张国平 王林
（焦作市中心血站 河南 焦作 454000）
【中图分类号】R457.1 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2016）15-0375-02
开展血站核酸检测是保证血液安全的重要举措。国家卫计委印发《全面推进血站核酸检测工作实施方案》[1]，要求落实国务院《卫生事业发展“十二五”规划》提出的：“要完善无偿献血服务体系，加强血站血液安全保障能力建设，积极推进血站核酸检测工作，提高血站实验室检测能力。”[2]我站积极贯彻国家相关要求，经省市卫生行政部门同意设立集中化核酸检测实验室，对区域内所有献血者血液标本进行核酸检测，实现了核酸检测全覆盖。笔者就血站核酸检测实验室实际工作中，对无偿献血者开展核酸检测的关键控制点进行探讨，以期持续提高检测质量，进一步提高血液安全水平。
1.检测前过程
1.1 采血管应使用一次性无菌、无DNA酶、无RNA酶、EDTA或枸橼酸盐抗凝的带分离胶的真空采血管。分离胶是由疏水有机化合物和硅石粉组成的，结构中含有大量氢键，其比重介于血浆和细胞成分之间，可形成隔离层。离心时，由于离心力作用而引起氢键网状结构被破坏变成链状结构，分离胶就成为黏度低的流体。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆当失去离心力后，分离胶中链状结构再次变成网状结构，恢复初始高黏度凝胶状态，在血浆和细胞成分间形成隔离层。
1.2 保证标本与血液同源
采血护士应防止贴错标识，防止留错血液标本，并认真核对体检表标签、血袋标签、标本标签，做到三码一致。
1.3 防止标本溶血
标本溶血后，红细胞破坏所释放的血红蛋白（Hb），其组分亚铁血红素具有过氧化物酶样作用，可能造成ELISA假阳性；Hb及其代谢产物可与Taq酶（耐热DNA聚合酶）相互作用,进而抑制Taq酶的活性,使PCR扩增效率明显降低,导致结果偏低（甚至假阴性）。
1.4 避免脂肪血的采集
血液标本中的脂肪，可干扰核酸提取,甚至导致磁珠残留。采血工作人员，应加强献血宣传，体检时加强对献血者饮食情况问询，避免采集脂肪血。
1.5 标本采集后的处理与保存要求
在采血现场标本保存温度通常为2～10℃，需在4～6小时内使用低温离心机，离心力800～1600g,离心20分钟，将血浆和红细胞分离。离心温度对分离效果有显著影响,用普通离心机分离会出现一些油性小珠。
2.核酸检测过程
2.1 实验室合理分区
核酸检测实验室一般分为试剂准备区、标本制备区、扩增区和产物分析区，这四个区域空间上必须是完全相互独立的，在使用中应始终处于完全的分隔状态，不能有空气的直接相通。如使用全自动扩增检测设备，可根据仪器的特点适当分区，应能有效防止PCR产物污染。实验室的分区原则是各区独立、注意流向、因地制宜、方便工作，同时各工作区应有明确标识。
2.2 配备足够的个人防护用品
有实验用鞋、工作衣或防护服、鞋套、无粉乳胶手套、一次性口罩、一次性帽子等，各实验区的用品应有标识，不得混用；配备有相应防护设备，如洗眼器、急救箱、感应式水龙头、自动净手器等。
2.3 建立标准的血液核酸检测工作程序
保证检测工作流程同一化，标本符合检测项目技术要求，试剂使用符合说明书要求，信息管理系统和设备运行通畅。
2.4 将避免实验室污染，贯穿于整个核酸实验过程中
核酸检测敏感性极高，微量的污染即有可能导致实验失败。引起污染的主要原因有标本污染、扩增产物污染、试剂污染、设备污染和其它污染。应严格控制进出实验室的人员，尽量减少在实验区内不必要的走动以减少交叉污染的可能性，医疗废物按《医疗废物管理程序》执行，废液不能在实验室中倾倒，必须使用和仪器配套的带滤芯吸（抢）头，工作完成后及时对实验室进行有效地清洁去污和消毒，核酸检测实验室要做好日维护、月维护工作。
2.5 做好室内质量控制和室间质量评价工作
室内质控在试剂方面要做到“四个必须”：必须保证使用试剂中有内标；必须保证试剂存放符合要求，防止污染；必须采用阴性对照，以判断核酸实验室是否污染；必须每个检测批次都有阳性对照，以监测核酸提取的有效性。同时应参加国家卫生计生委临床检验中心组织的室间质量评价活动，以评价实验的准确性。如果实验室同时运行1个以上独立的核酸检测系统，则需分别参加室间质量评价。
3.检测后过程
3.1 首先看内标，阴阳对照和质控扩增结果，无误方可发放报告。
3.2 核酸单检阳性献血者的追踪应遵循知情同意原则。酶免阴性核酸单检阳性献血者，应进行追踪，不同的实验项目制定相应的追踪方案。献血者的追踪，需要多个科室协同进行，并遵循知情同意原则。
3.3 开展计算机信息管理系统标准化建设。集中化核酸检测实验室必须应用Lis系统对标本的采集与保存、离心与运输、交接及标签编码，以及检测过程和检测报告的发布等进行信息化管理。委托方和受委托方应统一血液信息管理软件、统一标本编码规则，保证区域内每份血液和其标本的追溯性，保证血液检测信息的准确、及时、安全、有效和完整。
核酸检测可有效地缩短窗口期，降低输血风险，提高血液安全。在献血者核酸检测过程中，应做好实验室管理，制订实验室质量管理体系，严格各项技术操作，熟练掌握仪器设备性能，防止实验室污染，保证检测结果的精密度和准确性，不断提高血液检测质量，确保临床用血安全。
【参考文献】
[1]中华人民共和国国家卫计委.卫计生发〔2013〕22号,全面推进血站核酸检测工作实施方案.
[2]中华人民共和国国家国务院.国发[2012]57号,卫生事业发展“十二五”规划.
论文作者:张国平,王林
论文发表刊物:《医药前沿》2016年5月第15期
论文发表时间:2016/6/23
标签：核酸论文; 标本论文; 实验室论文; 血液论文; 血站论文; 试剂论文; 工作论文; 《医药前沿》2016年5月第15期论文;