李明 沧州市食品药品检验所 061001
【摘 要】目的 药物的生物利用度与药物的溶出度具有相关性，常通过药物的体外溶出度来评价不同厂家生产制剂或不同批次制剂的质量，建立一种准确、稳定的溶出度检测方法将有助于药物制剂的质量控制。方法 以本文以高效液相色谱法为基础，以四丁基氢氧化铵溶液为溶出介质，建立了体外测定头孢克肟胶囊溶出度的方法，并做了方法学验证。结果 在12μg/mL ~240μg/mL浓度范围内吸收峰面积与浓度具有良好的线性关系，稳定性和精密度实验的RSD均低于0.5%，高、中、低三种浓度的加样回收率均大于99%。结论 本文建立了高效液相色谱法测定头孢克肟胶囊体外溶出度的方法，该方法具有良好的精密度和稳定性，值得进一步应用于头孢克肟胶囊的质量控制中。
【关键词】溶出度；头孢克肟胶囊；高效液相色谱法
头孢克肟属于第三代口服头孢菌素，其杀菌力强，抗菌谱广，口服吸收效果好，组织分布良好，不良反应发生率低[1]。临床上对敏感菌引起的扁桃体炎、急慢性支管炎、中耳炎、尿路感染、淋病等均具有显著疗效。溶出度是评价固体制剂质量的标准之一，良好的体外溶出是药物体内生物利用度的重要保证。药物的溶出曲线能全面反映药物在体内的质量分布[2-4]。现今很多药厂都能生产头孢克肟胶囊，而且常以溶出度作为药物制剂工艺和质量控制的重要指标。本文建立了高效液相色谱法以测定头孢克肟胶囊的体外溶出度，为各企业提供准确性和专属性较高的溶出度测定方法。
1材料
1.1仪器 Agilent 1100高效液相色谱仪（美国安捷伦公司）；RCZ-8M溶出仪（自动取样收集系统 RZQ-8D，天大天发）；HH-2 数显恒温水浴锅，Jl-120 超声波清洗器；XS205型DuaI Range电子天平（梅特勒-托利多仪器有限公司）。
1.2试剂 头孢克肟对照品，批号：130503-200904，含量86.3%，规格100mg（中国食品药品检定所。头孢克肟胶囊为天津华津制药厂，批号：070502。所用其他试剂均为分析纯。
2方法
2.1色谱条件
色谱柱选择Waters Sunfire C18（4.6mm×250 mm，5 μm）色谱柱。将10% 四丁基氢氧化铵与蒸馏水以1：40比例混合并摇匀，再以1.5mol/L的磷酸溶液调节pH至7.0。再将以上所得四丁基氢氧化铵溶液与乙腈以72：28配置成流动相。柱温为40℃，流速为1mL/min，进样20μL。
2.2线性范围考察
准确称取头孢克肟对照品17.38mg（含10.356 mg头孢克肟），用溶出介质溶解并定容于50mL容量瓶。再精密量取以上对照品溶液1、3、5、10、15、20mL并定容于25mL容量瓶，配置成12μg/mL、36μg/mL、60μg/mL、120μg/mL、180μg/mL、240μg/mL的标准溶液。取20μL进样检测，以色谱峰面积A对浓度C做回归方程。
2.3稳定性试验
准确称取对照品头孢克肟配置成高中低三种浓度（12μg/mL，72μg/mL，240μg/mL）对照品溶液，并分别于室温放置2，4，8，16 h后测定头孢克肟浓度。根据测定结果计算RSD（相对标准偏差）来评价方法对高中低三种浓度的时间稳定性实验。
2.4精密度试验
取12μg/mL，72μg/mL，240μg/mL三种浓度对照品重复进样6次。根据测定结果计算RSD（相对标准偏差）来评价方法对高中低三种浓度的精密度实验。
2.5加样回收试验
根据头孢克肟胶囊中辅料的比例，分别加入5mg，10mg，20mg的头孢克肟对照品用溶出介质溶解并定容于100mL容量瓶，配置成三种浓度的溶液。取20μL进样检测，每种浓度进样重复进样3次，并根据外标法头孢克肟的加样回收率，并计算RSD以评价三种浓度的回收率。
2.6溶出条件
按照中国药典2005版二部附录XC第二法，选择脱气处理后的磷酸盐缓冲液为溶出介质，37℃为溶出温度，转速为100r/min。分别于0 min、5 min、10 min、15 min、30 min、45 min、60 min取样10 mL，取液后补以等体积同温度的溶出介质。取出药液经0.45μm滤膜过滤。取样和过滤操作应准确迅速。精确量取续滤液，以溶出介质为溶剂配置成10μg/mL的溶液。准确称取头孢克肟对照品，并用同样溶剂配置成10μg/mL溶液。重复进样三次测定。
3结果
3.1线性范围
根据测定结果以峰面积A为纵坐标，对照品浓度C为横坐标做标准曲线。结果表明此法在12μg/mL ~240μg/mL浓度范围内线性良好。线性方程为A=21186*C-4299（R2=1）。
表1 对照品峰面积
3.4 样品检测结果
分别于0 min、5 min、10 min、15 min、30 min、45 min、60 min取样进行检测，根据峰面积计算浓度，并计算出溶出百分比（检测量/实际量×100%）。如图2所示，经60min溶出后，累计溶出百分比达到99%。
4讨论
药品的溶出包括了药品的崩解和溶解两个过程，是评价不同药物制剂，或同一制剂不听厂家和批次的重要指标。体外溶出度与体内生物利用度存在一定的相关性。本次实验主要以高效液相色谱法测定头孢克肟胶囊的溶出度，并研究了该方法的精密度、稳定性等。实验结果表明本方法具有良好的精密度和重复性，所有RSD均低于0.5%，而且在高、中、低3种浓度水平都能具有良好的重复性和精密度。线性实验结果显示该方法在本次设定的浓度范围内具有良好的线性。加样回收实验也表明，该方法对高、中、低三种浓度具有很好的回收率。对头孢克肟胶囊的溶出实验表明，溶出60min后累计溶出百分比可达99%。另外根据溶出曲线估计50%的累计溶出百分比介于5min~10min之间。然而影响药物溶出度的因素有很多，如药物的剂型、溶出介质、温度等，如头孢克肟分散片溶出不到10min，累计溶出百分比为80%以上[2]，所以选择合适的剂型往往能得到相对好的生物利用度。
5结论
本文建立了以高效液相色谱法为基础的头孢克肟胶囊的溶出度检测方法。该方法在12μg/mL ~240μg/mL浓度范围内具有良好的线性。并验证了该方法对高、中、低浓度头孢克肟的重复性和精密度，并且结果表明重复性精密度良好。该方法对高、中、低浓度药物还具有良好的回收率。
参考文献：
[1]王玮，邵顺.高效液相色谱法测定头孢克肟颗粒的溶出度[J].医药导报，2013，32（6）：788-790
[2]方韵，田杰.头孢克肟分散片溶出度HPLC法与UV分光光度法测定 结果的比较[J].抗感染药学，2013，10（3）：200-202
[3]姚军，沈静，李新霞等.光纤原位动态倍率系数法监测头孢克肟分散片溶出度[J].医药导报，2010，27（6）：535-538
[4]严少康，刘永红，黎璐平等.头孢克肟固体分散体的制备及溶出度测定[J].武汉工程大学学报，2011，33（11）：27-40
论文作者:李明
论文发表刊物:《中国医学人文》(学术版)2016年1月第1期
论文发表时间:2016/4/19
标签：头孢论文; 浓度论文; 精密度论文; 胶囊论文; 方法论文; 溶液论文; 高效论文; 《中国医学人文》(学术版)2016年1月第1期论文;