童英[1]2000年在《多药耐药基因转导提高人造血祖细胞对化疗药物抗性的体外研究》文中研究表明目的： 化疗在妇科恶性肿瘤治疗中占有重要的地位。恶性滋养细胞肿瘤是经过单一化疗能够获得治愈的疾病。妇科常见的恶性肿瘤如卵巢癌、宫颈癌等也是对化疗较为敏感的肿瘤。然而，反复和大剂量化疗带来的骨髓抑制，以及由此所致的化疗剂量减少、疗程缩短及耐药病例增加，是目前妇科恶性肿瘤治疗中面临的主要问题之一。探索化疗中保护骨髓细胞的有效途径，对于提高恶性肿瘤的治疗效果具有重要意义。多药耐药基因(mdr1)编码一种分子量为170kD的跨膜糖蛋白，又称P170。其可将多种细胞毒性化疗药物如泰素(Taxol)、阿霉素(Doxorubicin)、长春新硷(VCR)及鬼臼乙叉甙(VP16)等排出细胞外，从而使细胞对于上述药物产生耐药性。本研究将人mdr1基因导入人CD34~+细胞，观察基因转导后对造血祖细胞的化疗保护作用，并探讨影响基因转导的因素。 方法和结果： 本研究包括以下三个部分： 一、建立含人mdr1基因的逆转录病毒包装细胞系 本研究采用具有较高mdr1基因转导效率的逆转录病毒载体SF-MDR，利用脂质体介导的基因转移方法，将其分别导入单嗜性包装细胞GP+E86和双嗜性包装细胞GP+envAM12，秋水仙素筛选获得抗性克隆。通过单嗜性和双嗜性包装细胞培养上清在32℃，“乒乓”转染，以提高包装细胞系GP+envAM12的病毒滴度。用NIH3T3放大实验进行野生型辅助病毒的检测。 结果：获得了含人mdr1基因的产病毒单嗜性和双嗜性包装细胞抗性克隆。通过单嗜性和双嗜性包装细胞培养上清在32℃，“乒乓”转染，使包装细胞系OP+envAM12的病毒滴度由1×10~4cfu／ml升至1.6 x 10~5cfu／ml。包装出的逆转录病毒转染靶细胞后，无产生野生型辅助病毒的能力。 二、人脐血CD34~+细胞的分离及体外扩增 采用单克隆抗体-磁珠系统，分离出人足月分娩脐血中的
童英, 潘凌亚, 周生, 吴英, 毛宁[2]2000年在《多药耐药基因转导对人造血祖细胞的化疗保护作用》文中研究表明耐药患者的增加是目前临床治疗恶性肿瘤面临的主要问题。多药耐药基因(ｍｄｒ1)编码的相对分子质量为170000的跨膜糖蛋白(Ｐ170),可将多种化疗药物如泰素(Ｔａｘｏｌ)、阿霉素(Ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ)、长春新碱(ＶＣＲ)、鬼臼乙叉甙(ＶＰ16)等排出
参考文献：
[1]. 多药耐药基因转导提高人造血祖细胞对化疗药物抗性的体外研究[D]. 童英. 中国协和医科大学. 2000
[2]. 多药耐药基因转导对人造血祖细胞的化疗保护作用[J]. 童英, 潘凌亚, 周生, 吴英, 毛宁. 中华肿瘤杂志. 2000