谢晶 谢黎明 王淑芬 蒋丰 童文娟
（南华大学附属第一医院妇产科 湖南衡阳 421001）
【摘要】目的：研究miR-26a在妊娠期肝内胆汁淤积症患者中的表达及其在妊娠期肝内胆汁淤积症中的作用。方法：收集妊娠期肝内胆汁淤积症51例患者外周血及同期正常妊娠妇女51例外周血RNA，qRT-PCR检测表达。结果：miR-26a在妊娠期肝内胆汁淤积症患者中明显高于正常妊娠妇女。血清miR-26a水平与围产儿预后相关，但是与患者的年龄、经产、孕周与否没有关系，但是。结论：血清miR-26a在妊娠期肝内胆汁淤积症的诊断和围产儿预后预测中有一定的作用和意义。
【关键词】妊娠；miR-26a；临床意义
【中图分类号】R714.25 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2015）13-0098-02
妊娠期肝内胆汁淤积症是妊娠中、晚期的肝脏疾病，一般产后预后较好。发病最初以皮肤瘙痒，有时出现血胆汁酸、胆红素、肝酶升高为临床特点。目前病因尚不清楚，妊娠期肝内胆汁淤积症可能与女性激素、遗传及环境等因素发挥重要作用有关[1]。最早人们在线虫中发现了lin-4 and let-7这两个miRNA后，紧接着又有许多miRNA被研究者成功的发现。在人类各种疾病中，miRNA表达谱能根据其特定的疾病特性从而能对不同的疾病进行分型。miRNA这种独特的分类特性同时与多种疾病的预后也有明显关系，其包括对疾病治疗后效果、是否复发及对总体生存率的影响。miR-26a位于人类第3号染色体上，全长有21个核苷酸组成，且在多种组织中能广泛表达。大量的研究表明，miR-26a能抑制鼻咽癌、乳腺癌、肝癌细胞的增殖，且抑制多种肿瘤细胞的生长增殖与侵袭[2-3]。本研究旨在探讨miR-26a妊娠期肝内胆汁淤积症患者中的表达及在妊娠期肝内胆汁淤积症中的临床作用。
1.材料与方法
1.1 临床资料
以2012年1月～2014年6月在我院诊断为妊娠期肝内胆汁淤积症的孕妇51例为研究组，年龄24～42岁。配对同期住院51例正常产妇作为对照，年龄24～42岁。
1.2 妊娠期肝内胆汁淤积症的诊断依据[2,3]
①起病大多数在妊娠晚期，少数在妊娠中期，可伴有全身瘙痒，伴或不伴有黄疸；②可伴肝功能异常，血清胆汁酸大于等于16μmol/L；③分娩后瘙痒及黄疸迅速消退，肝功能也迅速恢复正常。
1.3 外周血RNA提取及miRNA检测
利用RNA抽提试剂盒提取5ml外周血的RNA存于-80℃。逆转录RNA 1μg。16℃30min，42℃30min，85℃10min，4℃10min，-20℃保存。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆qRT-PCR检测，置于qRT-PCR，95.0℃，3min；95.0℃，12sec；62.0℃，35sec，40个循环；熔解曲线分析从62.0℃开始至95.0℃停止。
1.4 统计学分析
用SPSS13.0软件，采用t检验，P<0.05，差异有统计学意义。
2.结果
2.1 miR-26a在妊娠期肝内胆汁淤积症患者及正常妊娠妇女外周血的表达情况
qRT-PCR结果表明，51例妊娠期肝内胆汁淤积症患者血清中miR-26a的表达为对照组的0.47±0.07倍，差异有统计学意义（P<0.05）。
2.2 血清miR-26a水平与妊娠期肝内胆汁淤积症患者临床参数的关系
血清miR-26a在孕周≥35的患者miR-26a表达为0.51±0.10倍，<35的患者表达为0.73±0.21倍；年龄≥28岁妊娠期肝内胆汁淤积症患者中的表达为对照组的0.69±0.14倍，<28岁患者miR-26a的表达为0.61±0.12倍；经产妇及未产妇中的表达分别为0.64±0.12倍和0.57±0.11倍，统计学分析显示血清miR-26a与妊娠期肝内胆汁淤积症患者的年龄、孕周、经产与否及胎数无关（P>0.05）。血清miR-26a在围产儿正常的妊娠期肝内胆汁淤积症患者中表达为0.70±0.11倍，在有围产儿早产、死胎、死产的妊娠期肝内胆汁淤积症患者中的表达为0.21±0.07倍，差异有统计学意义（P<0.01）。
3.讨论
妊娠期肝内胆汁淤积症是妊娠中、晚期特有的并发症,对胎儿危害极大, 同时增加了围产儿发病率和死亡率。因此, 我们应及早诊断、治疗及加强胎儿监护特别重要[4]。目前妊娠期肝内胆汁淤积症在发病机制上已取得了一些研究进展，目前仍不十分明确。miRNAs包含19-25个核苷酸的非编码小分子单链RNA，且具有高度保守性、时间和组织特异性。通过与靶基因mRNA形成完全或不完全地碱基配对从而扮演着重要角色，RNA诱导的沉默复合物可导致靶mRNA的翻译抑制或降解，并在转录后水平上调控靶基因表达。miRNAs虽然微小，但在真核生物中广泛存在，它们参与调节细胞增殖与死亡、细胞的分化等各种过程。通常特定的miRNAs在不同的肿瘤及各个阶段表达各不相同，这意味着在肿瘤组织中表达各异的miRNAs与疾病的发生发展以及预后具有一定的相关性[5]。目前有关研究表明miRNA与妊娠期肝内胆汁淤积症发病相关文献鲜少。本研究通过检测miR-26a在正常妊娠妇女和妊娠期肝内胆汁淤积症患者中血清中表达情况分析其表达差异。通过结果显示，我们发现在妊娠期肝内胆汁淤积症患者血清中miR-26a的表达水平比正常妊娠妇女血清中的miR-26a表达水平要显著下调。随后我们又分析了血清miR-26a水平与妊娠期肝内胆汁淤积症患者临床参数之间的关系。同时得出，miR-26a与妊娠期肝内胆汁淤积症患者的年龄、孕周、经产或初产与否及胎数无关，但发现妊娠期肝内胆汁淤积症患者与围生儿的预后有关，围生期正常的妊娠肝内胆汁淤积症患者血清miR-26a表达水平显著低于有围产儿早产、死胎、死产的妊娠期肝内胆汁淤积症患者的表达。因此，miR-26a在血清的表达可被看作是妊娠期肝内胆汁淤积症围产儿预后的潜在靶点。
【参考文献】
[1]Pathak B,Sheibani L,Lee RH.Cholestasis of pregnancy[J].Obstet Gynecol Clin North Am.2010.37(2): 269-82.
[2]Kota J,Chivukula RR,O'Donnell KA,et al.Therapeutic microRNA delivery suppresses tumorigenesis in a murine liver cancer model[J].Cell.2009.137(6):1005-17.
[3]戴钟英.妊娠期肝内胆汁淤积症时终止妊娠的时机选择[J].实用妇产科杂志，2002.(01).
[4]Ghanta KS,Li DQ,Eswaran J,Kumar R.Gene profiling of MTA1 identifies novel gene targets and functions[J].PLoS One.2011.6(2):e17135.
注：基金项目：湖南省卫生厅项目（B2013-041）
论文作者:谢晶,谢黎明,王淑芬,蒋丰,童文娟
论文发表刊物:《心理医生》2015年13期供稿
论文发表时间:2016/4/29
标签：胆汁论文; 妊娠期论文; 患者论文; 血清论文; 产儿论文; 统计学论文; 水平论文; 《心理医生》2015年13期供稿论文;