【摘要】目的：验证高效液相色谱法检测头孢替唑残留检验方法的有效性。方法：选取头孢替唑作为研究样本，制作储备液。采用高效液相色谱法，以乙腈作为色谱纯，以枸橼酸作为分析纯。分别检测不同量的样品溶液的浓度等指标。观察不同储备液的浓度、峰面积，及样品的信噪比与检测限。结果：样品在被检测浓度（0.005502mg/ml～0.01307mg/ml）之间，符合线性关系。当样品浓度为5.502×10-8g/ml时，信噪比为5.0，检测限5.502×10-8g/ml，符合要求。结论：采用高效液相色谱法检测头孢替唑残留，线性方程先关系数良好，检测限可信，应用价值值得肯定。
【关键词】高效液相色谱法；头孢替唑；峰面积；信噪比
【中图分类号】R927.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2017）35-0226-02
前言
头孢替唑为临床常用的头孢菌素类抗生素，对革兰阳性菌及革兰阴性菌，均具有较好的抗菌活性，在治疗气管炎及支气管炎等呼吸系统感染方面，疗效显著。为判断药品质量是否达标，有关领域通常需对药物残留进行检测。高效液相色谱法，为头孢替唑残留的主要检测方法。本文以实验的方式，对该方法在检测头孢替唑残留方面的效果与价值进行了观察与评估。
1.材料与方法
1.1 仪器与试剂
实验需准备以下仪器：（1）准备高效液相色谱仪作为主要分析仪器。（2）准备CP225D型天平称量头孢替唑等样品。（3）准备容量瓶，用于稀释样品溶液。（4）准备移液管。
实验需准备试剂如下：（1）以乙腈作为色谱纯。（2）以枸橼酸作为分析纯。（3）准备实验相关纯化水。（4）准备头孢替唑样品及对照品。
色谱条件：（1）采用枸橼酸溶液作为流动相，由枸橼酸3g+水稀释为900ml制备而成。（2）采用乙腈作为流动相，比例90:10，流速0.8ml/min。（3）波长：254nm。（4）色谱柱柱温：30℃。（5）进样：20μl。
1.2 方法
1.2.1储备液制备方法 准备头孢替唑样品及量瓶，制作储备液：（1）准备头孢替唑25.47mg。（2）将样品置入25ml量瓶。（3）将水加入量瓶。
1.2.2定性、定量与重复性实验 定性、定量与重复性实验方法如下：（1）高浓度溶液制备方法：取储备液1.2ml+100ml水，摇匀，制备成为高浓度头孢替唑溶液。（2）中浓度溶液制备方法：量取储备液1ml+100ml水，摇匀，制备成为中浓度头孢替唑溶液。（3）低浓度溶液制备方法：取储备液0.8ml+100ml水，摇匀，制备成为低浓度头孢替唑溶液。（4）测定方法：取储备液0.6ml、0.8ml、1.0ml、1.2ml及1.4ml，分别注入液相色谱仪，测量并记录相关数据。
1.2.3检测限 待高效液相色谱仪基线稳定后，检测噪音。取0.6ml样品储备液，加入量瓶稀释，摇匀。计算样品的信噪比及检测限。
1.3 观察指标
（1）观察不同量头孢替唑储备液的浓度及峰面积。（2）观察头孢替唑的信噪比及检测限。
2.结果
2.1 不同储备液的浓度及峰面积
不同储备液的浓度及峰面积见表1。
表1 不同储备液的浓度及峰面积
通过表1可以看出，不同量的储备液，浓度不同，峰面积同样不同。随着储备液量的增加，浓度不断增加，峰面积同样呈增加的趋势。通过对各数据的整理及计算，可得到相应线性方程。结合线性方程，得到相关系数为0.9995。表明，样品在被检测浓度（0.005502mg/ml～0.01307mg/ml）之间，符合线性关系。
2.2 样品的信噪比及检测限
实验结果显示，当样品浓度为5.502×10-8g/ml时，信噪比为5.0，检测限5.502×10-8g/ml。根据国家卫生部门的要求，信噪比应≥3。该样品信噪比符合要求。
3.讨论
头孢替唑为半合成的头孢菌素衍生物，可通过抑制细胞壁的合成，发挥抗菌活性。药物进入机体后，可广泛分布于肾脏、血清、肝脏及心肺中，以肾脏分布率最高，其次为血清及肝脏。小鼠实验显示，给药5h后炎性渗出液中仍存在头孢替唑残留，提示药物半衰期长，疗效持久[1]。
随着医疗卫生领域对药品安全问题重视程度的提升，药品残留检测逐渐成为了临床研究的重点问题。对头孢替唑残留进行检测的目的，即在于确保药物的应用安全有效[2]。高效液相色谱法为头孢替唑残留的主要检测方法，流动相多以液体为主，与常规气相色谱检测方法相比，存在较大的差异。高效液相色谱法要求将待检测溶剂，置入色谱柱当中。于色谱柱内完成分离，继而进入检测器检测。通过对检测结果的分析，即可得到所需要的数据。本实验在制备了不同量的头孢替唑溶液后，将其分别置入到量瓶中，得到了不同浓度的储备液。通过对储备液峰面积的计算，发现，随浓度的变化，峰面积同样会发生一定的改变。结合线性方程，得到相关系数为0.9995。表明，样品在被检测浓度（0.005502mg/ml～0.01307mg/ml）之间，符合线性关系。通过对样品的信噪比及检测限的计算得出，当样品浓度为5.502×10-8g/ml时，信噪比为5.0，检测限5.502×10-8g/ml，符合国家卫生部门的要求，证实了高效液相色谱法在头孢替唑残留检验中应用的有效性。
采用高效液相色谱法检测头孢替唑残留，具有效率高、灵敏度高、分析速度快的优势。以头孢替唑溶液为主的流动相，携带种种混合物，进入到固定相中后，可与固定相之间产生一定的反应。在不同反应的作用下，头孢替唑可逐渐被分解为不同物质。通过对分解后的物质的观察，即可得到有关头孢替唑残留的信息。采用该方法检测头孢替唑残留，分离效能高。固定相与流动相之间的作用力强，分离效果佳。与气相色谱法相比，分离结果能够更加清晰的提示药物的成分。本实验持续时间为30min，实验时间较短，表明检测效率较高。采用该方法检测时，色谱柱可反复使用，成本较低，应用价值值得肯定。
综上所述，采用高效液相色谱法检测头孢替唑残留，线性方程先关系数良好，检测限可信。
【参考文献】
[1]张玉华.高效液相色谱法检测头孢替唑残留的检验方法验证[J].科技创业家，2014，(02):206.
[2]刘亚妮，马林，刘金梅.高效液相色谱法测定人血浆中头孢替坦二钠含量的不确定度[J/OL].中国医院药学杂志，2013，33(20):1695-1698.
论文作者:周文君,刘爱明,刘佳
论文发表刊物:《医药前沿》2017年12月第35期
论文发表时间:2018/1/11
标签：头孢论文; 高效论文; 浓度论文; 样品论文; 液相论文; 溶液论文; 色谱论文; 《医药前沿》2017年12月第35期论文;