刘光震1 颜廷斐2 李慧2
（1青岛大学附属医院放射科 山东 青岛 266003）
（2青岛大学附属医院检验科 山东 青岛 266003）
【摘要】目的：探讨人血清IL-4和IL-13水平以及EBV感染在过敏性皮炎发生中的作用，分析过敏性皮炎患者EBV感染与患者血清IL-4和IL-13水平的相互关系。方法：采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测30例过敏性皮炎患者和40例健康对照组血清IL-4和IL-13水平以及血清EB病毒早期抗原抗体EA-IgM和EA-IgA以及衣壳抗原抗体VCA-IgM,VCA-IgA和VCA-IgG含量，并进行相关性研究。结果：过敏性皮炎患者血清IL-4(9.40±3.35pg/ml),IL-13(4.62±1.00pg/ml),EA-IgM(4.38±3.39U/ml),EA-IgA(1.46±0.36U/ml)和VCA-IgM (8.49±2.71U/ml)水平明显高于正常对照组(3.88±1.73pg/ml, 2.87±1.08pg/ml,2.68±1.12U/ml,1.29±0.29U/ml和5.61±1.95U/ml;P<0.001,P<0.001,P<0.05,P<0.05和P<0.001)。过敏性皮炎患者血清VCA-IgA和VCA-IgG水平分别为5.78±3.26U/ml和109.86±74.43U/ml，对照组血清VCA-IgA和VCA-IgG水平分别为8.01±19.30U/ml和121.48±122.11U/ml，统计学分析表明两组间无显著性差异(P均>0.05)。患者血清IL-4和IL-13水平与EBV抗体EA-IgM,EA-IgA,VCA-IgM,VCA-IgA以及VCA-IgG水平无明显相关性(P均>0.05)。结论：过敏性皮炎的发生发展可能与血清IL-4和IL-13水平升高有关；过敏性皮炎患者存在EBV的活动性感染；EBV感染可能不是导致过敏性皮炎患者血清IL-4和IL-13水平升高的影响因素。
【关键词】过敏性皮炎；白细胞介素4；白细胞介素13；EB病毒；抗体
【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2015）12-0111-03
Detection and Significance of IL-4 and IL-13 and EBV Antibody in Patient with Atopic Dermatitis
Liu Guangzhen, Yan Tingfei, Li Hui Affiliated Hospital of Qingdao University, Liaoning Province, Qingdao 266003, China
【Abstract】Objective To investigate the association of IL-4 and IL-13 level in serum and EBV infection in the development of atopic dermatitis. To analysis the correlations between EBV infection and IL-4 and IL-13 level in serum in patients with atopic dermatitis.Methods The serum levels of IL-4 and IL-13 and the serum contents of antibodies against EBV early antigen EA-IgM and EA-IgA and viral capsid antigen VCA-IgM,VCA-IgA and VCA-IgG of 30 atopic dermatitis patients and 40 healthy controls were detected using ELISA. Results The serum levels of IL-4, IL-13, EA-IgM, EA-IgA and VCA-IgM in the atopic dermatitis group were significantly higher than that in the control group(P<0.001,P<0.001,P<0.05,P<0.05 and P<0.001). The EBV VCA-IgA and VCA-IgG levels of the atopic dermatitis group and control group in serum were 5.78±3.26U/ml and 109.83±74.43U/ml, 8.01±19.30U/ml and 121.48±122.11U/ml respectively, there was not significantly difference between two groups.There was no association between IL-4, IL-13 and EBV EA-IgM, EA-IgA,VCA-IgM,VCA-IgA and VCA-IgG in patients with atopic dermatitis (P>0.05). Conclusion The occurrence and development of atopic dermatitis was probably concerned with the increased expression of IL-4 and IL-13 in serum. The EBV active infection was exist in atopic dermatitis patients.The EBV infection may not be influencing factor what result in the increased expression of IL-4 and IL-13 in serum in atopic dermatitis patients.
【Key words】Atopic Dermatitis; IL-4; IL-13; EBV; Antibody
过敏性皮炎是一种慢性、炎症性、瘙痒性皮肤病，其发病机制尚未完全阐明，受环境、遗传等多重因素的影响，最近有研究者认为细胞因子在皮炎的发病过程中起着重要的作用，如白细胞介素类、趋化性细胞因子、干扰素、集落刺激因子以及肿瘤坏死因子等几大类约30余种细胞因子在介导过敏反应的细胞免疫、体液免疫和过敏反应的调节中发挥着不同作用。研究表明，病毒感染如单纯疱疹病毒、水痘带状疱疹病毒、EB病毒等感染与过敏性皮炎发病密切相关[1-4]。为此，本文采用ELISA方法对30例过敏性皮炎患者和40例健康对照组血清IL-4和IL-13水平以及血清EB病毒早期抗原抗体EA-IgM和EA-IgA以及衣壳抗原抗体VCA-IgM， VCA-IgA和VCA-IgG含量进行检测，探讨EBV感染和两种细胞因子水平变化在过敏性皮炎发病进展中的作用，同时分析EBV相应抗体与两种细胞因子水平变化的相互关系，为阐明过敏性皮炎可能存在的免疫学机制和病毒病因学研究提供实验依据。
1.资料和方法
1.1 研究对象
过敏性皮炎组30例（男14例，女16例），平均年龄40±17岁，入组者均符合1980年美国Hanifin and Rajka诊断标准。对照组40例（男19例，女21例），平均年龄39±15岁，均为健康查体者，排除个人过敏史和过敏反应家族史。两组在性别和年龄比例上均无显著性差异。
1.2 方法
1.2.1标本采集：清晨抽取过敏性皮炎组和对照组外周静脉血5ml，待血液凝固后，置BY-G16型医用离心机3000r/min离心10min，吸取血清于EP管中，置于-80℃冻存备用。
1.2.2采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清IL-4和IL-13含量以及血清EBV相关抗体EA-IgM和EA-IgA以及VCA-IgM， VCA-IgA和VCA-IgG水平。IL-4和IL-13试剂盒由上海西唐生物科技有限公司提供，EA-IgM， EA-IgA以及VCA-IgM， VCA-IgA和VCA-IgG试剂盒由德国IBL公司提供。
1.2.3统计学处理：数据资料均以x-±s表示， 用t检验分析比较过敏性皮炎组和正常对照组IL-4，IL-13以及EBV抗体 EA-IgM， EA-IgA，VCA-IgM，VCA-IgA，VCA-IgG含量差异。用Pearson 相关系数r分析过敏性皮炎患者IL-4，IL-13与EBV相应抗体的相关性。
2.结果
2.1 过敏性皮炎组和健康对照组血清IL-4、IL-13水平的比较
过敏性皮炎组和健康对照组血清IL-4水平分别为9.40±3.35pg/ml和3.88±1.73pg/ml、IL-13水平分别为4.62±1.00pg/ml和2.87±1.08 pg/ml，统计学分析表明，过敏性皮炎组血清IL-4、IL-13水平均明显高于健康对照组，两组间有显著性差异(P均<0.001)，结果见表1。
表1 过敏性皮炎组和健康对照组血清IL-4、IL-13水平比较（x-±s）
2.2过敏性皮炎组和健康对照组血清EBV抗体水平的比较
过敏性皮炎组外周血EA-IgM水平(4.38±3.39U/ml)明显高于健康对照组(2.68±1.12U/ml)，两组比较有显著性差异(t=2.64，P<0.05)。过敏性皮炎组外周血EA-IgA水平(1.46±0.36U/ml)高于健康对照组(1.29±0.29 U/ml)，两组比较有显著性差异(t=2.11，P<0.05)。过敏性皮炎组血清VCA-IgM水平(8.49±2.71U/ml)明显高于健康对照组(5.61±1.95U/ml)，两组比较有显著性差异(t=4.95，P<0.001)。过敏性皮炎组和对照组血清VCA-IgA水平分别为5.78±3.26U/ml和8.01±19.3 U/ml，统计学分析表明，两组间无显著性差异(t=-0.72，P>0.05)。过敏性皮炎组和对照组血清VCA-IgG水平分别为109.86±74.43U/ml和121.48±122.11U/ml，统计学分析表明，两组间无显著性差异(t=-0.49，P>0.05)。结果见表2。
表2 过敏性皮炎患者血清EBV抗体水平比较（x-±s）
*皮炎组与对照组相比EA-IgM:t=2.64， P<0.05; EA-IgA: t=2.11， P<0.05; VCA-IgM: t=4.95， P<0.001
2.3 过敏性皮炎患者IL-4与EBV抗体之间的相关关系
对30例过敏性皮炎患者外周血IL-4与EBV抗体EA-IgM， EA-IgA， VCA-IgM， VCA-IgA以及VCA-IgG进行相关性分析，结果表明患者外周血IL-4水平与EBV上述抗体之间均无明显相关关系(r分别为0.098，0.127，0.228，0.360，0.216， P均>0.05)。
2.4 过敏性皮炎患者IL-13与EBV抗体之间的相关关系
对30例过敏性皮炎患者外周血IL-13与EBV抗体EA-IgM， EA-IgA， VCA-IgM， VCA-IgA以及VCA-IgG进行相关性分析，结果表明患者外周血IL-13水平与EBV上述抗体之间均无明显相关关系(r分别为-0.099，0.161，-0.080，0.251，-0.171， P均>0.05)。
3.讨论
过敏性皮炎是与血清IgE水平升高、细胞介导的免疫缺陷等有关的一种慢性、过敏性皮肤病[5]。过敏性皮炎有多种病因，诸多研究表明，免疫异常是其发病的关键环节，Thl/Th2分化失衡引起细胞因子分泌异常在疾病的发生发展中起重要作用[6]。IL-4和IL-13是由激活的辅助性T淋巴细胞中的Th2亚群所分泌的，具有促进B细胞增殖分化，促进B细胞合成和分泌IgE的功能。本实验结果显示，过敏性皮炎患者血清IL-4和IL-13水平明显高于对照组，与文献报导结果基本一致[7-9]。血清IL-4和IL-13水平升高可抑制Th1细胞的分化，促进Th2细胞活化，导致Th2类细胞分泌细胞因子增加，进而使过敏体质者血清外周血IgE水平升高，最终引起过敏性皮炎的发生。因此，血清IL-4和IL-13水平升高可能参与过敏性皮炎的发生机制。
Rystedt等[4]研究发现过敏性皮炎患者外周血EBV抗体水平远高于健康对照组，且不论检测时过敏性皮炎是处于发作期还是痊愈期；还证实EBV抗体水平与外周血IgE高低无关，过敏性皮炎患者的EBV抗体水平升高可能表明了其基本的免疫调节紊乱，从而推测过敏性皮炎的发病可能与EBV感染有一定关系。Strannegard等[10]通过研究1000例过敏性皮炎患者发现，过敏性皮炎患者存在EBV抗体水平升高，从而推测，因免疫功能失调致其易感性增加。本研究结果显示，过敏性皮炎患者外周血EA-IgM，EA-IgA和VCA-IgM水平明显高于健康对照组，差异有显著性，说明EBV的激活感染在过敏性皮炎患者是存在的；而过敏性皮炎患者血清VCA-IgA和VCA-IgG水平与对照组比较无明显差异，说明患者曾经感染过EBV，与诸多学者研究结果相符。EBV是嗜B淋巴细胞病毒，EBV感染可持续慢性刺激机体免疫系统，导致B细胞处于持续高度活跃状态，从而诱发过敏性皮炎发病。因此推测过敏性皮炎患者的EBV激活感染是导致其免疫功能异常的重要原因，过敏性皮炎患者的突然发病可能与潜伏的EBV激活有关。
免疫异常是过敏性皮炎发病的关键环节，Thl/Th2分化失衡引起细胞因子分泌异常在过敏性皮炎的发生发展中起重要作用。IL-4和IL-13是活化Th2细胞所分泌的B细胞生长因子，IL-4和IL-13具有促进B淋巴细胞活化增殖，诱导IgE合成的作用，对过敏性皮炎的发作起诱导作用。研究证实EBV感染的B淋巴细胞可表达一系列EBV特异性抗原分子，使这些抗原分子具有高度免疫原性，诱导机体发生免疫反应，刺激CD4+T淋巴细胞产生Th1型的细胞因子，从而在过敏性皮炎发生中发挥它的作用，而IL-4和IL-13主要由Th2型细胞产生，由此推测过敏性皮炎患者IL-4和IL-13水平升高不是EBV感染引起的。本实验通过对过敏性皮炎患者IL-4和IL-13水平与EBV相应抗体的相关关系分析，发现IL-4和IL-13与EBV相应抗体无明显相关关系，这符合上述理论，提示过敏性皮炎患者IL-4和IL-13水平升高不是由EBV的激活感染引起的。
综上所述，过敏性皮炎患者的疾病发作与外周血IL-4和IL-13水平升高有关，过敏性皮炎患者存在EBV的激活感染，过敏性皮炎患者EBV的激活感染不是导致血清IL-4和IL-13水平升高的原因。
【参考文献】
[1] Samoylikov P， Gervazieva V， Kozhevnikov S. Association between autoimmune reactions and severity of atopic dermatitis in children with herpes virus infection. World Allergy Organ J. 2013 Apr 29;6(1):8.
[2] Silverberg JI，Norowitz KB，Kleiman E， Silverberg NB， Durkin HG，Joks R，Smith-Norowitz TA.Association between varicella zoster virus infection and atopic dermatitis in early and late childhood:a case-control study.J Allergy Clin Immunol. 2010 Aug;126(2):300-5.
[3] Ohnishi E，Iwata T，Inouye S， Kurata T， Sairenji T. Interleukin-4 production in Epstein-Barr virus-transformed B cell lines from peripheral mononuclear cells of patients with atopic dermatitis.J Interferon Cytokine Res.1997 Oct;17(10):597-602.
[4] Rystedt I，Strannegard IL，Strannegard O.Increased serum levels of antibodies to Epstein-Barr virus in adults with history of atopic dermatitis.Int Arch Allergy Appl Immunol.1984;75(2):179-83.
[5] Cooper K. Atopic dermatitis:recent trends in pathogenesis and therapy.J Invest Dermatol，1993，101:155-163.
[6] Meagher IJ，Wines NY，Cooper AJ.Atopic dermatitis: review of immunopathogenesis and advances in immunosuppressive therpy. Austmlas J Dematol， 2002， 43:247-254.
[7] 罗静英，黎小东，李振洁，李嘉彦，朱慧兰，刘玉梅.特异性免疫治疗对特应性皮炎患者血清IL-4、IFN-γ的影响.岭南皮肤性病科杂志，2009，16:372-374.
[8] Novak N，Kruse S，Kraft S，Geiger E，Kluken H，Fimmers R，Deichmann KA， Bieber T.Dichotomic nature of atopic dermatitis reflected by combined analysis of monocyte immunophenotyping and single nucleotide polymorphisms of the interleukin-4/interleukin-13 receptor gene: the dichotomy of extrinsic and intrinsic atopic dermatitis.J Invest Dermatol，2002，119:870-875.
[9] 陶小华，关杨，洪福昌，莫衍石，陈美才.异位性皮炎患者血清白细胞介素-13与干扰素-γ水平变化及意义.检验医学与临床， 2010，10:2063-2065.
[10] Strannegard O，Strannegard IL，Rystedt I.Viral infections in atopic dermatitis.Acta Derm Venereol Suppl(Stockh). 1985， 114:121-4.
通讯作者：颜廷斐，女，主管检验师
论文作者:刘光震1,颜廷斐2,李慧2
论文发表刊物:《医药前沿》2015年第12期供稿
论文发表时间:2015/7/27
标签：性皮炎论文; 血清论文; 水平论文; 患者论文; 抗体论文; 对照组论文; 细胞因子论文; 《医药前沿》2015年第12期供稿论文;