序覆盖度达90-100%的基因数量占总数量的比例分别为72%,71%和69%。(4)成对差异基因统计结果显示:control组和b640组,b80组和b640组,control组和b80组差异基因比较总计分别有2044个(上调基因228个,下调基因1816个),1085个(上调基因222个,下调基因863个)和902个(上调基因309个,下调基因593个)差异基因。(5)差异基因趋势分析结果显示:本试验中所有的差异基因共分成了7种表达趋势,其中趋势0,趋势1和趋势3具有差异显著性。趋势0中共包含1290个差异基因,在3个文库中(control,b80和b640)的表达依次呈现持续下降的趋势;趋势1中共包含1030个差异基因,在3个文库中的表达依次呈现先下降后保持不变的趋势;趋势3中共包含1487个差异基因,在3个文库中的表达依次呈现先上升或不变后下降的趋势。(6)差异基因kegg信号通路富集分析结果显示:富集前10条信通路中细胞因子-受体互作通路,癌症通路,钙离子信号通路,肌动蛋白细胞骨架调节通路和mapk信号通路显著富集,这些信号通路主要参与机体的免疫应答及炎症应答过程。(7)成对样品差异基因kegg富集结果显示,除上述信号通路,硼还参与toll样受体信号通路,b细胞受体通路,t细胞受体通路和凋亡通路的调节。由此表明,硼对鸵鸟机体的炎症及免疫机能的相关信号通路的影响,主要包括mapk信号通路,钙离子通路,b细胞受体通路,t细胞受体通路,肌动蛋白调节信号通路,toll样受体信号通路,凋亡信号通路及癌症信号通路。3.硼对鸵鸟机体免疫、炎症及生长发育相关通路的影响为了进一步验证rna-seq的分析结果,并探讨不同剂量的硼对鸵鸟胸腺内免疫机能相关信号通路的影响作用,本项目对参与免疫机能调节的信号通路进行了研究,主要包括mapk通路,钙离子通路,b细胞受体通路,t细胞受体通路,toll样受体通路,癌症信号通路以及细胞凋亡通路。(1)硼对mapk通路活性的影响:共有27个差异基因富集到mapk信号通路中,control组和b80组中的大部分基因表达上升,而b640组中的基因多数表达下调,27个差异基因中有24个基因表达下降,3个基因表达上升。硼能够影响鸵鸟机体内ras/erk通路,jnk通路和p38mapk通路,但不能参与erk5通路的调节。qrt-pcr及westernblot验证结果显示,80mg/l硼促进了鸵鸟胸腺内p-erk,p-jnk和p-p38蛋白水平的表达,随着硼剂量的增加,p-erk,p-jnk和p-p38蛋白表达水平逐渐降低,在640 mg/L硼组蛋白表达水平最低。硼能够调节ERK,JNK以及p38MAPK通路中激酶的表达水平,影响MAPK信号通路的活性。(2)硼对钙离子通路活性的影响:共有11个差异基因富集到钙离子通路中,硼主要调节钙调磷酸酶(CaN)和钙调素依赖蛋白激酶(CaMK)的活性。硼对CaN的两个亚基均有调节作用,主要调控PPP3R1的活性,对PPP3CA的调节作用较小。硼能够通过调节Ca N的活性,影响CaN下游转录因子NFAT和MEF2C的表达水平,参与Ca2+-CalcineurinNFAT信号通路活性调节。(3)硼对B细胞受体信号通路和T细胞受体信号通路活性的影响:共有7个差异基因富集到B细胞受体信号通路中,共有11个差异基因富集到T细胞受体信号通路中。T、B细胞受体能够介导肌动蛋白细胞骨架,MAPK通路,PI3K-AKT通路以及Ca N-NFAT通路的活化。根据KEGG和荧光定量分析结果,显示硼能够影响PI3K激酶的活性,调控PI3K-AKT通路。硼对T、B细胞因子受体通路的影响作用与MAPK通路,钙离子通路以及PI3K-AKT通路的活性密切相关。(4)硼对Toll样受体通路活性的影响:共有11个差异基因富集到Toll样受体信号通路中,硼对Toll样受体通路的调节包括两部分,不仅能够调控MyD88依赖性信号通路,也能够调控MyD88非依赖性信号通路。并且高剂量硼对鸵鸟机体中Toll样受体信号通路的调节呈现负调控调节,抑制了Toll样受体信号通路的活化,影响机体免疫应答的机能。(5)硼对热休克蛋白家族(HSP)的影响:热休克蛋白与机体的细胞凋亡密切相关,是一种抗凋亡蛋白。热休克蛋白家族中的代表性成员是Hsp70,Hsp70的伴侣分子是Hsp40。高剂量的硼显著抑制了Hsp70和Hsp40蛋白的表达,抑制了鸵鸟机体内热休克蛋白的抗凋亡作用以及介导机体免疫应答的能力,导致鸵鸟机体抵抗力降低。(6)硼对细胞凋亡通路及癌症通路中相关基因的影响:硼主要影响TRAIL诱导的外源性细胞凋亡通路的活性,且参与凋亡抑制蛋白FLIP和IAP的活性调节,对caspase家族的调节作用较小。硼参与鸵鸟机体内癌症信号通路的调节,主要影响癌症信号通路中Wnt信号通路,MAPK信号通路,PI3K-AKT信号通路以及细胞因子-受体互作通路的活性,这些信号通路发挥着复杂精细的调控作用,共同参与雏鸵鸟机体内细胞的分化、增殖及凋亡过程。
方静[4]2009年在《天府肉鸭中枢免疫器官胚胎及胚后发育期细胞凋亡及神经肽表达的研究》文中进行了进一步梳理本研究选用天府肉鸭150只,共分30个组,其中胚胎期分17个组(12～28天胚龄,每一胚龄为一组),胚后期分13个组(0、1、3、5、8、11、14、17、20、23、26、29、32周龄)。采用形态计量法,光镜、透射电镜、免疫组化、末端脱氧核糖核酸转移酶标记、原位杂交等技术对天府肉鸭中枢免疫器官胚胎及胚后期形态组织结构、细胞增殖与凋亡以及神经肽的表达进行动态观察与研究,同时重点观察了凋亡蛋白及其基因表达的动态变化。结果如下:1.腔上囊和胸腺胚胎及胚后发育的形态组织结构表现出明显增龄变化特性,其中胚后发育可分为继续发育期(0～8周龄)、成熟持续期(腔上囊为8～14周龄,胸腺为8～17周龄)和退化期(腔上囊为17～32周龄;胸腺为20～32周龄)。26天胚龄腔上囊和胸腺组织分化基本趋于完善;1～3周龄和3～5周龄分别为腔上囊和胸腺胚后发育的高峰期;胚后8周龄二者发育达最大。小结相关上皮(FAE)的胚后发育具有增龄变化特性,参与了胚后腔上囊滤泡皮质部的进一步发育,并与腔上囊的退化有关。胸腺中存在胸腺小体和上皮细胞囊,后者数量多且具有多种形态和功能,二者是鸭胸腺基质中的重要组成成分。腔上囊退化时间较胸腺早、退化速度较胸腺快。2.在腔上囊中,滤泡皮质淋巴细胞胞凋亡率基本呈上升(22天胚龄～新生雏),恒定(新生雏～胚后3周龄),下降(3～5周龄),恒定(5～14周龄),再上升(14～29周龄)的变化规律;滤泡髓质淋巴细胞凋亡率变化规律与皮质相似,但在1～3周龄显著升高。腔上囊滤泡皮质淋巴细胞凋亡率在22天胚龄～胚后14周龄显著低于髓质,而在胚后17～29周龄则明显高于髓质。在胸腺中,胸腺小叶皮质和髓质淋巴细胞凋亡率呈恒定(22～26天胚龄)、上升(26天胚龄～胚后8周龄),恒定(8～17周龄)、再上升(17～32周龄)的变化规律;各组胸腺皮质淋巴细胞凋亡率均高于髓质。腔上囊和胸腺淋巴细胞自然凋亡的超微结构及自然凋亡过程基本一致。淋巴细胞发生凋亡时,细胞核变化最明显,呈现多种形态。在腔上囊中,滤泡皮质和髓质淋巴细胞增殖率在胚胎期呈上升趋势,在胚后期呈下降趋势;各组滤泡皮质淋巴细胞增殖率均显著低于髓质。在胸腺中,皮质和髓质淋巴细胞增殖率在胚胎和胚后期均呈下降态势;各组皮质淋巴细胞增殖率均显著高于髓质。3.在腔上囊中,滤泡皮、髓质淋巴细胞Bcl-2阳性率以及Bcl-2/Bax值与其凋亡率之间呈反向变化关系(滤泡皮质在新生雏～胚后3周龄和5～14周龄;滤泡髓质在5～14周龄除外),而Caspase-3、Fas和FasL阳性率基本与其凋亡率呈方向一致的变化关系;Bax阳性率主要在5～29周龄与其凋亡率呈方向一致的变化关系。22天胚龄～胚后14周龄,各组腔上囊滤泡皮质淋巴细胞Bcl-2/Bax值均大于髓质,而Caspase-3、Fas和FasL阳性率则低于髓质,分别与各组皮质淋巴细胞凋亡率低于髓质呈反向和正向变化关系;胚后17～29周龄,各组皮质淋巴细胞Bcl-2/Bax值小于髓质、而Caspase-3、Fas和FasL阳性率则大于髓质,分别与各组皮质淋巴细胞凋亡率高于髓质呈反向和正向变化关系。在胸腺中,皮质和髓质淋巴细胞Bcl-2/Bax值在26天胚龄～胚后8周龄,17～32周龄与其凋亡率呈反向变化关系;Bcl-2阳性率主要在20～32周龄与凋亡率呈反向变化关系;Caspase-3、Bax、Fas阳性率与其凋亡率变化趋势基本一致,但Fas阳性率在3～8周龄与其凋亡率无明显对应关系。各组胸腺皮质淋巴细胞Bcl-2/Bax值均小于髓质,而Caspase-3、Fas阳性率则大于髓质,分别与各组皮质淋巴细胞凋亡率高于髓质呈反向和正向变化关系。在胚胎及胚后发育期,两种免疫器官中淋巴细胞P53阳性率以及胸腺淋巴细胞FasL阳性率均无增龄变化特性。4.在腔上囊中,滤泡皮质和髓质淋巴细胞bcl-2mRNA阳性率仅在胚胎期与其Bcl-2蛋白阳性率的变化规律呈一致性;在胚胎及胚后发育过程中,滤泡皮质和髓质淋巴细胞bax mRNA阳性率与其蛋白阳性率的变化规律相同(滤泡髓质20～29周龄除外);两种基因与其蛋白的组织分布不同,其表达存在转录后调控。在胸腺胚胎及胚后发育过程中,皮质和髓质淋巴细胞bcl-2和bax mRNA阳性率均与其蛋白阳性率的变化规律相似;两种基因与其蛋白的组织分布一致,其表达涉及转录水平调控。5.CGRP、VIP、SP、NPY、SS神经肽阳性细胞在腔上囊和胸腺中广泛分布,它们在两种免疫器官中的首次发生时间不同,其数量呈现一定的增龄变化规律。胸腺胚后发育过程中存在CGRP、VIP、SP、NPY肽能神经支配,优势分布于胸腺髓质。腔上囊中存在VIP神经纤维。腔上囊的FAE以及胸腺的胸腺小体和上皮细胞囊均可表达上述神经肽。本试验结果表明:在胚胎及胚后发育过程中,天府肉鸭腔上囊和胸腺的形态组织结构、细胞增殖与凋亡、凋亡蛋白与基因以及神经肽的表达表现出明显的增龄变化特性。两种免疫器官通过细胞增殖、凋亡以及神经肽的表达共同调节T、B淋巴细胞的增殖、分化和成熟,参与鸭中枢免疫器官发育和退化的调控。Caspase-3、Bcl-2、Bax、Fas、FasL、P53凋亡蛋白及其bcl-2和baxmRNA凋亡基因的表达直接调控腔上囊和胸腺淋巴细胞的凋亡。本研究从多角度和多层次首次揭示了天府肉鸭中枢免疫器官发生、发育及退化的变化规律及调控机制,将为调节其免疫器官发育和稳定,制定合理的免疫程序提供理论依据。
梁臣, 陈忠, 谢秀祯[5]2014年在《热应激影响雏鸡胸腺组织发育的研究进展》文中提出胸腺是免疫系统重要的中枢淋巴器官,高温条件下胸腺组织会遭受不同程度的损伤,产生免疫抑制,影响免疫功能。论文从热应激对雏鸡胸腺组织、胸腺细胞、相关分子表达的影响进行综述,并阐述缓解热应激对胸腺组织及免疫系统损伤的预防措施,提出了今后研究应重视的问题。
周美娟[6]2003年在《湿热环境对辐射动物损伤的影响及其机制的初步探讨》文中研究说明目的 探讨湿热环境(HHE)对辐射损伤动物的生存率、中位生存时间等的影响规律，并对其损伤机制做初步探讨。方法 1．将实验动物分别分为室温(RT)组和不同条件的HHE组，各组先分别给予5.0、7.0、9.0Gy的Co-60γ射线一次全身均匀照射，RH组动物置于RH环境下饲养，HHE组则先在HHE下作用相应的时间后也置于RH环境下饲养，观察小鼠30d的存活情况获取生存指标的变化规律；2．给予RH组和HHE组小鼠半数致死剂量(LD_(50/30))6.5GyCo-60γ射线一次全身均匀照射后，在照后第1、3、5、9、15d取小鼠外周血、骨髓有核细胞、脾脏、胸腺，观察外周血象、骨髓有核细胞数(BMC)及DNA含量、脾体比(SVBWR)、胸体比(TVBWR)等变化反应以探讨HHE对辐射损伤动物的影响机制。结果1．HHE60min以上的作用时间增加受亚致死剂量(7.0Gy)照射小鼠的死亡率、缩短平均存活时间、使中位生存时间提前(P＜0.05)；而受致死剂量(9.0Gy)照射的小鼠，HHE作用组和RT组之间各指标没有无显著差异(P＞0.05)；2．HHE作用加重辐射损伤小鼠脾脏和胸腺的萎缩，使脾体比(P＜0.05)、胸体比(P＜0.05)下降；3．HHE作用加重辐射损伤小鼠的骨髓破坏，使BMC(P＜0.05)、有核细胞DNA含量(P＜0.05)下降；4．HHE对辐射损伤小鼠外周血象的影响：外周血白细胞、淋巴细胞、红细胞、血红蛋白变化无显著差异(P＞0.05)，血小板数量在HHE组降低，差异显著(P＜0.05)。结论 HHE加重辐射损伤动物的损伤，增加死亡率，其作用机制之一是通过加重辐射损伤小鼠造血损伤以及脾脏、胸腺的损伤而引起的，其更深一步的机制有待进一步探讨。
谢鹏[7]2004年在《日粮添加二氢杨梅素对肉仔鸡肠道组织形态、微生物菌群及免疫机能的影响》文中认为为探讨二氢杨梅素(DMY)对肉鸡肠道组织形态及主要细菌菌群生长的影响和对免疫机能、生产性能的作用，共进行了3个试验。 试验1 研究DMY体外抑菌作用。通过对不同浓度的DMY与土霉素抑菌效果的比较，结果表明，0.1％以上浓度的DMY对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、鸡白痢沙门氏菌的生长均有抑制效果。0.2％的DMY对肠道内大肠杆菌的抑菌效果优于0.075％的土霉素；对沙门氏菌的抑菌效果与0.075％的土霉素相近。 试验2 选用健康AA肉鸡360只，雌雄各半。随机分为5个处理组(每组6个重复)，分别添加0、0.025％、0.05％、0.1％、0.2％DMY。测定各组试验鸡十二指肠、空肠绒毛高度和隐窝深度以及空肠、盲肠内容物中大肠杆菌、乳酸杆菌和双岐杆菌的数量。结果表明，日粮添加0.05％的DMY显著增加空肠绒毛长度，降低十二指肠隐窝的深度(P＜0.05)；添加0.2％的DMY显著缩短十二指肠绒毛长度(P＜0.05)：添加0.025％～0.2％的DMY对肉鸡肠道内大肠杆菌、乳酸杆菌和双岐杆菌的生长影响未达显著水平。 试验3 选用健康AA公肉鸡300只，随机分为5个处理组(每组6个重复)。分别添加0、0.025％、0.05％、0.1％、0.2％DMY。测定试验鸡免疫器官指数；制作免疫器官组织切片观察组织发育情况；测定血清中NDV抗体效价、白细胞介素—1β(IL-1β)、白细胞介素—2(IL-2)含量、胴体品质和生产性能。结果表明，日粮添加0.025％～0.05％的DMY能提高肉仔鸡免疫器官指数和ND抗体效价，促进免疫器官组织发育。添加0.1％～0.2％的DMY抑制免疫器官发育。日粮添加0.2％的DMY，21日龄时使肉鸡血清中IL—1β含量显著低于空白对照组和0.05％添加组(P＜0.05)。日粮添加0.1％的DMY，21日龄时显著降低肉鸡血清中IL—2含量(P＜0.05)。42日龄时，添加0.025％、0.05％的DMY使肉鸡血清中IL—2含量显著低于空白对照组和0.2％的DMY添加组(P＜0.05)。日粮添加0.025％的DMY可显著提高公肉鸡平均日增重和采食量，提高饲料转化率。显著提高公肉鸡胴体品质：全净膛率4.0％(P＞0.05)和腿肌率15.6％(P＜0.05)。
战永波[8]2010年在《治疗奶牛乳房炎蒙药复方的筛选及其抗炎免疫机理的研究》文中认为奶牛乳房炎不仅引起奶牛乳产量和乳品质降低、治疗费用和奶牛的淘汰等直接经济损失,而且还会使奶牛机体免疫力降低,从而诱发其它疾病产生,如产后炎症、产后情期延长甚或不发情、败血症、布病和口蹄疫等间接损失。因此,奶牛乳房炎是奶牛养殖业经济损失最严重的疾病。抗生素治疗是目前奶牛乳房炎治疗主要方法,但由于长时间针对性不强地滥用抗生素导致耐药菌株不断出现,使抗生素治疗效果不断下降。同时随着人们生活水平的不断提高,抗生素残留问题也日益受到消费者的关注,因此亟待寻求健康、绿色和无残留的奶牛乳房炎治疗方法。蒙医药是我国四大民族医药之一。她具有独特的蒙医药理论,蒙药典包含有多种具有抗炎免疫等生物活性的药物,从而为开发安全、绿色和健康的治疗奶牛乳房炎药物奠定了基础。因此,本研究旨在筛选有效治疗奶牛乳房炎蒙药复方,并对其抗炎免疫机理进行阐述。针对从乳房炎牛乳中分离出的奶牛乳房炎主要致病菌——金黄色葡萄球菌和大肠杆菌,结合体外抑菌试验和正交设计试验筛选出体外抑制两种致病菌的蒙药体外抑菌组方;在体外抑菌组方基础上,结合蒙医药理论和体内抗菌试验,通过正交设计试验进行药物加味,筛选出了四副治疗奶牛乳房炎蒙药复方;同时应用传统蒙医药理论配制一副治疗奶牛乳房炎传统蒙药复方。综合考虑蒙药复方体内抗菌保护率试验、复方成本和瘤胃微生物对蒙药复方体外抑菌效果的影响,对现代正交蒙药复方Ⅰ(以下简称正交蒙药复方)和传统蒙药复方继续进行抗炎免疫机理及临床疗效研究。两种蒙药复方抗炎免疫机理研究结果如下:治疗由两种致病菌混合感染的实验性小鼠乳腺炎模型的乳腺病理切片显示,能够有效抵抗致病菌的入侵,减轻小鼠腺泡结构的破坏,能够促进乳腺的恢复。对小鼠淋巴脏器指数的影响研究显示,对正常小鼠无显著影响;但对乳腺炎模型小鼠,能够显著提高淋巴脏器指数(P<0.05)。碳廓清方法研究显示,能够显著提高正常小鼠和乳腺炎模型小鼠巨噬细胞的吞噬力(P<0.05)。郭氏法研究显示,能够显著提高正常小鼠红细胞C3bRR(P<0.05),对红细胞ICR无显著影响;极显著提高乳腺炎模型小鼠C3bRR(P<0.01),并极显著降低其ICR(P<0.01)。MTT法研究显示,能够极显著提高正常小鼠和乳腺炎模型小鼠脾脏中NK细胞活性(P<0.01)。流式细胞术研究:对正常小鼠外周血CD3+细胞、CD4+细胞、CD8+细胞和CD19+细胞百分率无显著影响,但可显著提高CD4+/CD8+比值(P<0.05);能够极显著提高乳腺炎模型小鼠CD3+细胞、CD4+细胞、CD19+细胞百分率和CD4+/CD8+比值(P<0.01),对CD8+细胞百分率影响不显著。放射免疫分析法研究显示,能够极显著提高乳腺内IL-2的含量(P<0.01),极显著抑制IL-6和TNF-α的升高(P<0.01),极显著降低NAGase的浓度(P<0.01)。表明两种蒙药复方能够通过提高单核巨噬细胞吞噬力、NK细胞活性和红细胞免疫提高非特异性免疫功能,通过提高B细胞、T细胞百分率和CD4+/CD8+比值提高特异性免疫,并能够通过调节IL-2、IL-6和TNF-α的分泌量提高免疫、降低炎症损伤、从分子水平对免疫应答进行调节。从而消除病原微生物,从器官、细胞和分子等不同水平对小鼠乳腺炎的免疫生理进行调控。两种蒙药复方的抗炎试验研究结果如下:两种蒙药复方能够极显著抑制醋酸所致小鼠毛细血管通透性的升高(P<0.01),且传统蒙药复方的效果显著高于正交蒙药复方(P<0.05);能够显著抑制炎症局部的肿胀(P<0.05),并且能够极显著抑制甲醛所致大鼠肿胀足中PGE2含量的升高(P<0.01);能够极显著抑制由脱脂棉球导致的肉芽肿(P<0.01);ELISA法研究表明能够极显著降低小鼠血清中细胞间黏附分子-1和E选择素的升高(P<0.01);含蒙药复方血清能够极显著抑制LPS导致的人脐静脉内皮细胞培养液中NO含量的升高(P<0.01)。表明两种蒙药复方能够通过调控PGE2、细胞间粘附分子-1、E-选择素和NO等炎症介质抑制毛细血管通透性升高、炎症局部肿胀和增生,有效地调控炎症反应,将其控制在适当范围内,从而既完成对致炎因子的消除,同时又降低对炎症局部组织的损伤。两种蒙药复方临床研究结果如下:葡萄球菌吞噬法研究中,两种蒙药复方均极显著提高隐性乳房炎患牛外周血中性粒细胞吞噬力(P<0.01)。流式细胞术检测显示,均极显著提高隐性乳房炎患牛外周血T细胞百分率(P<0.01)。免疫比浊法显示,均极显著提高隐性乳房炎患牛外周血IgG的表达(P<0.01)。乳成分分析法表明均极显著降低隐性乳房炎牛乳中NAGase酶、LDH酶和体细胞数(P<0.01),极显著提高乳脂、乳蛋白、乳糖和全乳固体含量(P<0.01)。表明两种蒙药复方有效地通过提高隐性乳房炎奶牛中性粒细胞吞噬力、T细胞百分率和IgG含量,提高隐性乳房炎奶牛非特异性免疫能力和特异性免疫力,从而显著降低隐性乳房炎乳中体细胞的数量,提高乳品质。临床型乳房炎疗效研究表明两种蒙药复方能有效降低患奶牛全身症状,消除乳房肿胀,改善乳品质,恢复日产量。传统蒙药复方高剂量组的有效率达到84.62%,与环丙沙星对照组相当(85.71%);正交蒙药复方高剂量组达到71.43%。体外抑菌指标研究结果显示,正交蒙药复方体外抑制两种乳房炎主要致病菌效果均显著高于传统蒙药复方,但体内抗菌效果却均显著低于后者。从而表明体外抑菌效果不能作为筛选具有抗菌消炎作用传统蒙药复方的唯一或主要指标。针对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌,结合体外抑菌试验和瘤胃体外批次培养,对瘤胃微生物对蒙药复方体外抑菌效果的影响研究显示,瘤胃微生物能够显著降低正交蒙药复方Ⅱ和Ⅲ的体外抑菌效果(P<0.05)。表明瘤胃微生物对药物一些活性成分有降解作用。因此对反刍动物口服用药时,需考虑药物与瘤胃微生物间的互作,既降低瘤胃微生物对药物活性成分的降解,又防止瘤胃微生态平衡被干扰和破坏。
朴希璥[9]2002年在《中韩人参研究的系统比较》文中提出1．目的 人参在中韩两国临床应用有着悠久的历史，在漫长的历史过程中，两国医药工作者不断地探索，不断交流，促进了对人参系统研究的发展，时至今日人参在两国的医疗、康复、预防、保健事业中都占有重要的位置，并均已形成医药行业中支柱产业，但目前尚缺乏对两国人参研究与应用的系统比较，故为中韩两国有关人参研究工作者提供完整系统的人参研究对比资料，为深入开展研究工作提供一定的文献依据，同时为开展中韩之间进行人参研究的学术交流活动作出有意义的尝试，促进交流，通过中韩两国人参系统研究比较，力求两国在人参研究与应用过程中各自的优势和不足，如何取长补短，优势互补，互相学习，互相借鉴，必将对促进两国人参研究产生积极的影响。 2．方法 中韩两国历代史料、本草及医学文献中对人参的基源、栽培、炮制、性味、功效、应用、制剂都有相近的文字记载。近20年人参研究进入了空前的发展阶段，有关人参的物种基源、栽培研究、炮制方法、制剂工艺、化学成分、现代药理学研究、毒理研究、临床应用研究及有关人参行业管理研究等大量的文献资料。检索收集近十年的中韩两国有关人参研究的文献为主、期刊杂志及历代文献资料共六千余篇，进行多方面的对比分析。 3．结果 3．1．人参药用广泛，历史悠久，由于产地、形态、色泽、生长环境、炮制加工、产地及作为贡品和贸易品的不同，中韩两国形成人参众多名称。人参经长期临床应用探索，对其功效，主治逐渐深化拓宽，中国方面累积丰富的经验，影响了周边国家。16世纪韩国始有明确的记载，人参作为贡品及商品交流，中国人参药源供应除自产的辽参外，朝鲜人参贡品及贸易商品给予极大的补充。以上中韩两国史料及本草书的记载可见自公元二世纪以来，人参已成为中韩两国主要交易商品之一，以外交贡品，或以两国贸易商品的形式，在政治、经济、文化及外交交流方面均扮演重要的角色。在中韩两国关系中可谓源远流长，上党参、辽参、高丽参延传不已，为人参的临床应用提供了药源保证。 3．2．中韩两国人参栽培技术及管理研究的比较中，对中韩两国人参栽培进行了历史的回顾，从合理使用添加剂改善人参栽培环境，如何改善人参生长发育，两国人参生产管理方法、栽培技术、病虫害防法、品种改良等，进行了多方位的比较，可以充分看到各有所长，值得互相借鉴。然人参做为特殊商品，在实施法制管理，规范市场行为，改进栽培技术，改良人参品种方面韩国有较大的优势。中国必须从全面提高人参栽培技术，改良品种方面做出努力，加强市场管理，迅速从市场无竞争力，价值扭曲的困境中走出来，早日使中国人参市场经济，尽快迈上一个新的台阶。 中文摘要5 3．3．中国学者在化学成分研究方面比较深入全面。运用各种新技术进行人参的各个部位 如根、茎、叶、花、果、种子等多种成分进行了系统分析研究如皂昔类、挥发油类、多糖类、 氨基酸和多肽类及其他成分等，并发现了许多新成分。还进行了一些构效关系的探讨。此外， 还应用遗传工程技术化学合成人参多肽基因也进行了研究。同时也结合各成忖量分析对提 取工艺，不同加工产品进行了比较研究。而韩国学者对化学成分的基础研究较少，侧重于结 躺取工艺，生物活性等方面，对人参皂替类、挥发油类、多糖类进行了成分分析及含量测 定工作． 3．4．通过中韩两国学者对人参药理学研究的比较分析，不难看出两国学者都作了大量工 作，而中国更为广泛和深入，尤其对心血管系统、中枢神经系统、内分泌系统、物质代谢系 统等方面的作用的研究工作尤为细致和深入；而韩国在免疫系统和“适应原”作用研究比较 突出。究其原因，这是与人参在中国有着广泛的临床应用基础，在医疗、保健、康复等诸多 领域发挥着重要的作用有关，因而促进了药理学研究的深入开展，以为其提供了科学依据； 而韩国由于有关法律的限制，人参多局限于保健用药，因此对于提高免疫、增加机体适应原 作用较为深入。 3．5．从临床研究资料表明，由于近代中国重视传统中医学的继承与发扬工作，注重中西 医结合，推行中西医并重的方针，饿统名贵药物人参的临床研究取得长足进步，临床资 料规范可信，涉猎病种宽泛，包括抗休克、心血管系统、代谢系统、内分泌系统、血液系 统、呼吸系统、肿瘤、消化系统、神经系统等9个方面，尤其在抗休克和。〔血管系统方面 的研究比较深入，取得的经验十分可贵，为人类科学合理使用人参，做出了有益的贡献。 韩国是高丽人参的故乡，人参的临床应用也有着丰富的经验，然而由于体制及医政法 的限制，目前广大传统汉医有关人参的临床资料多个多属个案，用药经验报导、临床资料 欠规范，与以西医为主的临床研究工作比较，翔实可靠，但投入力量较少，使用范围较窄， 仅涉猎中枢神经系统、心血管系统、肿?
参考文献：
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[3]. 基于RNA-Seq技术的雏鸵鸟胸腺应答硼刺激分子机制研究[D]. 肖珂. 华中农业大学. 2016
[4]. 天府肉鸭中枢免疫器官胚胎及胚后发育期细胞凋亡及神经肽表达的研究[D]. 方静. 四川农业大学. 2009
[5]. 热应激影响雏鸡胸腺组织发育的研究进展[J]. 梁臣, 陈忠, 谢秀祯. 家畜生态学报. 2014
[6]. 湿热环境对辐射动物损伤的影响及其机制的初步探讨[D]. 周美娟. 中国人民解放军第一军医大学. 2003
[7]. 日粮添加二氢杨梅素对肉仔鸡肠道组织形态、微生物菌群及免疫机能的影响[D]. 谢鹏. 中国农业科学院. 2004
[8]. 治疗奶牛乳房炎蒙药复方的筛选及其抗炎免疫机理的研究[D]. 战永波. 内蒙古农业大学. 2010
[9]. 中韩人参研究的系统比较[D]. 朴希璥. 北京中医药大学. 2002