（湖南省邵阳学院附属第一医院 湖南邵阳 422001）
摘要：目的 分析和探讨乳腺癌患者体内GATA3的表达水平与病理意义。方法 选取我院普外科于2009年1月~2013年1月份期间接收的乳腺癌患者60例，对其癌组织进行标本采集，运用免疫组化法检测组织中GATA3的表达情况。结果 GATA3的低表达与肿瘤分期、脉管癌栓、ER（雌激素受体）和PR（孕激素受体）表达状态等指标相关（P＜0.05）。GATA阳性表达者在五年内的生存率（77.8%）显著高于阴性表达者（31.4%），有统计学差异（P＜0.05）。结论 GATA3的表达水平与肿瘤的生物学特性存在相关性，对乳腺癌的临床治疗及预后研究有一定的指导意义。
关键词：GATA3；表达水平；乳腺癌
Expression and pathological significance of GATA3 in breast cancer
[Abstract]Objective to analyze and explore the expression level and pathological significance of GATA3 in patients with breast cancer. Methods a total of 60 breast cancer patients who were admitted to our department of general surgery during January 2009 ~2013 January. Specimens collected from their breast cancer tissues were collected，and the expression of GATA3 in tissues was detected by immunohistochemistry. Results the low expression of GATA3 was related to tumor staging，vascular tumor thrombus，ER（estrogen receptor）and PR（progesterone receptor）expression status（P < 0.05）. The survival rate of GATA positive expression in five years（77.8%）was significantly higher than that of negative expression（31.4%），with a statistically significant difference（P < 0.05）. Conclusion there is a correlation between the expression level of GATA3 and the biological characteristics of tumor，which is of certain guiding significance for the study of the clinical treatment and prognosis of breast cancer.
[Keywords] GATA3；expression level；breast cancer
乳腺癌是起源于乳腺各级导管上皮及腺泡上皮的一种恶性肿瘤，是危害女性健康的常见疾病之一。近年来有部分学者的研究表明，GATA3与乳腺癌的产生与发展有密切联系，并在乳腺癌的不同亚型中扮演不同的角色[1]。为此，本研究对乳腺癌患者体内GATA3的表达水平进行了深入研究，回顾性地分析其临床病理特点，旨在探讨GATA3与乳腺癌发生、发展的关系及其病理学意义，为乳腺癌的诊断、治疗及预后提供重要的理论参考依据，以下是详细报告。
1资料和方法
1.1一般资料 选取我院普外科在2009年1月~2013年1月份期间接收的乳腺癌患者60例。经过医生问诊、细胞学检查、超声检查、X线、CT检测等手段进行病情确诊，参照国际抗癌联盟/美国癌症联合委员会（UICC/AJCC）制定的《乳腺癌TNM分期标准》对患者进行临床分期[3]，I期患者19例，II期患者33例，III期患者8例。后经外科合理设计并实施手术进行癌组织切除治疗。所有患者均为女性，年龄在29~78岁，平均（60.3±2.0）岁，患病1~4个月，平均（2.1±0.2）月。纳入标准：所有病例均系原发，且术前未接受过放射治疗和化学治疗，所有标本均经病理HE染色及医师确诊，临床及病理资料均完整。排除具有严重心、肝、脑、肾及血液性疾病的患者，有家族遗传及处于妊娠期的患者。
1.2方法 经医院伦理委员会应允后，成立专人小组，合理设计研究方案，由专家小组商讨后确定，对该组病例实施相应的指标检测。
1.2.1实验材料与试剂
GATA3兔抗人多克隆抗体（上海钰博生物科技有限公司），GTVisionTM 免疫组化试剂盒（上海恒远生物科技有限公司），浓缩型DAB 试剂盒（上海恒远生物科技有限公司）。
1.2.2免疫组化染色
用10%的中性缓冲福尔马林固定液固定全部标本，然后用酒精梯度脱水、石腊包埋，连续切片5-6张，厚度约4 μm，贴附于载玻片上进行免疫组织化学染色。
采用免疫组化二步法检测组织中GATA3的表达，参照说明书进行前处理。主要流程如下：切片用二甲苯常规脱蜡，过梯度酒精至蒸馏水，用PBS磷酸盐缓冲液（0.01M）进行冲洗，3次×3分钟。然后将切片放入湿盒中，加入3% 过氧化氢去离子水后于37℃温箱中孵育10分钟，以消除内源性过氧化物酶活性；将切片浸入0.05mol/L EDTA的缓冲液，于98 ℃微波中加热10 min，重复2次，自然冷却，进行热诱导抗原修复。滴加稀释后100倍的一抗兔抗GATA3多克隆抗体，放置于冰箱4℃环境中孵育过夜；第二天取出湿盒，室温下复温30分钟，滴加酶标记的二抗试剂一滴，放于室温湿盒中孵育60分钟；同一时间内配置DAB显色液；于组织标本上滴加新配置的DAB显色液50 μl，显微镜下观察反应结果；用苏木素衬染10-15秒后，酒精梯度脱水，二甲苯透明，以中性树胶封片。同时以PBS代替一抗作为阴性对照，以已知阳性片作阳性对照，以确保实验准确度。
1.2.3患者随访
以电话、信件及门诊随访等方式进行随访，了解患者五年内的生存状况，随访结果包括存活和死亡人数。
1.3观察指标 分析患者乳腺癌组织中GATA3的表达情况，并与临床病理参数进行比较分析，探索相关性。
1.4判断标准 免疫组化显色的判断标准：细胞核内出现棕褐色颗粒为阳性表达细胞[2]。用400倍光学显微镜，随机选取 5 个不同的视野分别观察，按阳性细胞数占同类细胞的百分比进行分类，阳性细胞数≥20%的为GATA3表达阳性切片，以此来判断表达结果。PR与ER阳性表达为细胞核中出现棕黄色染色，细胞数≥10% 即为PR或ER表达阳性；HER-2 阳性的判断标准是HER-2 免疫组化检测+ + +（≥30%肿瘤细胞胞膜完整染色）。
1.5统计学方法 使用SPSS 13.0统计软件进行分析。各组间的比较用χ2检验或Fisher确切概率法，单因素分析采用对数秩检验（Log-rank tes），以P＜0.05为差别，有统计学意义。
2结果
2.1 GATA3的表达与临床病理参数间的关系。经检测，60例病例中，GATA3阳性表达者共25例，阳性率为41.6%；ER阳性组中GATA3 的表达率为87.5%，而ER 阴性组中GATA3 的表达率为50.0%，差异显著（P＜0.05），在PR阳性组中GATA3的表达率为87.2%，在PR阴性组GATA3 的表达率为52.3%，有统计学差异（P＜0.05），显示出GATA3 与ER、PR呈显著正相关。此外，GATA3的表达水平与肿瘤分期、脉管癌栓显著相关（P＜0.05），与HER-2表达与及其他临床病理参数无显著相关性（P＞0.05）。详如下表1所示。
注：GATA3阳性表达者的存活率显著高于阴性表达者，P＜0.05。
3讨论
乳腺癌在女性群体中的发病率占全身各种恶性肿瘤的7-10%，是仅次于宫颈癌的第二大杀手。目前，对于乳腺癌的发病机制尚未明确，但通常认为该类疾病的发生与年龄、生活作息、家族乳腺疾病史、怀孕年龄、月经初潮、服用雌激素及长期酗酒等有关，同时存在着一定的遗传倾向[3]。临床上以50岁～55岁的女性患者较多，具有较高的复发率和致死率。
GATA3是一种锌指结构转录因子，位于染色体10p15上。它对（A/T）GATA（A/G）共同序列具有高度亲和力，结合紧密，含有一个类固醇激素受体超家族C4锌指结构的DNA结合基序。研究表明，GATA3在许多组织中起着激发细胞成长、分化与增殖的作用，是调节人体正常乳腺组织生长和分化的一类重要的调节因子。近几年的研究证实了GATA3在多种恶性肿瘤中均有不同水平的表达，且表达水平与肿瘤的发生与发展密切相关，是目前国内外学者的研究热点。王成阳[4]等人的研究证明了GATA3在呼吸道上皮癌的表达与肿瘤的浸润性和临床分期呈正相关性；谢轶群[5]等人的研究表明GATA3转录因子在乳腺的生长与分化中起调节作用，在不同的乳腺癌亚型中具有不同的作用意义。临床上，GATA3的表达情况被认为是乳腺癌恶化的一个判断指标，但具体的研究成果尚存争议。但有一点确定的是，GATA3的低表达与乳腺癌疾病的发生与发展存在一定的相关性。基于以上理论知识，我院对乳腺癌患者体内GATA3的表达水平进行了详细研究。
本研究共收集了60例乳腺癌患者进行了临床试验，结果发现，GATA3在乳腺癌组织中的表达情况与ER和PR 的表达状态、肿瘤分期及脉管癌栓等表示预后较差的指标高度相关，P＜0.05，且GATA3的高表达与患者存活率有一定的正相关性。
综上所述，对于乳腺癌患者，通过对GATA3表达水平的检测有助于实现对乳腺癌疾病发生、发展及预后的判断与分析，但其是否可以成为乳腺癌的独立预测因子，仍需要进一步的临床研究来证实。
参考文献
[1]刘丽媛. 女性乳腺癌危险因素及风险评估模型的流行病学研究[D].山东大学，2015.
[2]冯锦兰，郑敏.乳腺癌钼靶X线摄影征象及与乳腺良性病变的鉴别诊断[J].中国CT和MRI杂志，2015，13（01）：5-7.
[3]冯锦兰，郑敏.乳腺癌钼靶X线摄影征象及与乳腺良性病变的鉴别诊断[J].中国CT和MRI杂志，2015，13（01）：5-7.
[4]王成阳，刘向国，彭青和.慢性阻塞性肺疾病的炎症反应与Foxp3、T-bet、GATA3表达失衡有关[J].细胞与分子免疫学杂志，2014，30（07）：704-707+712.
[5]谢轶群，施俊义，李曦洲，隋金珂.GATA3与乳腺癌发生发展关系的研究进展[J].第二军医大学学报，2010，31（07）：787-789.
论文作者:李娇艳
论文发表刊物:《航空军医》2018年4期
论文发表时间:2018/5/3
标签：乳腺癌论文; 阳性论文; 患者论文; 病理论文; 组织论文; 免疫论文; 相关性论文; 《航空军医》2018年4期论文;