丁天兵[1]2000年在《日本脑炎病毒抗独特型单克隆抗体杂交瘤的建立及其初步应用》文中指出免疫网络学说的提出，是现代免疫学发展进程中的一个重要内容，早已获得了学术界的公认，其理论本身也随着科学的进步日臻完善。该理论的一个重要内容就是关于“内影像”的概念。由于内影像抗独特型抗体具有模拟原始外来抗原的特性，因而在传染性疾病疫苗的研制、自身免疫性疾病、肿瘤的免疫防治以及各种受体的研究中均具有重要的理论和实际应用价值。事实上，借助抗独特型的研究手段人们已成功地确定了不少受体，其中也包括一些病毒受体。 日本脑炎是由黄病毒科成员的日本脑炎病毒(JEV)引起的急性中枢神经系统疾病，临床以高热和脑膜刺激征等神经症状为主，主要侵袭少年儿童，病死率在10％左右，约15％的幸存者留有各种各样的后遗症。由于疫苗普遍接种和临床诊治水平的提高，日本脑炎的发病及死亡人数逐年减少，但对其确切的致病机理仍不清楚。由于病毒受体在病毒感染及其致病过程中所起的特殊作用，因而有必要深入进行有关JEV受体的研究。内影像组抗独特型抗体恰好为我们提供了一种研究JEVR的方法，其最大的优点在于不用病毒(或病毒蛋白)即可得到抗病毒受体的“抗体”，可以比较有效地解决研究JEV受体的纯化及其生物学活性等方面的问题。
余慧[2]2009年在《日本乙型脑炎病毒单克隆抗体的研制》文中提出日本乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)是流行性乙型脑炎的病原体,是严重危害人畜健康的一种虫媒病毒,以三带库蚊为主要传播媒介;单克隆抗体因其只针对特定的抗原表位结构且纯度高、特异性强而成为诊断、治疗以及生物制剂的重点,进行日本乙型脑炎病毒单克隆抗体制备等研究对防制该病具有重要意义。本论文报告的是进行日本乙型脑炎病毒单克隆抗体研制的情况。1.日本乙型脑炎病毒抗原的制备与纯化利用BHK-21细胞常规增殖SA14-14-2乙脑病毒,细胞于24 h左右出现细胞病变,48-72 h细胞病变即达到80%左右,此时将接种病毒后的细胞收冻,反复冻融3次后,加入PEG6000及NaCl进行样品浓缩粗提。将初提产物经45000 r/3 h进一步纯化,试验同时设立未接种病毒的细胞组进行相同处理作为对照抗原。将纯化的样品进行PCR鉴定、SDS-PAGE,以及用核酸蛋白测定仪测定纯化后抗原蛋白含量可知:纯化后的样品能够扩增出目的条带;超速离心后的样品进行SDS-PAGE,可见多条蛋白带,说明纯化后的样品具有免疫反应原性;抗原蛋白含量为19.78 mg/mL。上述结果说明本研究成功制备了日本乙型脑炎病毒抗原,并为其单克隆抗体的制备奠定了基础。2.JEV病毒单克隆抗体的制备以纯化的JEV病毒抗原常规途径免疫BALB/c小鼠,取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,用自建的间接ELISA方法初步筛选后,舍去阴性孔和有一个以上细胞克隆生长的孔,选取阳性且只有一个细胞克隆的孔应用乙脑IgG检测试剂盒再检,而后选取试剂盒检测时OD_(450)值最高者应用有限稀释法进行4次亚克隆。结果显示:常规免疫组的融合率约34%,阳性率近1%,共获得3株能稳定分泌抗JEV病毒的杂交瘤细胞系,分别命名为JEV.1、JEV.2、JEV.3。3.JEV病毒单克隆抗体的鉴定经亚型鉴定试剂盒检测JEV.1、JEV.2、JEV.3抗体亚型均为:IgG_1,轻链为k链;间接ELISA方法检测到3株杂交瘤细胞均具有良好的传代及热稳定性,细胞培养上清效价均为10~3,免疫小鼠所制备的腹水效价为10~5,血清中的抗体效价为10~4;相加试验证实此3株细胞系针对的是同一种抗原决定簇;特异性试验及间接免疫荧光试验证实三株单抗均具有良好的特异性;硫氰酸盐洗脱法测定各株单抗的相对亲和力分别为:JEV.1 5 mol/L、JEV.2 4 mol/L、JEV.3 5 mol/L。
佚名[3]1988年在《全军第五届单抗研究协作组学术会议论文摘要(索引)》文中认为一、传染病类001单·克隆抗体治疗日本乙型脑炎的实验研究···,··························……张明杰等(1)D02日本乙型脑炎病毒单抗介导ADCC效应的研究····················,···……张明杰等(1)003
许辉[4]1989年在《肾综合征出血热病毒抗独特型抗体的制备和初步应用研究》文中提出肾综合征出血热(HFRS)是在世界范围内广泛流行的出血发热性传染病。该病发病率及病死率较高，对人民的生命健康危害较大，因此受到医学界的重视。自1978年南朝鲜的李镐汪分离朝鲜出血热病毒成功后以来，该病的病原学、血清学和流行病学等研究取得很大进展。特别是近年来我国学者应用B细胞杂交瘤技术制备了HFRS病毒单克隆抗体，并应用于HFRS病毒抗原的检测、抗原分析，结构蛋白的钝化和HFRS诊断上起到重要作用。在此基础上，本课题将免疫网络理论与HFRS研究相结合，开展了HFRS病毒抗独特型抗体的研究。目前国内外学者对于病毒抗独特型抗体的研究日益广泛，但迄今尚未见到HFRS病毒单克隆抗独特型抗体的研究报道。本研究从分子免疫学的角度探讨了对HFRS病毒抗体的免疫应答，旨在建立制备和检定抗独特型抗体的方法，并探讨相应抗体试剂在HFRS诊断和预防中的应用价值。本研究主要包括以下内容。 一、HFRS病毒的多克隆抗独特型抗体的研究 本研究以HFRS病毒单克隆抗(3(D_(10))、5(H_5)、4(E_7)、4(B_9))为Ab_1，制备了特异性的抗独特型抗体(Ab_2)制剂，并建立了检测纯化Ab_2的方法。初
陈得峰[5]2009年在《水稻白叶枯病菌Harpin_（Xoo）单克隆抗独特型抗体的制备、筛选及其“内影像”特性研究》文中研究指明位于革兰氏阴性植物病原细菌染色体上的hrp基因簇决定其在非寄主植物上的过敏反应和在寄主植物上的致病性。Hrp基因簇包括编Ⅲ型泌出通道的基因、调节基因和编码效应蛋白的基因。Harpins是由革兰氏阴性植物病原细菌产生并受hrp基因调节的一类非特异性激发子,具有共同的特征：富含甘氨酸、对热稳定对蛋白酶K敏感。它们通过III型泌出通道分泌到细胞膜外并转运到寄主植物的细胞质中,能够在寄主植物上引起致病性,在非寄主植物上引起过敏反应,诱导植物抗病,抗虫,促生长以及提高作物的产量与改善作物品质。Harpinxoo是由水稻白叶枯病菌Xanthomonas oryzae pv. oryzae的hrfl基因编码的蛋白质,大小为139个氨基酸(15.6 kDa),具有与其它harpins类似的生物学活性,但在结构和组成上,它显示一些其它harpins不具有的独特性质,如含有其它harpins不具备的半胱氨酸等。植物拥有一套天然的免疫系统,使得它们能够抵御外界病原物的侵染。高等植物的HR,快速在病原物侵染点形成坏死斑,死亡细胞可以将侵入寄主体内的病原物限制在侵染点周围,阻止病原物的进一步扩展而实现局部抗病性,是植物针对多种病原物的主动防御,可进一步激活植物抗病防卫信号通路,使植物获得对此后侵入的多种类型病原物的系统抗病性(systemic acquired resistance, SAR)。当harpin被注射到非寄主植物叶片中时,最显著的特征就是引起过敏反应,而harpin的活性位点是如何被植物细胞识别,在什么部位识别,目前还不清楚。在本研究中,我们引入了一种研究植物-病原菌互作的新方法,应用基于Jerne的免疫网络学说制备出的单克隆抗独特型抗体模拟harpin的活性位点,探索harpin在非寄主植物中受体。本论文着重对以下几方面进行了研究。1 HarpinXoo蛋白的提取与纯化在本研究中,作者从水稻白叶枯病菌PX099基因组DNA中扩增出hrfl基因,用Ndel和HindⅢ叹酶切,随后插入到到pET30a(+)载体的NdeⅠ和HindⅢ两酶切位点之间,获得了重组质粒pET30a(+)-hrf1,转化宿主菌BL21 (DE3)表达融合蛋白。表达菌株E. coli BL21/pET-hrf1在37℃,225rpm经1mM IPTG诱导培养3小时后收集菌体,在100℃沸水中煮10分钟,提取Harpinxoo蛋白,离心分离菌体,蛋白溶解在提取缓冲液中。SDS-PAGE电泳分析表明,获得了大小为16.8kDa蛋白质。注射烟草叶片,引起过敏反应,说明提取到的蛋白为Harpin。用Ni柱对粗蛋白进行纯化,最终获得了单一条带的Harpin蛋白。2免源多克隆抗-Harpinxoo抗体(Abl)的制备与纯化500μg纯化的Harpinxoo溶解于灭菌的PBS中,与等体积的福氏完全佐剂混合乳化后皮下多点注射与肌肉注射交叉免疫新西兰大白兔,随后的加强免疫用200μg抗原与福氏不完全佐剂混合乳化,每两周免疫一次。六周后,采集兔血清用间接ELISA法测定效价,以免疫前三天采集的阴性血清作对照。Protein A/G亲合层析柱纯化兔源多克隆抗血清,获得多克隆抗-Harpinxoo IgG。HarpinXoo注射烟草引起的过敏反应能被兔源多克隆抗体Ab1抑制,甚至完全阻止,说明Ab1结合harpin的一个或多个活性位点,而这些活性位点可能是非寄主植物中受体的结合位点。3体外、体内都具有抑制活性的单克隆抗-Harpinxoo抗体的制备Balb/c小鼠接受四次免疫注射纯化的Harpinxoo后,选取效价最高的一只小鼠做融合,制备杂交瘤细胞。间接ELISA法筛选,有限稀释法亚克隆,两轮筛选后获得6株单克隆抗Harpinxoo杂交瘤细胞(2A10、3H12、4B2、4F7.6G4、7F11)。ELISA叠加实验表明,Harpinxoo上的四个表位被6株单克隆细胞株所识别,其中被6G4识别的表位为Harpinxoo引起烟草过敏反应活性位点。体外研究表明,6G4能够与烟草叶片总蛋白竞争性地结合Harpinxoo,最重要的是在体内,6G4能够部分抑制Harpinxoo引起的烟草过敏反应。6G4显然为一个非常合适的免疫原来制备具有Harpinxoo活性位点“内影像”特征的抗独特型抗体。阐明6G4在体外、体内的反应特性将有助于鉴定引起烟草过敏反应的harpin的关键区域。4具有Harpinxoo"内影像”特征的抗独特型抗体的制备与特性分析用固定化的胃蛋白酶消解纯的兔源多克隆抗体Ab1获得F(ab')2片段,具有抗原结合活性的F(ab')2被用作免疫原来制备具有Harpinxoo“内影像”特征的抗独特型抗体。为制备单克隆抗独特型抗体Ab2, F(ab')2片段和福氏佐剂乳化后免疫小鼠。随着免疫次数的增加,小鼠血清中抗独特型抗体的浓度也在增加。Ab2能够抑制Ab1与harpin的结合,当抑制率达到50%时,三只小鼠血清的稀释倍数分别为：鼠1(917)<鼠2(1094)<鼠3(2540)。因此我们选取竞争抑制效果最好的小鼠3进行细胞融合。应用间接ELISA法和竞争抑制ELSIA法筛选具有Harpinxoo“内影像”特征的抗独特型抗体。用间接ELISA法初步筛选,获得224株抗Ab1的阳性克隆,进一步用竞争ELSIA法筛选,抑制率达到50%以上的细胞株仅获得23株。经过第一轮筛选,具有全部抗独特型抗体的特征并能稳定分泌抗体的细胞株6B2被筛选出来。竞争ELISA结果表明,6B2与Ab1的结合受harpin抑制,但不受其它无关蛋白如：BSA抑制,这进一步可以说明6B2与Ab1的结合位点可能为独特型结合位点。6B2与Harpinxoo竞争性地结合非寄主植物中推定的harpin受体,这是本研究的关键所在。6B2与受体的结合位点和harpin与受体的结合位点可能为同一个活性位点或非常相近的活性位点。6B2与非寄主植物中推定受体的结合可能是交叉反应的结果,或者受体构象发生改变结果,然而,也有可能是两种机制共同作用的结果。6B2免疫新西兰大白兔进一步诱导出与兔源多克隆抗体Ab1相同或相似活性的Ab3,这就佐证了我们制备的抗独特型抗体6B2确实具有Harpinxoo的“内影像”特征。这些结果表明,6B2具有抗原相似性,即,抗独特型抗体6B2可以充当Harpinxoo抗原的“内影像”,因此,根据Jerne的系统命名法,6B2可以归类为Ab2β。总之,应用抗独特型抗体进行抗原模拟是探索生物体内含量非常低的受体的一种可行方法。这种方法涉及到多种学科,如：蛋白质化学、酶学、免疫学以及蛋白质-蛋白质互作,其应用也是非常广泛的,如：功能模拟,用作探针鉴定受体和免疫组织化学定位。
李宝全[6]2005年在《H9亚型禽流感病毒抗独特型抗体的研制与其免疫原性的初步分析》文中认为禽流感是由禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)引起的禽类的一种急性和高度接触性传染病,广泛地流行于世界上多个国家和地区。自二十世纪九十年代以来,我国一些地区相继出现了禽流感的流行,H9N2是流行的主要亚型之一。尽管其危害不如高致病性禽流感(HPAI)严重,但其所引起的蛋鸡产蛋率下降和细菌继发感染也给养禽业造成了不小的经济损失。为了克服目前用于禽流感防治的全病毒灭活疫苗以及用于实验室诊断的全病毒抗原存在的某些弱点,本研究根据免疫网络学说的基本理论,拟制备一种能够模拟AIV抗原的抗体分子,即抗独特型抗体(anti-idiotypic antibody,抗-Id或Ab2),以期望能够在禽流感的防治或实验室诊断中有所用途。 将H9N2亚型AIV增殖,经差速离心和蔗糖密度梯度离心提纯后,灭活,免疫SPF鸡,制备高免血清并提纯免疫球蛋白G(IgG)。以此制备疫苗免疫家兔,制备高免血清并提纯其中的IgG。采用醛化红细胞亲和吸附方法分离兔源AIV抗独特型多克隆抗体(RAb2s),对其生物学和免疫化学性质进行鉴定。提纯和鉴定的结果显示,使用结合有鸡非特异性抗体的醛化红细胞能较完全地吸附掉抗同种型和同种异型抗体;提纯的RAb2s能够和鸡抗AIV抗体特异性结合,能抑制其中和活性;并对H9N2亚型AIV结合鸡抗H9N2亚型AIV抗体有竞争抑制作用。由此证实该RAb2s含有病毒抗原的“内影像”型抗体成分。 此外,对本实验室筛选制备的一种分泌H9亚型AIV IgG抗独特型抗体的杂交瘤细胞所分泌的抗体的某些免疫学性质作了初步分析,结果表明,H9N2亚型AIV能够和该mAb2竞争结合鸡抗AIV IgG,mAb2抑制抗H9血清的血凝抑制活性。以该单抗免疫SPF鸡,可以诱导产生血凝抑制抗体。以上结果表明mAb2具有模拟H9N2亚型AIV血凝素分子(HA)部分抗原性的能力。 将RAb2s和mAb2制成油乳剂疫苗,接种1周龄SPF鸡,并设全病毒灭活疫苗对照组和空白对照组。免疫后定期检测抗体消长规律,于免疫后4周用H9N2亚型AIV进行攻击,结果两个抗-Id疫苗组均被诱导产生了可以结合H9N2亚型AIV的抗体。该抗体可以中和H9N2亚型AIV的毒力,保护SPF鸡胚不受感染。攻毒10d后通过对泄殖腔病毒排放情况的检测,RAb2s疫苗组和mAb2疫苗组可以抑制部分鸡排出病毒。试验结果表明AIV抗独特型抗体对鸡具有免疫原性,能够模拟病毒抗原诱导鸡体产生针
陈克研[7]2011年在《猪血凝性脑脊髓炎免疫层析检测试纸及其灭活疫苗的研制》文中指出猪血凝性脑脊髓炎是由血凝性脑脊髓炎病毒(hemagglutinating encephalomyelitis virus, HEV)引起仔猪的一种急性、接触性传染病。HEV属于冠状病毒属成员,其主要侵害1-3周龄的仔猪,临床上以仔猪呕吐、衰竭和明显的神经症状为主要特征,死亡率达20-100%。1962年,该病原从加拿大患脑脊髓炎的哺乳仔猪体内首次分离获得。1972年,比利时人Pensaert MB从暴发“呕吐和衰竭”症状,而未出现“脑脊髓炎”神经症状的死亡猪扁桃体中分离获得HEV-VW572毒株。以后,世界上许多国家均有该病的报道,尤其以日本、加拿大等国家危害比较严重。血清学调查显示,猪感染HEV非常普遍,且呈世界性分布,大部分被感染的猪处于亚临床状态,一旦发病,将给养猪业造成巨大的经济损失。目前,常规的HEV检测技术主要有病毒分离鉴定、RT-PCR、巢式PCR、血凝/血凝抑制试验(HA/HI)、血清中和试验(VN)等方法。但这些检测方法大多需要专业的技术人员、特定的操作环境以及一些特殊的仪器设备,不适合基层现场检验工作的需要,满足不了该病暴发流行时紧急应对的要求,所以在一定程度上限制了其在兽医临床诊断中的应用。因此,开发一种操作简单、使用方便快捷的HEV检测方法对于基层兽医工作者十分必要。近年来,随着单克隆抗体(McAb)技术的发展与成熟,其在分子生物学、免疫学、生物化学、遗传学等许多领域得到了广泛的应用,许多疾病诊断和鉴别诊断方法的建立都与McAb有关。本研究应用蔗糖密度梯度离心法纯化HEV,免疫Balb/c小鼠,取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,用间接ELISA筛选杂交瘤细胞,获得4株稳定分泌抗HEV的单克隆抗体,分别命名为2H2、2A1、1E2、4D4。经鉴定,4株McAb的ELISA效价在1：12800～1：51200之间；亚类鉴定证实,除1E2为IgG2a外其余3株单抗均为IgGl;Western blot分析表明,2H2、1E2和4D4能识别HEV的血凝素-酯酶蛋白(HE),2Al可识别纤突蛋白(S)；经间接ELISA及间接免疫荧光鉴定,4株单抗均能与HEV结合,其特异性良好；用单抗2A1和2H2建立检测HEV的双抗体夹心ELISA方法,最低可检测3.75μg/mL的病毒,且与猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪瘟病毒(HCV)及牛冠状病毒(BCV)等无交叉反应,说明该方法可用于HEV的检测。胶体金免疫层析技术(Gold Immunochromtographic assay, GICA)是将免疫胶体金技术(Immunogold labeling technique)与层析法结合,以胶体金作为标记物,应用于抗原与抗体之间反应的一种新型检测技术。将McAb与GICA结合制备的胶体金检测试纸条具有操作简单快速、检测结果清楚易于判断、特异性强、敏感性高、无需仪器设备或只需简单的仪器等优点,因此非常适于发病现场、门诊以及实验条件不具备的场所使用,在医学和动物医学检疫、检验等方面已被广泛应用。本实验在成功制备HEV单克隆抗体的基础上,结合胶体金免疫层析技术研制检测HEV的胶体金免疫层析试纸条。首先应用柠檬酸三钠还原法制备胶体金溶液,经电镜观察胶体金颗粒大小在30nm左右；通过梯度法确定McAb与胶体金结合的最佳pH值为8.5,最佳结合浓度为37μg/mL;将制备好的金标单抗包被玻璃纤维膜,另一株McAb及羊抗小鼠IgG分别喷点硝酸纤维膜(NC膜)检测线和质控线,组装试纸条。用该试纸条检测不同浓度的HEV,结果最低可检测30μg/mL的病毒；特异性实验结果表明该试纸条在检测TGEV.PEDV.PRV、HCV.BCV及MHV等病毒时不发生交叉反应；分别用试纸条.RT-PCR及ELISA方法对50份临床样本做平行检测,结果试纸条与RT-PCR和ELISA的符合率为98%,其Kappa值为0.956,说明本实验研制的试纸条可用于临床HEV的检测。应用胶体金免疫层析技术研制检测HEV血清抗体的胶体金免疫层析试纸条,首先将兔抗猪IgG标记胶体金包被玻璃纤维膜,然后用喷点仪将纯化的HEV和羊抗兔IgG分别喷点于NC膜的检测线和质控线,组装成试纸条。用该试纸条分别检测HEV、TGEV、PEDV、PRV、HCV及BCV的阳性血清并用其检测不同HI抗体效价的HEV阳性血清,结果试纸条仅对HEV阳性血清检测时,在检测线及质控线出现清晰的红色条带,且最低可检测HI效价为21的HEV阳性血清,说明试纸条具有很好的特异性和敏感性；用同一批次和不同批次的试纸条检测HEV阳性血清,结果试纸条批内重复及批间重复差异不大,变异系数为0.82%,证明试纸条重复性较好；保存期试验证明该试纸条4℃保存12个月,其特异性和敏感性均未发生变化,说明试纸条具有很好的稳定性；分别用试纸条、ELISA及HI试验对50份临床血清样本进行检测,评估试纸条与二者的相关性。结果试纸条与ELISA的符合率为98%, Kappa值为0.953；与HI试验的符合率为96%,Kappa值为0.911,说明试纸条可代替ELISA和HI试验用于临床血清样本检测。应用本实验室研制的试纸条对吉林省及辽宁省部分地区进行HEV的血清抗体调查,结果672份血清样本中,有334份呈阳性,总阳性率为49.7%,提示被检测地区的猪群中普遍存在HEV感染。目前,HEV的暴发呈上升趋势,且未见有关预防或治疗HEV的特效药物或疫苗的研究报道,仅在国外部分国家应用“亚感染”进行预防,即在母猪临产前一个月与病猪接触或喷雾或肌肉注射培养的弱毒,使母猪获得免疫,进而通过初乳中的抗体保护后代仔猪,使其不表现临床症状,而这些猪大多呈亚临床感染,且此种免疫方法存在着散毒的危险。因此,研制高效安全的疫苗对HEV的防治有重要的现实意义。本试验选用HEV-67N标准毒株作为疫苗研制的候选毒株,通过优化体外培养条件,确定HEV-67N在PK-15细胞上培养传代,并建立PK-15细胞的原始种子细胞库(123～126代细胞)、基础种子细胞库(127～136代细胞)和工作种子细胞库(137～141代细胞)；同时分别建立HEV-67N原始种子病毒库、基础种子病毒库和工作种子病毒库；随机抽取细胞库及病毒库中的细胞和病毒,通过镜下观察、无菌检验、支原体检测及核酸分析等检测均符合“兽用生物制品质量标准”；然后在筛选出优良佐剂的基础上,取工作种子病毒库的病毒液,经4%o甲醛灭活后,按《中华人民共和国兽用生物制品质量标准》规定,将氢氧化铝胶佐剂和灭活的病毒按1∶9比例混匀,制备HEV细胞培养灭活疫苗。随机抽取实验室制备的疫苗以不同剂量接种Balb/c小鼠和怀孕母猪,结果该疫苗除了可以诱导良好的特异性免疫应答外,不产生任何临床副作用,说明本疫苗对小鼠和怀孕母猪是安全有效的；对注射疫苗后产生不同抗体效价的Balb/c小鼠进行脑内攻毒,结果当小鼠HI抗体效价≥25时,其保护率可达80%以上,且HI抗体效价滴度与免疫攻毒试验间存在良好的平行关系,可代替常规的攻毒保护率试验；将HEV灭活疫苗免疫Balb/c小鼠,结果小鼠经3次免疫后,HI抗体效价最高达29,进而通过血清亚类鉴定、淋巴细胞增殖实验、细胞因子检测等方法证实,该疫苗可刺激小鼠产生特异性的体液免疫应答,且以Th2型免疫应答为主；最后对疫苗的保存期进行评定,疫苗在2～8℃和室温(13℃～28℃)分别保存至12个月和4个月时,其物理性状及免疫效力未见变化,这与灭活疫苗稳定、便于保存运输的特点基本一致。由此可见,本实验制备的HEV灭活疫苗可安全有效的刺激机体产生特异性免疫应答,仔猪可通过经疫苗免疫的怀孕母猪产生HEV抗体,从而达到预防该病的目的,该疫苗的研制对HEV的防治有重要的现实意义。
佚名[8]1994年在《基础学科》文中研究表明S852.1 940044鸡食管副交感节前神经元和感觉神经元的定位/雷
郑佳[9]2006年在《T-2毒素抗独特型多抗的制备及无毒ELISA定量检测试剂盒的初步研制》文中提出背景：T-2毒素属于单端孢霉烯族化合物中的A族，是该类化合物中毒性最强、污染水平较高的毒素之一，主要是由三线镰刀菌，梨孢镰刀菌，拟枝孢镰刀菌和木贼镰刀菌等霉菌产生。T-2毒素主要污染小麦、玉米、大麦、燕麦和黑麦等谷物及麦芽、啤酒和面包等农产品。关于T-2毒素污染情况的报道，大多集中于对谷物和饲料的调查。据文献报道，T-2毒素在各洲的谷物中广泛存在。国内报道在大骨节病区小麦、玉米及非病区小麦、大米中均有检出。结合国外资料，认为T-2毒素在全世界不同地区，对不同谷物均有一定程度的污染。 在动物实验中，T-2毒素对动物显示了比较明确的免疫毒性及血液毒性，可抑制DNA、RNA及蛋白质合成，诱导细胞凋亡，引起白细胞缺乏等。人类误食了大量污染该类毒素的谷物后，除表现呕吐、腹痛、腹泻等急性症状外，可有白细胞缺乏，坏死性咽峡炎，骨髓发育不良，食管和胃严重坏死等，病死率高(死亡率高达50％-60％)。二战期间前西伯利亚阿穆尔地区，数千人因进食了被镰刀菌污染的越冬小麦而发生食物中毒，在后来的产毒试验中，发现了高水平的T-2毒素；我国的安徽、河南两省在1991年因洪涝灾害而引起霉变小麦中毒，当时在采集的48份样品中，47份均检出T-2毒素，平均含量在255.9～671.6ppb之间，最高值可达1064.6ppb。此外，T-2毒素还与我国某些地区食管癌、克山病和大骨节病的高发病率有着密切的关系。近几十年，T-2毒素还被作为生物战剂用于战争中。 目前，检测粮谷类食品和饲料中T-2毒素的方法主要有薄层色谱法(TLC)、液相色谱法(LC)、气相色谱法(GC)、气质联用(GC-MS)、酶联免疫吸附测
佚名[10]1990年在《单克隆抗体通讯(季刊)1990年第6卷第1～4期总目次》文中进行了进一步梳理评述全军单克隆抗体的研究进展刘成贵(1一王)论著抗人白细胞间素一2多克隆及单克隆抗体的生物学特征···············……王小宁予(1一5)抗人白细胞问素一2 McAb亲和力排列及亲和指数的测定·············一王小宁等(1一11)抗乙
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