红河州弥勒市第一医院 652399
【摘要】目的：探讨标本稀释对乙型肝炎病毒核心抗体（HBcAb）检测结果的影响。方法：选择本院2014年2月-2017年3月间传染科采集的220份血清标本作为此次研究调查对象，采集血液标本后按照操作说明稀释1:50，1：100，1：500，1:1000倍进行检测，比较检测结果。结果：经1:50标本稀释，仅检出HBcAb阳性12例。通过将标本按照1：100，1：500，1:1000稀释后再次检测，结果显示HBcAb阳性检出率逐渐增加，当稀释比例达到1:1000时，HBcAb阳性检出率为70.0%。结论：高滴度乙肝病毒核心抗体检测在较低稀释倍数下可能会出现假阴性结果，临床为确保检验结果的准确性，可选择1:1000稀释倍数，以提高检测的准确率。
【关键词】乙型肝炎；核心抗体；标本稀释；影响
乙型肝炎病毒（HBV）是导致乙型肝炎发生的病原体，乙型肝炎传染性较强，有调查发现全球越有40%以上的人口被感染过HBV[1]。我国乙肝发病率较高，统计显示HBV感染人群已经高达60.5%以上[2]。根据临床研究证实，抗乙肝病毒核心抗体（抗HBC）在感染乙肝病毒后可很快在人血清中出现并且长期存在，甚至终生不消失。临床对乙型肝炎的诊断多采用酶联免疫吸附试验法（ELISA）进行乙型肝炎病毒核心抗体检测，并且高滴度抗HBC常规稀释血清后检测可能出现假阴性的结果，在将这些血清进一步稀释后再次检测可获得阳性结果。此次研究将选择本院2014年2月-2017年3月间传染科采集的220份血清标本作为此次研究调查对象，探讨标本稀释对乙型肝炎病毒核心抗体检测结果的影响，现分析如下。
1资料与方法
1.1临床资料
选择本院2014年2月-2017年3月间传染科采集的220份血清标本作为此次研究调查对象，其中92份血清标本提供者为男性，88例为女性。年龄：27-63岁，平均为（40.1±4.9）岁。所有患者经HBsAg、HBeAg或者抗HBe检测显示为阳性。所有患者均无其他重要脏器或系统严重疾病，均知晓此次调查研究目的及实施方法，并自愿参与调查研究。所有血清标本均无溶血无乳糜。此次研究经医院医学伦理委员会知情批准。
1.2方法
采用乙肝两对半检测试剂盒、ELISA酶联免疫反应试剂盒、575自动微孔洗板机、BIORADiMark酶标仪等进行此次研究检验，依据试剂盒使用说明书进行1:50稀释后血清标本的HBcAb检测，检测方法为酶联免疫吸附法。每板均设置阴阳性对照，在显色后使用酶标仪判断结果。若稀释血清后测抗HBcAb为阴性，则将血清样本稀释为1：100，1：500，1:1000再次检测。
所有试剂均在有效期内，检验过程均严格依照相关标准进行，所有检验结果均依据试剂说明书进行判定。
2结果
不同稀释血清检验结果的比较：经1:50标本稀释，仅检出HBcAb阳性12例。通过将标本按照1：100，1：500，1:1000稀释后再次检测，结果显示HBcAb阳性检出率逐渐增加，当稀释比例达到1:1000时，HBcAb阳性检出率为70.0%，显著高于其他稀释比例下的检出结果，差异有统计学意义（P＜0.05），具体统计结果见表1。
3讨论
乙型肝炎是一种由乙型肝炎病毒所引发的疾病，该病症流行广泛，对患者的身体健康造成极大影响，为提高该病症的治疗效果及时诊断并实施针对性治疗十分重要。血液中的HBcAb是乙肝表面抗原（HBeAg）的抗体，因乙肝表面抗原主要在病毒颗粒核心，极少有游离的乙肝表面抗原，因此血液一般不会检验到。乙肝表面抗原具有较强的免疫原性，因此感染乙型肝炎病毒的病患一般均可检测出乙肝病毒核心抗体，故临床多采用酶联免疫吸附试验法进行HBcAb的检验，并以此诊断HBeAg阴性轻型或亚临床型的乙肝病患，同时该种检验方法也可用于献血者的筛查[2]。
乙肝病毒核心抗体是乙肝病毒感染的一项重要检测指标，临床最早出现的抗体，早期多以IgM为主，急性感染恢复期以及慢性持续感染则以IgG为主。高浓度HBcAb多见急慢性肝炎患者以及乙肝病毒携带者，血液具有传染性。而低浓度HBcAb则表示患者可能处于感染早期或以前曾经感染过HBV，不排除传染性[3]。临床部分患者会出现单项HBcAb检验结果为阳性，如既往感染者、感染早期者、低水平携带者、核心窗口期等等[4]。临床对HBcAb实施酶联免疫吸附试验法时多将待检血清标本进行稀释。此次研究结果显示，将标本按照1：100，1：500，1:1000稀释后再次检测，结果显示HBcAb阳性检出率逐渐增加，当稀释比例达到1:1000时，HBcAb阳性检出率为70.0%，显著高于其他稀释比例下的检出结果。由此可见，稀释度高阳性比例则高于低稀释度的血清样本，过高的HBcAb可能出现假阴性，这表明当抗原抗体比例适中时可能出现明显的免疫反应，当其中一项过少或者过多都将可能造成比例失调出现假阴性，高滴度的HBcAb阳性提示体内HBV出现复制。
综上所述，乙肝病毒核心抗体检测在较低稀释倍数下可能会出现假阴性结果，临床为确保检验结果的准确性，可选择1:1000稀释倍数，以提高检测的准确率。
参考资料
[1]赵霞. 乙型肝炎患者病毒学检验结果分析[J]. 中国卫生产业, 2016, 13(36):70-72.
[2]张碧莹, 邢延芳, 王珍珠,等. 血清稀释与否对检测乙型肝炎核心抗体结果的影响[J]. 中国实验诊断学, 2014, 18(3):428-430.
[3]黄永珍. 乙型病毒性肝炎患者的血清标志物检验结果分析[J]. 检验医学与临床, 2012, 9(11):1374-1375.
[4]康素花, 陈俊伟, 张春山. 标本稀释对乙型肝炎病毒核心抗体检测结果的影响[J]. 中国继续医学教育, 2015,7(19):31-32.
论文作者:吴英
论文发表刊物:《医师在线》2018年1月上第1期
论文发表时间:2018/5/9
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