【摘要】目的：制备避蚊胺乳膏，并初步建立有效成分的含量测定方法。方法：拟定三种不同处方，以基质的稳定性及外观性状为考察指标，采用综合评分法对基质处方进行筛选。制备避蚊胺乳膏，采用高效液相色谱法，以WatersSymmetryShieldRP18（5μm，3.9×150mm）为分析柱，甲醇-水（80：20）为流动相，柱温20℃，流速1.0ml/min，在240nm波长处，测定乳膏剂中避蚊胺的含量。结果：制备的乳膏外观性状良好，药物含量为6.53%，避蚊胺浓度在1.0～5.0mg/ml范围内与峰面积有良好的线性关系。结论：该乳膏剂处方合理，制备工艺简便，测定方法快捷、准确、可靠，有利于质量研究。
【关键词】避蚊胺乳膏剂；高效液相色谱
【中图分类号】R94 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2016）17-0231-02
前言
乳膏剂是采用乳剂型基质制成的软膏剂[1-2]。将DEET制成乳膏剂，具有不易燃，携带、使用方便和涂后无油腻感、便于清洗等特点[3]。过去，DEET及其制剂的分析以气相色谱法为主。有关驱避剂气相色谱分析国内已有报道。最近几年，DEET及其制剂的分析主要以高效液相色谱法为主。本文采用高效液相色谱法测定避蚊胺乳膏中DEET的含量，取得满意的结果。
1.实验材料
1.1 仪器
DF-101S集热式恒温加热磁力、电子天平、电热鼓风干燥箱KQ-200DB型数控超声波清洗器、岛津UV-1240型紫外分光光度计、Waters996型光电二极管阵列检测器、Waters501泵WatersMA01757真空脱气机、TCM柱温箱Millenium32色谱工作站、微孔滤膜（孔径为0.22um）Mllipore纯水仪
1.2 药品与试剂
N，N-Diethyl-m-toluamide(deet),白凡士林，十八醇，硬脂酸，单硬脂酸甘油酯，十二烷基硫酸钠，液体石蜡，丙三醇，对羟基苯甲酸乙酯，甲醇，纯化水
2.实验方法与结果
2.1 避蚊胺乳膏基质的处方筛选
2.1.1乳膏基质处方组成见 乳膏基质处方组成见为白凡士林、十八醇、单硬脂酸甘油脂、液体石蜡、硬脂酸、丙三醇、十二烷基硫酸钠、对羟基苯甲酸乙酯、水。
2.1.2将各组乳膏基分别经3000r/min离心10min后考察其外观性状。
2.1.3将各组乳膏基质室温放置7天后观察其外观性状。以膏体稠度、色泽、亮度、细腻性、涂展性、稳定性等为指标，采用综合评分法评价各基质处方，结果外观性状稠度适中，洁白光亮，涂展性好，离心无明显变化，放置7天后无明显变化，评分10，外观性状膏体较稀，质白，易涂展，离心分层，有粗颗粒，放置7天后分层，有粗颗粒，评分5，外观性状膏体稠厚，质白光亮，涂展性欠佳，离心无明显变化，放置7天后有粗颗粒，评分6。实验结果表明，1号处方所得的膏体外观性状较好，性质稳定，为最佳处方。
2.2 避蚊胺乳膏剂的制备
2.2.1处方：避蚊胺1.0g，白凡士林1.2g，十八醇0.9g，单硬脂酸甘油酯0.45g，液体石蜡0.9g，硬脂酸0.6g，丙三醇0.15g，对羟基苯甲酸乙酯0.015g，十二烷基硫酸钠0.15g，加水至15g，制成1支。
2.2.2制备方法 （1）称取处方量十二烷基硫酸钠、对羟基苯甲酸乙酯、丙三醇及水，置于烧杯中，加热至70℃左右溶解，得水相混合物。（2）称取处方量白凡士林、十八醇、单硬脂酸甘油酯、硬脂酸、液体石蜡，置于蒸发皿中，加热熔融，搅拌使混合均匀并控制在70℃左右，加入避蚊胺搅拌溶解，得油相混合物。（3）搅拌下，将水相混合物缓缓倒入油相混合物中，保温搅拌10分钟，使充分乳化，搅拌下冷至室温，即得。
2.3 乳膏质量标准的研究
2.3.1性状 该乳膏为半固体制剂，洁白光亮，均匀细腻，涂展性良好。
2.3.2鉴别 称取避蚊胺乳膏约0.5g，置于50ml烧杯中加入约5ml甲醇超声提取约5分钟左右，过滤，用少量甲醇洗涤，将滤液转移入10ml量瓶，用甲醇稀释至刻度，摇匀，200～400nm紫外扫描，于235.5nm处有最大吸收峰。
2.4 避蚊胺乳膏含量测定
2.4.1色谱条件 色谱柱采用Waters Symmetry Shield RP18（5μm，3.9×150mm），以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：甲醇-水（80:20）；检测波长：235nm；流速：1.0mL?min-1；柱温：20.0℃；进样量20uL。
2.4.2溶液制备
2.4.2.1对照品储备液的制备 精密称取DEET对照品0.500g,置100ml量瓶中,加甲醇定容配成5mg/ml的对照品溶液，摇匀，作为对照品储备液。
2.4.2.2供试品溶液的制备 准确称取避蚊胺乳膏0.500g，置于50ml烧杯中加入约5ml甲醇超声提取约5分钟左右,过滤,用少量甲醇洗涤，将滤液转移入10ml量瓶,用甲醇定容,摇匀,作供试品溶液。
2.4.2.3空白溶液的制备 取空白基质约0.500g,同2.4.2.2项下制备得空白溶液。
2.4.3专属性考察 取DEET对照品、供试品和阴性对照品溶液各20ul注入高效液相色谱仪，按2.4.1项下条件测定，记录色谱图（a、b、c）。DEET峰处无杂质峰干扰，说明实验条件专属性良好。
2.4.4稳定性试验
2.4.4.1耐热寒试验 取5g避蚊胺乳膏置具塞试管中密闭，于50℃恒温水浴6h，无油水分层现象。取5g避蚊胺乳膏置具塞试管中密闭,于-15℃的冰箱中放置24h，无油水分层现象。
2.4.4.2离心试验 取避蚊胺乳膏置于刻度离心管中，以3000r/min离心15min，无分层现象。
2.4.5加样回收率试验 精密称取空白基质5份各0.5g，按处方比例要求分别加入DEET对照品，使之混合均匀。按供试品溶液制备项下操作，制备回收率测定溶液，测定DEET的峰面积，结果平均回收率98.62%，RSD1.83%。加入量0.0381g，测得量0.0373g，回收率97.9%。加入量0.0362g，测得量0.0366g，回收率101.2%。加入量0.0353g，测得量0.0346g，回收率97.9%。加入量0.0348g，测得量0.0347g，回收率99.6%。加入量0.0359g，测得量0.0347g，回收率96.5%。
3.结论
本文建立了测定避蚊胺乳膏剂中避蚊胺含量的高效液相色谱法。该方法专属性强，分离度好，测定方法快捷、准确、可靠，在1.0～5.0mg/ml范围内进样浓度与峰面积的线性关系良好，回归的相关系数r=0.9995。
4.讨论
4.1 色谱条件优化
4.1.1流动相得选择 在流动相选择方面，曾用过甲醇-冰醋酸（100:1），分离情况与单用甲醇无明显变化。用甲醇-水（100:10）为流动相，图形有所改善，但分离效果不理想，提示流动相中水的量加大可以改善分离效果。流动相为甲醇-水（80:20）时，溶剂和DEET能够达到完全分离，无杂质峰干扰，保留时间适宜，峰型较好。最终确定流动相为甲醇-水（80:20）。
4.1.2提取液的选择 分别对甲醇-水（9:1）、甲醇-水（8:2）、乙醚、甲醇、乙酸乙酯、异丙醇等多种提取液进行考察，结果发现DEET在甲醇中有较好的溶解度，提取效果较好，所以选取甲醇为提取液。
【参考文献】
[1]董桂蕃,李承毅.国外趋避剂研究动向[J].中华卫生杀虫药械，2001,7（4）:5-7.
[2]毕富春,王文丽.驱蚊胺气相色谱分析[J].农药，1988,27(6):25-29.
[3]盛国荣.乳膏剂质乳化方法的实验比较[J].厂矿医药卫生，1998,14（1）:58-59.
论文作者:孙小萍
论文发表刊物:《心理医生》2016年17期
论文发表时间:2016/10/17
标签：甲醇论文; 基质论文; 处方论文; 膏剂论文; 回收率论文; 性状论文; 色谱论文; 《心理医生》2016年17期论文;